Outil rapide d`identification à la ferme des bactéries causant la

Outil rapide d’identification à la ferme
des bactéries causant la mammite
Système décisionnel pour le traitement de la mammite
www.reseaumammite.org
Pourquoi utiliser cet outil?
La mammite est la cause première de l’utilisation des antibiotiques sur les fermes
laitières. Différents types de bactéries peuvent infecter le pis. Certaines d’entre
elles ont des taux élevés d’autoguérison ou répondent mal aux traitements. Il est
important de bien les identifier pour aider le producteur et son médecin vétérinaire
à cibler le traitement à administrer, s’il y a lieu, sans toutefois nuire ou
retarder la guérison.
Les bactéries Gram + et Gram –
Une technique de coloration en laboratoire permet de classifier la plupart des
bactéries en deux catégories :
Bactéries Gram positif
• Principalement des staphylocoques
et des streptocoques
• Paroi cellulaire mince
Exemples de bactéries Gram + et Gram -
Gram positif Gram négatif
Staphylococcus aureus Escherichia coli
Staphylococcus spp. Klebsiella spp.
Streptococcus uberis Enterobacter spp.
Streptococcus dysgalactiae Serratia spp.
Streptococcus agalactiae Pasteurella spp.
Corynebacterium bovis
Bactéries Gram négatif
• Principalement des coliformes
• Paroi cellulaire très épaisse qui
protège des effets de la plupart des
antibiotiques, détergents et
produits chimiques
• Contiennent des
lipopolysaccharides toxiques
• Ne répondent pas bien aux
traitements antibiotiques
Comment ça fonctionne?
L’identification de la bactérie est faite par
la culture de lait infecté sur une plaque
contenant des nutriments qui favorisent
la croissance des bactéries. Une période
d’incubation d’environ 24 heures est
nécessaire pour que la plaque révèle
la présence de colonies de bactéries.
Plusieurs types de plaques, avec des
nutriments spécifiques, peuvent être
utilisés pour identifier les bactéries
présentes dans le lait. La catégorie
de bactéries est déterminée selon la
croissance et le nombre de colonies
sur les plaques spécifiques.
Avantages
•Permet de mieux cibler les cas causés par des bactéries Gram + (donc à traiter)
•Identification plus rapide des bactéries que la culture bactériologique en
laboratoire (sans pour autant la remplacer)
•Usage plus rationnel des antibiotiques
•Réduction des pertes de lait
•Diminution des risques de résidus d’antibiotiques dans le lait
Limites
•Minutie requise pour réaliser la technique en évitant la contamination
•Interprétation influencée par l’expérience et la formation de l’usager
•Identification impossible des mycoplasmes et des levures
(dont le traitement n’est pas recommandé)
Ce document peut être reproduit en version intégrale seulement, à des fins éducationnelles, sans autre permission, si les crédits sont accordés au RCRMB.
Étalement du lait sur
la plaque CC (rouge)
Déposez délicatement le côté plat de
l’étaleur (RED doit être vers vous si
vous utilisez celui de MQM) sur la
pellicule et presser légèrement pour
répartir le lait.
Dépôt des plaques
dans l’incubateur
Déposez délicatement les plaques
dans l’incubateur préchauffé à la
bonne température (35 °C).
Assurez-vous qu’il contienne un
peu d’eau pour maintenir une
légère humidité.
Période d’incubation pour les plaques AC et CC
La période d’incubation requise est :
•24 heures pour la plaque de •24 heures pour la plaque
numération des bactéries de numération des
aérobies - AC coliformes - CC
Interprétation des résultats
• L’interprétation des résultats peut nécessiter l’assistance
d’un médecin vétérinaire pour confirmer le diagnostic.
•Établissez également avec lui un protocole de traitement
approprié selon les résultats obtenus.
• La catégorisation en Gram positif, Gram négatif et
Aucune croissance peut être réalisée grâce aux plaques
AC et CC. Un guide d’interprétation est disponible sur
www.milkquality.ca
• Pour les cultures Staph Express (STX) positives et confirmées
par le disque mauve, traitez ces cas selon les directives de
votre médecin vétérinaire.
