2-Pakdel-fiche_resume-2017

Profil N° (à remplir par VAS)
FINANCEMENT Demandé ARED/Ligue
Acquis
Fiche Résumé du sujet de thèse 2017
Champs disciplinaire Biologie fondamentale et Santé
Titre de la thèse : (1-2 lignes)
Glycéollins comme adjuvant thérapeutique : Implication dans le métabolisme des œstrogènes.
3 mots-clés : (1 ligne)
ACRONYME
Glycéollins / récepteur des œstrogènes / cancer du sein
GADTIME
Unité/équipe encadrante :
IRSET, U1085 Inserm/Equipe TREC (Transcription, Environnement et Cancer)
Nom du responsable scientifique
Farzad PAKDEL
nom du codirecteur le cas échéant :
Contact :
[email protected]
Contexte socioéconomique et scientifique : (10 lignes)
Les glycéollins appartiennent à la famille des phytoalexines qui participent à la défense des végétaux. Les glycéollins
sont décrits pour avoir un effet thérapeutique potentiel pour la santé humaine et notamment le cancer du sein. Le
Laboratoire Nutrinov a développé avec la SATT Grand Est Welience une approche innovante de production de ces
molécules naturelles (projet FUI mVolio). Les compétences reconnues de l’équipe Transcription, Environnement et
Cancer de l’Irset dans le rôle du récepteur des œstrogènes (ER) dans l’évolution du cancer du sein nous a permis
d’intégrer le volet santé humaine de ce projet. Le cancer du sein est le cancer le plus courant chez la femme avec
environ 48000 nouveaux cas par an en France pour environ 12000 décès (Inca). A ce titre, il demeure un problème
majeur de santé publique. Bien que certaines chimiothérapies aient prouvé leur efficacité dans le traitement de ce
cancer, les rechutes sont nombreuses avec des cancers souvent plus agressifs. Le développement de nouveaux
composés ayant une action préventive ou ayant le rôle d’adjuvant thérapeutique pour réduire les effets secondaires
et augmenter l’efficacité thérapeutique des principales chimiothérapies est donc indispensable.
Les hypothèses et questions posées (8 lignes)
Nous avons réalisé une analyse de transcriptomique sur une lignée cellulaire humaine de cancer mammaire qui a
montré que les glycéollins étaient capables d’agir sur l’expression d’enzymes intervenant dans les processus de
détoxication et du métabolisme des stéroïdes. En revanche, la manière dont ils régulent ces gènes et la
conséquence que cela peut avoir sur le métabolisme d’autres molécules (hormones naturelles, agents anticancéreux, xénobiotiques) restent inconnus. La régulation des enzymes de phase I (cytochrome P450) est liée au
facteur de transcription AhR. Ce facteur de transcription est capable d’interagir avec ER et de moduler son activité.
Notre hypothèse est que les glycéollins pourraient interagir directement avec ER et AhR. Il est donc nécessaire de
comprendre comment ces composés peuvent influer sur la boucle de contrôle reliant ER et AhR et les conséquences
que cela peut avoir sur l’activité de ces deux facteurs de transcription.
Les grandes étapes de la thèse et démarche (10-12 lignes)
Des approches in vitro sur cellules en culture et des approches in vivo chez la souris seront combinées :
-Déterminer l’activité des glycéollins sur le métabolisme et la prolifération sur différents modèles cellulaires de
cancer du sein (MCF-7 ou T47D) et de foie (HepG2 ou HepaRG). Nous utiliserons des siRNA dirigés contre ER ou
AhR ou des antagonistes pharmacologiques spécifiques de ces facteurs pour déterminer leur implication et préciser
si AhR est impliqué au même titre que ER dans les effets antiprolifératifs des glycéollins?
-Immunoprécipitation de la chromatine (ChIP-reChIP, ChIP-seq, etc.) avec des anticorps spécifiques dirigés contre
ER et AhR pour déterminer leur interrelation au niveau de la chromatine. De plus l’étude des marques épigénétiques permettra de révéler les actions potentielles des glycéollins sur la programmation épigénétique de gènes
cibles précédemment identifiés lors de notre analyse transcriptomique.
-Utilisation de souris KO pour ER ou AhR pour confirmer in vivo les mécanismes moléculaires identifiés sur les
cellules en culture.
-Utilisation de souris « nude » implantées avec des cellules cancéreuses et traitées avec des glycéollins pour
déterminer l’effet de ces composés sur la progression tumorale.
-Résection des tumeurs et récupération d’échantillons pour déterminer l’impact du traitement sur la stabilité d’ERα,
le métabolisme de l’E2 qui utilise les mêmes enzymes et le métabolisme des molécules classiquement utilisées en
chimiothérapie (tamoxifène, inhibiteur de l’aromatase, etc.)
Approches méthodologiques et techniques envisagées (4-6 lignes)
Cette étude utilisera des approches cellulaires incluant des cultures de lignées cancéreuses humaines,
l’établissement des clones cellulaires, l’inactivation génique, FACS et microscopie photonique ainsi que des
approches in vivo (modèles murins). Ce projet met aussi en jeu des techniques de biologie moléculaire
(Transciptomique, Chromatine ImmunoPrécipitation, Co-IP, PCR en temps réel, Western blot, Immunofluorescence)
Compétences scientifiques et techniques requises par le candidat (2 lignes)
Compétences en biologie moléculaire et cellulaire et des connaissances fondamentales des voies de signalisation, de
la régulation transcriptionnelle et épigénétique, de la prolifération-différenciation cellulaire et de la cancerogenèse
moléculaire.