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Les chromograninessont des glycoprotéines régissant la sécrétion des neuropeptides par les
cellules neuroendocrines. Ces protéines interagissent avec les neuropeptides dans la lumière
du réseau trans-golgien (TGN) et les dirigent vers les granules de sécrétion à cœur dense
(GSCD). Ces organites bourgeonnent à partir du TGN, se dirigent vers la membrane
plasmique avec laquelle ils fusionnent suite à un stimulus pour libérer leur contenu. Les
GSCDforment ainsi la voie de sécrétion régulée propre aux cellules neuroendocrines. Des
études pionnières ont montré que l’invalidation du gène codant lachromogranine
A(CgA)entraîne une diminution du nombre de GSCDdans les cellules chromaffines, ainsi
qu’une altération du stockage des catécholamines responsable d’hypertension chez la
souris. Toutefois, le mécanisme moléculaire d’action de la CgA reste mal connu. Les cellules
neuroendocrines co-exprimant plusieurs chromogranines, nous avons développé un modèle
cellulaire simplifié en exprimant la CgA dans des cellules non-endocrines COS7, ce qui
entraîne la formation de structuresgranulaires contenant la CgA et présentant les
caractéristiques d’authentiques GSCD. Afin d’identifier les partenaires moléculaires de la
CgA, nous avons purifié ces granulescontenant la CgA puis analysé leur protéome par LC-
MS/MS. Les protéines les plus abondantes sont l’actine et des protéines liées à l’actine telles
que des myosines et le complexe de nucléation de l’actine Arp2/3. Nous nous sommes
intéressés à la myosine 1b et à Arp2/3 étant donné leur implication dans la formation de
compartiments post-golgiens dans les cellules HeLa. Dans notre modèle, ainsi que dans les
cellules chromaffines tumorales PC12, l’inhibition de l’expression de la myosine 1b à l’aide
desiARN provoque une diminution drastique du nombre de GSCD associée à une abolition de
la sécrétion régulée. Une diminution significative de la répartition périgolgienne de l’actine,
reproduite par le blocage de Arp2/3, a également été constatée. Ces résultats démontrent
pour la première fois que la myosine 1b et la F-actine sont requises pour la biogenèse des
GSCD. Néanmoins, le lien moléculaire entre la CgA soluble dans leTGN et la myosine 1b
interagissant avec la face cytosolique du TGN reste à identifier. L’analyse de la structure de
la CgA ayant permis de mettre en évidence la présence d’hélices alpha dans les régions
terminales impliquées dans l’activité granulogénique, nous recherchons actuellement
l’interaction potentielle de la CgA avec les lipides membranaires dans les cellules
neuroendocrines.
Ce travail bénéficie du soutien de l’Inserm, l’Université de Rouen Normandie,le Ministère de
l’Education Nationale, de l’Enseignement Supérieur et de la Recherche, la Région Haute-Normandie et
la Fondation pour la Recherche Médicale.