Inoculation de la plaque
PetrifilmMCSTX
1. Inoculation
Soulevez la pellicule et déposez 1 ml de lait dilué,
perpendiculairement et directement au centre
de la plaque, sans la toucher avec la seringue.
Déroulez lentement la pellicule sur le lait.
2. Étalement du lait
Déposez délicatement l’étaleur rond et plat sur la
pellicule et pressez légèrement pour répartir le lait.
3. Période d’incubation
Incubez la plaque STX à 35 °C pendant 24 heures.
4. Insertion du disque mauve
Insérez le disque mauve entre la pellicule et la plaque.
Suite à l’insertion du disque, incubez 3 heures de plus
à 35 °C.
Procédez à l’interprétation.
01/09/10
8.
9.
10.

Outil rapide d’identification à la ferme des bactéries causant la mammite
Système décisionnel pour le traitement de la mammite
MISE EN GARDE
•Le système de culture à la ferme doit être utilisé pour des cas légers ou modérés de
mammite (grade 1 ou 2) sans présence de fièvre (< 39,5 °C) ou de maladies graves.
•Il est essentiel d’élaborer un protocole d’échantillonnage et un protocole de traitement
associés à l’utilisation de ce système avec votre médecin vétérinaire.
•Si les symptômes cliniques s’aggravent, prenez des mesures immédiatement et consultez
votre médecin vétérinaire.
Matériel nécessaire
Inclus dans la Trousse du Maritime Quality Milk (MQM) :
•Plaques PetrifilmMC pour numération des coliformes
(GRAM –) cercle rouge avec styromousse portant le code CC
• Plaques PetrifilmMC pour numération des bactéries aérobies
(GRAM +) blanches sans styromousse portant le code AC
• Étaleur (surface striée et surface lisse)
• Seringues de 3 ml
•Flacons stériles d’échantillonnage
• Flacons de diluant (eau physiologique 0,9 % NaCl ou
tampon phosphate)
•Tampons de gaze imbibés d’alcool
Non inclus dans la Trousse MQM :
• Incubateur*
• Gants de nitrile
• Plaques PetrifilmMC Staph Express (staphylocoques) :
cercle blanc avec styromousse portant le code STX
et disque mauve Staph Express
(optionnel pour la détection de Staph. aureus)
• Étaleur pour Staph Express (rond et plat)
À la ferme, à la maison ou à la clinique vétérinaire, installez le
« laboratoire » dans un endroit propre et sec pour éviter la contamination.
* L’incubateur recommandé est le Turbofan Hova-Bator modèle 1602, disponible auprès de
votre magasin local de fournitures agricoles ou consultez internet pour connaître le point
de vente le plus près.
Sources et crédits photos :
Maritime Quality Milk (MQM), Charlottetown, IPE
3M Canada
Le système décisionnel pour le traitement de la
mammite de MQM utilise les plaques de
numération PetrifilmMCconçues par 3MMC pour
identifier les bactéries causant la mammite
dans le lait. Pour commander la Trousse de
MQM, contactez votre médecin vétérinaire ou :
Maritime Quality Milk
550, avenue University
Charlottetown, Île-du-Prince-Édouard
Canada C1A 4P3
Tél. : [phone] / Téléc. : 902-620-5053
Courriel : [email protected]
www.milkquality.ca
Pour commander directement les produits
PetrifilmMCou pour consulter un représentant,
veuillez contacter :
3M Canada
Tél.: [phone]
1
2
1
23
3
Inoculation des plaques PetrifilmMCAC et CC
Matériel
Préparez tout le matériel
nécessaire avant de débuter.
Dilution du lait
Ouvrez le flacon contenant 45 ml d’eau et ajoutez environ 5 ml de lait infecté
afin d’atteindre la ligne de 50 ml. Fermez les deux flacons. Identifiez bien le
flacon contenant le lait infecté non utilisé et congelez-le pour l’envoi au
laboratoire, si nécessaire.
