Stage proposé par Céline GUIGON Equipe Physiologie de l’Axe Gonadotrope - Inserm U1133 Unité de Biologie Fonctionnelle et Adaptative Université Paris Diderot. Bâtiment Buffon Téléphone : 01 57 27 84 04 Mail : [email protected] Directeur du Laboratoire : Pr Joëlle Cohen-Tannoudji Titre : Signalisation du récepteur AhR dans l’ovaire Projet de stage : situation du sujet, objectif du stage, approches expérimentales Nous travaillons sur le rôle du récepteur nucléaire Aryl hydrocarbon (AhR) dans la fonction ovarienne, un récepteur bien connu pour relayer l’action de polluants environnementaux comme la dioxine. Le rôle physiologique d’AhR dans l’ovaire est bien moins connu. L’étude de souris invalidées dans le gène codant AhR a montré son implication dans la fertilité, notamment par la régulation de la production d’œstradiol. On ignore encore si ce récepteur peut également jouer un rôle dans l’ovaire avant la puberté, une période cruciale pour l’établissement des fonctions de reproduction. Dans le cadre de ce stage, nous nous intéresserons à la signalisation AhR dans la période prépubère, en mettant en œuvre des études in et ex vivo sur l’ovaire murin. Nous analyserons l’expression d’AhR à plusieurs stades clés de cette période dans l’ovaire. Nous comparerons l’ontogenèse de facteurs clés de la folliculogenèse chez des souris Ahr+/+ et Ahr-/-. Enfin, nous étudierons l’impact potentiellement délétère pour le développement ovarien d’un traitement par des agonistes AhR. Techniques mises en œuvre par le stagiaire : - Extraction d’ARN et de protéines sur organes - RT-PCR quantitative - Western blot - Hybridation in situ - Culture organotypique - Immunofluorescence sur coupes de tissus Publications du responsable de stage au cours des 5 dernières années : François CM, Wargnier R, Petit F, Goulvent T, Rimock R, Treilleux I, Ray-Coquard I, Zazzu V, CohenTannoudji J, Guigon CJ. 17β-estradiol inhibits spreading of metastatic cells from granulosa cell tumors through a non-genomic mechanism involving GPER1. soumis. Vandormael-Pournin S, Guigon CJ, Ishaq M, Coudouel N, Avé P, Huerre M, Magre S, Cohen-Tannoudji J, Cohen-Tannoudji M. Oocyte-specific inactivation of Omcg1 leads to DNA damage and c-Abl/TAp63-dependent oocyte death associated with dramatic remodeling of ovarian somatic cells. Cell Death Differ. 2014, sous presse. Kim WG, Guigon CJ, Fozzatti L, Park JW, Lu C, Willingham MC, Cheng SY. SKI-606, an Src inhibitor, reduces tumor growth, invasion, and distant metastasis in a mouse model of thyroid cancer. Clin Cancer Res. 2012, 18(5):1281-90. 1 Guigon CJ, Cohen-Tannoudji M. Reconsidering the roles of female germ cells in ovarian development and folliculogenesis. Biol Aujourdhui. 2011, 205(4):223-33. Guigon CJ, Kim DW, Willingham MC, Cheng SY. Mutation of thyroid hormone receptor-β in mice predisposes to the development of mammary tumors. Oncogene. 2011, 28;30(30):3381-90. Guigon CJ, Kim DW, Zhu X, Zhao L, Cheng SY. Tumor suppressor action of liganded thyroid hormone receptor beta by direct repression of beta-catenin gene expression. Endocrinology. 2010, 151(11):5528-36. Huang Y, Guigon CJ, Fan J, Cheng SY, Zhu GZ. Pituitary homeobox 2 (PITX2) promotes thyroid carcinogenesis by activation of cyclin D2. Cell Cycle. 2010 1;9(7):1333-41. Guigon CJ, Fozzatti L, Lu C, Willingham MC, Cheng SY. Inhibition of mTORC1 signaling reduces tumor growth but does not prevent cancer progression in a mouse model of thyroid cancer. Carcinogenesis. 2010 Jul;31(7):1284-91. 2