Les enzymes de restriction :

Analyse d’ADN : ce qu’il faut savoir…
A- Principe général de la constitution d’un profil génétique
Voici 5 profils génétiques :
1- A quoi correspondent ces bandes noires ?
2- Comment les a-t-on obtenues ?
3- Que peux-t-on en sortir comme informations
B- L’ADN : structure générale
Logiciel RASTOP, puis ouvrir ADN,
1- Choisissez la bonne représentation (boules et bâtons).(icônes)
2- En cliquant sur les atomes, le nom du groupe apparaît.
3- En principe le cœur de la molécule est constitué de bases azotées choisies parmi 4 possibles : Adénine, Thymine, Cytosine,
Guanine. A va avec T et C avec G.
Un gène est une suite très longue de ces 4 lettres dans un ordre déterminé.
Quelle est la charge électrique de l’ADN sachant qu’il est un polynucléotide? Explications. Schéma de la molécule d’ADN (Rastop)
Acide
phosphorique
Désoxyribose
Sens de
lecture
Base azotée
Un nucléotide
C-Quel est le lien entre gène et fonctionnement de la cellule (voir cours de SVT).
C- Les gènes et les allèles
1- Logiciel Démarrer/tous les programmes/Logiciels réseau/SVT biologie/anagene/anagene.exe
2- Fichier/ thèmes d’étude/polymorphisme des gènes/ groupes sanguins
3- Sélectionnez les séquences à comparez, et dites ce qui les différencie. Nommez ces modifications. Aidez-vous d’Internet.
4- Utilisation des propriétés de l’ADN dans l’identification individuelle : dans la zone classe, manuel de laboratoire et rubrique
fréquence des profils. Explications détaillées.
D- Les enzymes de restriction :
1- Logiciel Démarrer/tous les programmes/Logiciels réseau/SVT biologie/anagene/anagene.exe
2- Fichier/ ouvrir/sauve/ElecADN/ puis ADNphage.edi
Il s’agit de l’ADN d’un virus coupé en plusieurs morceaux. Vérifiez qu’il s’agit d’ADN.
3- Sélectionnez les séquences, puis menu Traiter/action enzymatique.
4- Sélectionnez ensuite dans le cadre de la partie gauche, les enzymes qui coupent l’ADN en repérant un site à 4 Bases (sélectionnez
les 3 premières enzymes :Alu I, tha I, hae III.)
5- Faites agir ces enzymes et étudiez le lieu de cette action et la taille des morceaux coupés. Conclusions
6- Fermez ce fichier, puis ouvrir le fichier /sauve/virmut.edi.
7- Comparez les séquences d’ADN de ces deux espèces (sélectionnez les deux séquences avec les boutons, puis comparer,
comparaison simple. Un – indique une identité sinon la différence est affichée).
8- Faites agir l’enzyme de restriction ALU I sur les 2 séquences et comparez les morceaux formés en sélectionnant dans la fenêtre de
restriction une séquence ou l’autre. Conclusions.
9- Comparez les deux tableaux de restriction (click sur la séquence en haut, puis information sur la ligne pointée) puis copier coller
dans un tableau à 1 ligne et 2 colonnes de word.
10- Un petit résumer pour expliquer comment l’électrophorèse de ces 2 séquences permettra d’identifier les 2 espèces, ou de voir s’il
n’y a qu’une seule espèce.