Étalement du lait sur la
plaque AC (blanche)
Déposez délicatement le côté
strié de l’étaleur (WHITE doit être
vers vous si vous utilisez celui de
la trousse MQM) sur la pellicule et
pressez légèrement pour répartir
le lait.
Inoculation des plaques
Soulevez la pellicule et déposez 1 ml de
lait dilué directement au centre de chaque
plaque sans la toucher avec la seringue.
Pour la plaque CC, déroulez lentement la
pellicule sur le lait.
Pour la plaque AC, laissez tomber la pel-
licule d’un coup sans la dérouler. Pour
toutes les plaques : ne touchez pas à la
surface de la plaque.
Préparation du mélange
Effectuez doucement une rotation du
flacon pour diluer le lait dans l’eau.
Mesure du lait dilué
Prélevez environ 2 ml de lait
dilué avec la seringue.
Échantillonnage du lait
•La qualité de l’échantillon de lait prélevé est primordiale pour
obtenir de bons résultats. Utilisez un flacon d’échantillonnage
propre.
•La technique de prélèvement doit être stérile afin d’éviter la
contamination de l’échantillon et une interprétation erronée.
•Pour vous aider, consultez la fiche pratique illustrée Technique
d’échantillonnage du lait pour analyse bactériologique ou la vidéo
L’ABC de l’échantillonnage du lait pour l’analyse bactériologique
produites par le RCRMB. www.reseaumammite.org
Entreposage et manutention des
plaques de la Trousse MQM
•La durée de conservation est de 1 an
à la température ambiante
•Éviter la salle de traite et la laiterie
(humidité élevée)
•Conserver la plaque dans son emballage
individuel jusqu’à son utilisation
•Ne pas exposer à la lumière du soleil et
jeter toute plaque décolorée
•Ne pas toucher à la surface de la plaque
Les plaques vendues séparément de la Trousse
MQM et non scellées, doivent être congelées.
CC
AC CC
1.
3.
2.
4. 5.
6. 7.

Outil rapide d’identification à la ferme des bactéries causant la mammite
Système décisionnel pour le traitement de la mammite
MISE EN GARDE
•Le système de culture à la ferme doit être utilisé pour des cas légers ou modérés de
mammite (grade 1 ou 2) sans présence de fièvre (< 39,5 °C) ou de maladies graves.
•Il est essentiel d’élaborer un protocole d’échantillonnage et un protocole de traitement
associés à l’utilisation de ce système avec votre médecin vétérinaire.
•Si les symptômes cliniques s’aggravent, prenez des mesures immédiatement et consultez
votre médecin vétérinaire.
Matériel nécessaire
Inclus dans la Trousse du Maritime Quality Milk (MQM) :
•Plaques PetrifilmMC pour numération des coliformes
(GRAM –) cercle rouge avec styromousse portant le code CC
• Plaques PetrifilmMC pour numération des bactéries aérobies
(GRAM +) blanches sans styromousse portant le code AC
• Étaleur (surface striée et surface lisse)
• Seringues de 3 ml
•Flacons stériles d’échantillonnage
• Flacons de diluant (eau physiologique 0,9 % NaCl ou
tampon phosphate)
•Tampons de gaze imbibés d’alcool
Non inclus dans la Trousse MQM :
• Incubateur*
• Gants de nitrile
• Plaques PetrifilmMC Staph Express (staphylocoques) :
cercle blanc avec styromousse portant le code STX
et disque mauve Staph Express
(optionnel pour la détection de Staph. aureus)
• Étaleur pour Staph Express (rond et plat)
À la ferme, à la maison ou à la clinique vétérinaire, installez le
« laboratoire » dans un endroit propre et sec pour éviter la contamination.
* L’incubateur recommandé est le Turbofan Hova-Bator modèle 1602, disponible auprès de
votre magasin local de fournitures agricoles ou consultez internet pour connaître le point
de vente le plus près.
