Les milieux de culture Aspect microscopique Bacilles Gram + présentant une spore À l’EF : mobiles le plus souvent par ciliature péritriche Spore très résistante, non détruite à 100°C pendant 3 à 5 heures. Les milieux de culture des Clostridium Milieu de SCHAEDLER Bouillon trypticase soja Polytone Sg glucose Extrait de levure Tris-hydroxyméthylaminométhane Hémine L-cystéine ED pH = 7,6 Utilisation: 10 g 5g 5g 3g 0,01 g 0,40 g qsp 1 L Source N et de C, de vitamines Tampon (maintien du pH constant) Facteur de croissance (synthèse des cytochromes) Acide aminé, réducteur Ce milieu peut-être : enrichi par addition de vitamine K3. sélectif par addition d'inhibiteurs . solide par addition d'agar : gélose Schaedler. Bouillon ou gélose Schaedler simple: bactéries non exigeantes du genre Clostridium . Bouillon ou gélose enrichi(e): bactéries exigeantes de la flore de Veillon. Milieu de culture utilisé pour les bactéries anaérobies exigeantes : gélose Schaedler + vitamine K3 + sang frais à une concentration de 5%. Milieu de Rosenow cystéine Composition Peptone trypsique Extrait de viande de bœuf Chlorure de sodium Chlorhydrate de Cystéine Glucose Indicateur d’Andrade (fushine acide dans de l’ED) ED 10 g 3g 2g 0,3 g 2g 10 mL Source N et de C Sources minérales Acide aminé, réducteur Source énergétique carbonée Indicateur d’oxydo réduction qsp 1 L pH = 7,2 Ajouter dans le tube: Un morceau de marbre Un morceau de cervelle de boeuf Ensemencement Régénérer le milieu 20 min au BM à 100°C pour assurer l’anaérobie La présence d’un réducteur renforce l’anaérobie Ensemencer en profondeur le tube en évitant les bulles d’air Recouvrir de paraffine fondue Incuber 24 heures à 37°C. Milieu MRS Composition Peptone trypsique de caséine Macération de viande Extrait de levure Acétate de sodium Citrate d’ammonium Phosphate bipotassique Tween 80 Sulfate de magnésium Sulfate de manganèse Glucose Agar ED 15 g 500 mL 5g 5g 2g 2,4 g 1 mL 0,2 g 0,05 g 20 g 12 g qsp 1 L Source N et de C, vitamines et minéraux, d’acides aminés Inhjbiteurs (concentrations ) Source minérale Apport d’acides gras Sources minérales Source énergétique de C pH = 6,5 inhibiteur C’est un milieu d’isolement sélectif et enrichi des Lactobacillus utilisé pour l’isolement et le dénombrement de ces bactéries dans les produits laitiers. Ensemencement Isolement par la technique des quadrants et incubation sous atmosphère à CO2 .
