Stage proposé par
Nom et adresse du Laboratoire ou de l’Unité : IBPS-UMR7622
Téléphone :
Mail :
Site internet : http://www.ibps.upmc.fr/fr/Recherche/umr-biologie-developpement
Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Sylvie Schneider-Maunoury
Intitulé de l ‘équipe d’accueil : Mammalian Oocyte Meiosis
Prénom et NOM du Responsable de l’équipe : Katja Wassmann
Résumé du thème de recherche de l’équipe (une dizaine de lignes maximum) :
L’ovocyte est formé au cours de la méiose grâce à la succession de deux divisions, la méiose I et la
méiose II. La méiose I conduit à la séparation des chromosomes homologues tandis que la méiose II
conduit à la séparation des chromatides sœurs. Ainsi, la méiose permet de former un ovocyte
haploïde, qui une fois fécondé par le spermatozoïde, permettra la formation d’un embryon diploïde. Si
au terme de ces deux divisions, l’ovocyte reçoit un nombre incorrect de chromosomes, il formera,
après fécondation, un embryon aneuploïde. Ainsi, dans l’espèce humaine, les erreurs de ségrégation
en méiose peuvent conduire à des fausses couches ou à des trisomies telles que la trisomie 21.Dans
le laboratoire de K. Wassmann, nous nous intéressons à différents aspects qui régulent la méiose
pour empêcher les erreurs de ségrégation.
Titre du projet de stage : La fonction du SAC (Spindle Assembly Checkpoint) au cours de la
2e division de méiose dans l’ovocyte de souris
Prénom, NOM, téléphone et adresse e-mail du Responsable du stage:
Eulalie BUFFIN
01 44 27 25 75
eulalie.buffin@upmc.fr
Projet de stage : (une vingtaine de lignes maximum)
Le SAC (Spindle Assembly Checkpoint) est un mécanisme de surveillance qui empêche l’anaphase
tant que tous les chromosomes ne sont pas correctement attachés et alignés sur le fuseau. En effet, si
un chromosome n’est pas correctement attaché au moment de l’anaphase, il risque de ségréger de
façon aléatoire et conduire à un ovocyte aneuploïde. Ainsi, le SAC permet de laisser le temps aux
chromosomes d’établir des attachements corrects avec les microtubules du fuseau afin d’éviter les
erreurs de ségrégation.
Ce projet de stage vise à analyser la fonction du SAC au cours de la méiose II dans l’ovocyte
de souris. En effet, après la première division, les ovocytes sont maintenus arrêtés en métaphase II
grâce à l’activité CSF. Par conséquent, les chromosomes ont tout le temps pour établir des
attachements corrects avec le fuseau. On peut donc se demander si le SAC est requis en méiose II
pour retarder l’anaphase II. Ce projet consiste à perturber l’attachement des chromosomes avec des
agents pharmacologiques tels que le nocodazole ou le taxol qui ont un effet sur la stabilité des
microtubules. L’activité du SAC et la ségrégation des chromosomes en méiose II seront analysés
dans différents contextes mutants disponibles au laboratoire. Des techniques couramment utilisées au
laboratoire seront réalisés, telles que des étalement chromosomiques, des immunofluorescences et le
suivi par vidéomicroscopie de protéines de fusion fluorescentes.
Techniques mises en œuvre par le stagiaire :
Etalements chromosomiques, Immunofluorescences, Imagerie (videomicroscopie, spinning disc)