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Chapitre 4 : La chromatographie et l'électrophorèse.
Gillet Steve, D.Sc. -111-
Rapport frontal
On appelle rapport frontal, RF (ou « référence front », « coefficient de migration »), le
rapport Distance parcourue par le soluté / Distance parcourue par le solvant. Le
schéma de la figure 5.2 montre comment calculer le RF dans le cas d’une chromatographie
liquide ascendante.
Un soluté très soluble dans la phase fixe aura un RF faible, alors qu’un soluté
très soluble dans la phase mobile aura un RF élevé et proche de 1.
Chromatographie bidimensionnelle
Dans le cas où le mélange contient des solutés de mobilités voisines, on peut
augmenter le pouvoir séparateur en réalisant une chromatographie bidimensionnelle : sur
le même support, on réalise une première chromatographie à l’aide d’un système de
solvants, puis une deuxième à l’aide d’un second système de solvants, dans une direction
perpendiculaire à la première (figure 5.3).
Solvants
Les deux solvants sont caractérisés par leur différence de polarité et leur non
miscibilité. Généralement, le solvant fixe est polaire et très souvent, ce sera l’eau. Le
solvant mobile sera quant à lui non polaire et constitué d’un mélange choisi selon les
nécessités de la séparation.
Figure 5.2. : Schéma montrant comment
déterminer le rapport frontal d’une
substance : On mesure la distance x parcourue
par la substance à partir de la ligne de dépôt.
On mesure également la distance y parcourue
par le solvant à partir de la ligne de dépôt,
jusqu’au front de solvant. Le rapport x / y
toujours inférieur à 1 représente le rapport
frontal de la substance (RF).
Figure 5.3. : Chromatographie
liquide-liquide bidimensionnelle :
Comme indiqué en (a), on commence
par réaliser la chromatographie de
façon classique avec un certain
système de solvants. Nous aurons
donc une première séparation. La
plaque est ensuite tournée à 90° et
une nouvelle élution est réalisée avec
un autre système de solvants (b).