Les milieux de culture
Aspect microscopique
Bacilles Gram +
présentant une spore
Spore très résistante, non
détruite à 100°C pendant 3 à 5
heures.
À l’EF : mobiles le plus
souvent par ciliature
péritriche
Les milieux de culture des Clostridium
Milieu de SCHAEDLER
Bouillon trypticase soja 10 g
Polytone Sg glucose 5 g
Extrait de levure 5 g
Tris-hydroxyméthylaminométhane 3 g
Hémine 0,01 g
L-cystéine 0,40 g
ED qsp 1 L
Source N et de C, de vitamines
Acide aminé, réducteur
pH = 7,6
Ce milieu peut-être :
enrichi par addition de vitamine K3.
sélectif par addition d'inhibiteurs .
solide par addition d'agar : gélose Schaedler.
Bouillon ou gélose Schaedler simple: bactéries non exigeantes du genre
Clostridium
.
Bouillon ou gélose enrichi(e): bactéries exigeantes de la flore de Veillon.
Milieu de culture utilisé pour les bactéries anaérobies exigeantes : gélose Schaedler +
vitamine K3 + sang frais à une concentration de 5%.
Utilisation:
Facteur de croissance (synthèse des
cytochromes)
Tampon (maintien du pH constant)
Milieu de Rosenow cystéine
Composition
Peptone trypsique 10 g
Extrait de viande de bœuf 3 g
Chlorure de sodium 2 g
Chlorhydrate de Cystéine 0,3 g
Glucose 2 g
Indicateur d’Andrade 10 mL
(fushine acide dans de l’ED)
ED qsp 1 L
Source N et de C
Acide aminé, réducteur
Source énergétique carbonée
pH = 7,2
Ensemencement
Sources minérales
Régénérer le milieu 20 min au BM à 100°C pour assurer l’anaérobie
La présence d’un réducteur renforce l’anaérobie
Ensemencer en profondeur le tube en évitant les bulles d’air
Recouvrir de paraffine fondue
Incuber 24 heures à 37°C.
Ajouter dans le tube:
Un morceau de marbre
Un morceau de cervelle de boeuf
Indicateur d’oxydo réduction
Milieu MRS
Composition
Peptone trypsique de caséine 15 g
Macération de viande 500 mL
Extrait de levure 5 g
Acétate de sodium 5 g
Citrate d’ammonium 2 g
Phosphate bipotassique 2,4 g
Tween 80 1 mL
Sulfate de magnésium 0,2 g
Sulfate de manganèse 0,05 g
Glucose 20 g
Agar 12 g
ED qsp 1 L
Source N et de C, vitamines et
minéraux, d’acides aminés
Apport d’acides gras
pH = 6,5 inhibiteur
Source minérale
Inhjbiteurs (concentrations
)
Ensemencement
Isolement par la technique des quadrants et incubation sous atmosphère à CO2.
C’est un milieu d’isolement sélectif et enrichi des
Lactob
acillus
utilisé pour l’isolement et le dénombrement
de ces bactéries dans les produits laitiers.
Source énergétique de C
Sources minérales
1
/
5
100%