Sources et crédits photos :
Maritime Quality Milk (MQM), Charlottetown, IPE
3M Canada
Le système décisionnel pour le traitement de la
mammite de MQM utilise les plaques de
numération PetrifilmMCconçues par 3MMC pour
identifier les bactéries causant la mammite
dans le lait. Pour commander la Trousse de
MQM, contactez votre médecin vétérinaire ou :
Maritime Quality Milk
550, avenue University
Charlottetown, Île-du-Prince-Édouard
Canada C1A 4P3
Tél. : [phone] / Téléc. : 902-620-5053
Courriel : [email protected]
www.milkquality.ca
Pour commander directement les produits
PetrifilmMCou pour consulter un représentant,
veuillez contacter :
3M Canada
Tél.: [phone]
1
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Inoculation des plaques PetrifilmMCAC et CC
Matériel
Préparez tout le matériel
nécessaire avant de débuter.
Dilution du lait
Ouvrez le flacon contenant 45 ml d’eau et ajoutez environ 5 ml de lait infecté
afin d’atteindre la ligne de 50 ml. Fermez les deux flacons. Identifiez bien le
flacon contenant le lait infecté non utilisé et congelez-le pour l’envoi au
laboratoire, si nécessaire.
Étalement du lait sur la
plaque AC (blanche)
Déposez délicatement le côté
strié de l’étaleur (WHITE doit être
vers vous si vous utilisez celui de
la trousse MQM) sur la pellicule et
pressez légèrement pour répartir
le lait.
Inoculation des plaques
Soulevez la pellicule et déposez 1 ml de
lait dilué directement au centre de chaque
plaque sans la toucher avec la seringue.
Pour la plaque CC, déroulez lentement la
pellicule sur le lait.
Pour la plaque AC, laissez tomber la pel-
licule d’un coup sans la dérouler. Pour
toutes les plaques : ne touchez pas à la
surface de la plaque.
Préparation du mélange
Effectuez doucement une rotation du
flacon pour diluer le lait dans l’eau.
Mesure du lait dilué
Prélevez environ 2 ml de lait
dilué avec la seringue.
Échantillonnage du lait
•La qualité de l’échantillon de lait prélevé est primordiale pour
obtenir de bons résultats. Utilisez un flacon d’échantillonnage
propre.
•La technique de prélèvement doit être stérile afin d’éviter la
contamination de l’échantillon et une interprétation erronée.
•Pour vous aider, consultez la fiche pratique illustrée Technique
d’échantillonnage du lait pour analyse bactériologique ou la vidéo
L’ABC de l’échantillonnage du lait pour l’analyse bactériologique
produites par le RCRMB. www.reseaumammite.org
Entreposage et manutention des
plaques de la Trousse MQM
•La durée de conservation est de 1 an
à la température ambiante
•Éviter la salle de traite et la laiterie
(humidité élevée)
•Conserver la plaque dans son emballage
individuel jusqu’à son utilisation
•Ne pas exposer à la lumière du soleil et
jeter toute plaque décolorée
•Ne pas toucher à la surface de la plaque
Les plaques vendues séparément de la Trousse
MQM et non scellées, doivent être congelées.
CC
AC CC
1.
3.
2.
4. 5.
6. 7.

Outil rapide d’identification à la ferme
des bactéries causant la mammite
Système décisionnel pour le traitement de la mammite
www.reseaumammite.org
Pourquoi utiliser cet outil?
La mammite est la cause première de l’utilisation des antibiotiques sur les fermes
laitières. Différents types de bactéries peuvent infecter le pis. Certaines d’entre
elles ont des taux élevés d’autoguérison ou répondent mal aux traitements. Il est
important de bien les identifier pour aider le producteur et son médecin vétérinaire
à cibler le traitement à administrer, s’il y a lieu, sans toutefois nuire ou
retarder la guérison.
