Les outils de la biologie moléculaire

Dr. Jacques PAOLETTI
Les outils de la biologie moléculaire
•Enzymes qui coupent les acides
nucléiques
•Enzymes qui changent les contraintes des
AN
•Enzymes qui travaillent sur les phosphates
•Enzymes qui recopient les acides
nucléiques

Dr. Jacques PAOLETTI
CAG
3’
PP P P
3’ 3’
5’ 5’ 5’
Polarité de la chaîne d’ADN
Polarité de la chaîne d’ADN

Dr. Jacques PAOLETTI
Les nucléases
Les enzymes de restriction
La DNase I
La nucléase S1

Dr. Jacques PAOLETTI
Les enzymes de restriction
Définition
Le palindrome
Symétrie de la coupure
Coupure à bouts collants
Coupure à bouts francs
Restriction et méthylation de l’ADN

Dr. Jacques PAOLETTI
Les enzymes de restriction sont des outils utilisés pour couper l’ADN.
La coupure de l’ADN se fait en un site particulier reconnu par l’enzyme.
Chaque enzyme reconnaît une séquence d’ADN qui lui est spécifique.
Les enzymes de restriction appartiennent à la classe des endonucléases
c’est-à-dire des enzymes capables de cliver les liaisons phosphodiester entre
deux nucléotides à l’intérieur d’un acide nucléique
Les endonucléases se différencient des exonucléases qui dégradent la molécule d’ADN
à partir de l’une de ses extrémités (3’ ou 5’).
5’
5’
3’
3’
5’
5’
3’
3’
Les enzymes de restriction
Les enzymes de restriction