Stage proposé par Gilles Charpigny et Fabienne Nuttinck Chargé de recherche INRA et Ingénieur de recherche EnvA Nom et adresse du Laboratoire ou de l’Unité : UMR 1198 Biologie du Développement et Reproduction INRA, 78352 Jouy en Josas Cedex. Téléphone : secrétariat : 01 34 65 23 63 Mail : secrétariat : corinne [email protected] Site internet : https://intranet.jouy.inra.fr/bdr/L-unite Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Corinne Cotinot Intitulé de l ‘équipe d’accueil : EPEE : Embryon et Pluripotence , Epigénétique et environnement Prénom et NOM du Responsable de l’équipe : Véronique Duranthon Résumé du thème de recherche de l’équipe (une dizaine de lignes maximum) Les premiers stades de l’embryogénèse sont caractérisés par une grande dépendance vis-à-vis des facteurs ovocytaires stockés pendant l’ovogénèse et par des remaniements épigénétiques intenses, faisant de l’embryon un sujet particulièrement sensible aux modifications de l’environnement périconceptionel. Nos travaux visent à caractériser les altérations moléculaires précoces induites par ces modifications de l’environnement ovocytaire et embryonnaire susceptibles d’affecter le phénotype (et la santé) de l’individu Titre du projet de stage : Etude de l’influence de la prostaglandine E2 péri-conceptionnelle sur le développement de l’embryon bovin Prénom, NOM, téléphone et adresse e-mail du Responsable du stage: Gilles Charpigny : 01 34 65 23 45 [email protected] Fabienne Nuttinck : 01 34 65 20 08 [email protected] Projet de stage : (une vingtaine de lignes maximum) La prostaglandine E2 est produite naturellement par les cellules de cumulus au cours de la maturation ovocytaire. Nous disposons d’un modèle de production in vitro d’embryons bovins qui nous permet de moduler le niveau de PGE2 présent dans le microenvironnement de l’ovocyte durant la maturation et la fécondation in vitro (MIV/FIV). Les embryons obtenus dans les différentes conditions MIV/FIV de notre modèle ont été analysés soit au 8ème jour de leur développement in vitro soit après transfert dans des vaches receveuses et collecte au 15 ème jour de développement. Nos résultats montrent que la PGE2 affecte durablement le développement de l’embryon bovin au niveau de ses deux compartiments, embryonnaire et extra-embryonnaire. Le laboratoire dispose des résultats d’analyse transcriptomique du tissu extra-embryonnaire des conceptus J15 issus des différents environnements périconceptionnels en PGE2. L’étudiant aura en charge l’analyse des données de RNAseq: (i) analyse bibliographique des gènes différentiellement exprimés et identification des voies impliquées ; (ii) localisation de transcrits d’intérêt par immuno-fluorescence, microscopie et quantification par analyse d’image. Techniques mises en œuvre par le stagiaire : Immunohistochimie, microscopie (apotome), utilisation du logiciel Image J, western blot Analyses des données de transcriptomique et recherches bibliographiques Publications des Responsables de stage au cours des 5 dernières années : Nuttinck F, Jouneau A, Charpigny G, Hue I, Richard C, Adenot P, Ruffini S, Laffont L, Chebrout M, Duranthon V, Guienne BM. Prosurvival effect of cumulus prostaglandin G/H synthase 2/prostaglandin2 signaling on bovine blastocyst:impact on in vivo posthatching development†. Biol Reprod. 2017 Mar 1;96(3):531-541. Sandra O, Charpigny G, Galio L, Hue I. Preattachment Embryos of Domestic Animals: Insights into Development and Paracrine Secretions. Annu Rev Anim Biosci. 2017 Feb 8;5:205-228. Sandra O, Constant F, Vitorino Carvalho A, Eozénou C, Valour D, Mauffré V, Hue I, Charpigny G. Maternal organism and embryo biosensoring: insights from ruminants. J Reprod Immunol. 2015 Apr;108:105-13. Brisard D, Desmarchais A, Touzé JL, Lardic L, Freret S, Elis S, Nuttinck F, Camous S, Dupont J, Uzbekova S. Alteration of energy metabolism gene expression in cumulus cells affects oocyte maturation via MOS-mitogen-activated protein kinase pathway in dairy cows with an unfavorable "Fertil-" haplotype of one female fertility quantitative trait locus. Theriogenology. 2014 Mar 1;81(4):599-612. Touzard E, Reinaud P, Dubois O, Guyader-Joly C, Humblot P, Ponsart C, Charpigny G. Specific expression patterns and cell distribution of ancient and modern PAG in bovine placenta during pregnancy. Reproduction. 2013 Aug 21;146(4):347-62. Autres informations: Etudiants actuellement en thèse ou en M2 dans l’équipe d’accueil. Pour chaque étudiant indiquez le nom du responsable de thèse, l’année du début de la thèse et l’Ecole Doctorale de rattachement Mélany Gilbert (Alice Jouneau HDR- Fabienne Nuttinck) 2017-GCD Etudiants ayant préparé ou soutenu leur thèse ou leur M2 dans l’équipe d’accueil au cours des six dernières années. Pour chaque étudiant indiquez le nom du responsable de l’étudiant, l’année du début de la thèse et de fin de la thèse, l’Ecole Doctorale de rattachement et le devenir de l’étudiant. -Anne-Clémence Vaillard ED GGC. Soutenance décembre 2013. Actuellement en CDI chez Diagenode (Belgique) -Marie Cournut M2 Génétique, Biologie Cellulaire et Développement Paris XI Orsay en 2013 - en thèse à l'université de Laval (Quebec) -Saifdine Olcaid M2 Génétique, Génomes et Evolution Paris XI Orsay en 2015 - A changé totalement d'orientation -Delphine Dubé (Véronique Duranthon, HDR), soutenance 2016 ED BioSigne -Matteo Tosolini (Alice Jouneau HDR- Amélie Bonnet Garnier) soutenance 2016 - ED SDSV. Actuellement en CDI chez Diagenode (Belgique) Cette proposition de stage s’adresse-t-elle spécifiquement à un étudiant scientifique, médecin ou vétérinaire ou bien est-il ouvert à tous les profils ? ouvert à tous les profils Ce sujet peut-il donner lieu à une thèse ? non