Les bactéries Gram + et Gram –
Une technique de coloration en laboratoire permet de classifier la plupart des
bactéries en deux catégories :
Bactéries Gram positif
• Principalement des staphylocoques
et des streptocoques
• Paroi cellulaire mince
Exemples de bactéries Gram + et Gram -
Gram positif Gram négatif
Staphylococcus aureus Escherichia coli
Staphylococcus spp. Klebsiella spp.
Streptococcus uberis Enterobacter spp.
Streptococcus dysgalactiae Serratia spp.
Streptococcus agalactiae Pasteurella spp.
Corynebacterium bovis
Bactéries Gram négatif
• Principalement des coliformes
• Paroi cellulaire très épaisse qui
protège des effets de la plupart des
antibiotiques, détergents et
produits chimiques
• Contiennent des
lipopolysaccharides toxiques
• Ne répondent pas bien aux
traitements antibiotiques
Comment ça fonctionne?
L’identification de la bactérie est faite par
la culture de lait infecté sur une plaque
contenant des nutriments qui favorisent
la croissance des bactéries. Une période
d’incubation d’environ 24 heures est
nécessaire pour que la plaque révèle
la présence de colonies de bactéries.
Plusieurs types de plaques, avec des
nutriments spécifiques, peuvent être
utilisés pour identifier les bactéries
présentes dans le lait. La catégorie
de bactéries est déterminée selon la
croissance et le nombre de colonies
sur les plaques spécifiques.
Avantages
•Permet de mieux cibler les cas causés par des bactéries Gram + (donc à traiter)
•Identification plus rapide des bactéries que la culture bactériologique en
laboratoire (sans pour autant la remplacer)
•Usage plus rationnel des antibiotiques
•Réduction des pertes de lait
•Diminution des risques de résidus d’antibiotiques dans le lait
Limites
•Minutie requise pour réaliser la technique en évitant la contamination
•Interprétation influencée par l’expérience et la formation de l’usager
•Identification impossible des mycoplasmes et des levures
(dont le traitement n’est pas recommandé)
Ce document peut être reproduit en version intégrale seulement, à des fins éducationnelles, sans autre permission, si les crédits sont accordés au RCRMB.
Étalement du lait sur
la plaque CC (rouge)
Déposez délicatement le côté plat de
l’étaleur (RED doit être vers vous si
vous utilisez celui de MQM) sur la
pellicule et presser légèrement pour
répartir le lait.
Dépôt des plaques
dans l’incubateur
Déposez délicatement les plaques
dans l’incubateur préchauffé à la
bonne température (35 °C).
Assurez-vous qu’il contienne un
peu d’eau pour maintenir une
légère humidité.
Période d’incubation pour les plaques AC et CC
La période d’incubation requise est :
•24 heures pour la plaque de •24 heures pour la plaque
numération des bactéries de numération des
aérobies - AC coliformes - CC
Interprétation des résultats
• L’interprétation des résultats peut nécessiter l’assistance
d’un médecin vétérinaire pour confirmer le diagnostic.
•Établissez également avec lui un protocole de traitement
approprié selon les résultats obtenus.
• La catégorisation en Gram positif, Gram négatif et
Aucune croissance peut être réalisée grâce aux plaques
AC et CC. Un guide d’interprétation est disponible sur
www.milkquality.ca
• Pour les cultures Staph Express (STX) positives et confirmées
par le disque mauve, traitez ces cas selon les directives de
votre médecin vétérinaire.
Inoculation de la plaque
PetrifilmMCSTX
1. Inoculation
Soulevez la pellicule et déposez 1 ml de lait dilué,
perpendiculairement et directement au centre
de la plaque, sans la toucher avec la seringue.
Déroulez lentement la pellicule sur le lait.
2. Étalement du lait
Déposez délicatement l’étaleur rond et plat sur la
pellicule et pressez légèrement pour répartir le lait.
3. Période d’incubation
Incubez la plaque STX à 35 °C pendant 24 heures.
4. Insertion du disque mauve
Insérez le disque mauve entre la pellicule et la plaque.
Suite à l’insertion du disque, incubez 3 heures de plus
à 35 °C.
Procédez à l’interprétation.
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