Telechargé par Najwa ELAKROUCHI

td MILIEU DE CULTURE 3

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Les milieux de culture
Aspect microscopique
Bacilles Gram +
présentant une spore
À l’EF : mobiles le plus
souvent par ciliature
péritriche
Spore très résistante, non
détruite à 100°C pendant 3 à 5
heures.
Les milieux de culture des Clostridium
Milieu de SCHAEDLER
Bouillon trypticase soja
Polytone Sg glucose
Extrait de levure
Tris-hydroxyméthylaminométhane
Hémine
L-cystéine
ED
pH = 7,6
Utilisation:
10 g
5g
5g
3g
0,01 g
0,40 g
qsp 1 L
Source N et de C, de vitamines
Tampon (maintien du pH constant)
Facteur de croissance (synthèse des
cytochromes)
Acide aminé, réducteur
Ce milieu peut-être :
enrichi par addition de vitamine K3.
sélectif par addition d'inhibiteurs .
solide par addition d'agar : gélose Schaedler.
Bouillon ou gélose Schaedler simple: bactéries non exigeantes du genre Clostridium .
Bouillon ou gélose enrichi(e): bactéries exigeantes de la flore de Veillon.
Milieu de culture utilisé pour les bactéries anaérobies exigeantes : gélose Schaedler +
vitamine K3 + sang frais à une concentration de 5%.
Milieu de Rosenow cystéine
Composition
Peptone trypsique
Extrait de viande de bœuf
Chlorure de sodium
Chlorhydrate de Cystéine
Glucose
Indicateur d’Andrade
(fushine acide dans de l’ED)
ED
10 g
3g
2g
0,3 g
2g
10 mL
Source N et de C
Sources minérales
Acide aminé, réducteur
Source énergétique carbonée
Indicateur d’oxydo réduction
qsp 1 L
pH = 7,2
Ajouter dans le tube:
Un morceau de marbre
Un morceau de cervelle de boeuf
Ensemencement
Régénérer le milieu 20 min au BM à 100°C pour assurer l’anaérobie
La présence d’un réducteur renforce l’anaérobie
Ensemencer en profondeur le tube en évitant les bulles d’air
Recouvrir de paraffine fondue
Incuber 24 heures à 37°C.
Milieu MRS
Composition
Peptone trypsique de caséine
Macération de viande
Extrait de levure
Acétate de sodium
Citrate d’ammonium
Phosphate bipotassique
Tween 80
Sulfate de magnésium
Sulfate de manganèse
Glucose
Agar
ED
15 g
500 mL
5g
5g
2g
2,4 g
1 mL
0,2 g
0,05 g
20 g
12 g
qsp 1 L
Source N et de C, vitamines et
minéraux, d’acides aminés
Inhjbiteurs (concentrations )
Source minérale
Apport d’acides gras
Sources minérales
Source énergétique de C
pH = 6,5 inhibiteur
C’est un milieu d’isolement sélectif et enrichi des
Lactobacillus utilisé pour l’isolement et le dénombrement
de ces bactéries dans les produits laitiers.
Ensemencement
Isolement par la technique des quadrants et incubation sous atmosphère à CO2 .
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