Télécharger

Stage proposé par Véronique Duranthon
CR1 INRA
Biologie du Développement et de la Reproduction UMR INRA/ENVA 1198, Biologie du
Développement et Reproduction, Domaine de Vilvert, 78352 Jouy en Josas cedex
Téléphone : 01 34 65 25 92
Mail : [email protected]
Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Jean Paul Renard
Intitulé de l ‘équipe d’accueil : Plasticité du Génome
Prénom et NOM du Responsable de l’équipe : Renard Jean Paul/ Duranthon Véronique
Résumé du thème de recherche de l’équipe
Notre travail de recherches a pour objectif l'étude des mécanismes fondamentaux du
développement précoce de l'embryon de mammifères : la reprogrammation nucléaire, la
totipotence et la différenciation cellulaires, et l’influence de perturbations du microenvironnement de l’embryon préimplantatoire sur son développement ultérieur. Ces questions
fondamentales ont des retombées évidentes tant sur le plan médical que sur celui de l’application des
biotechnologies de la reproduction
Deux modèles sont utilisés pour mener à bien ce travail : le lapin et le bovin. La pertinence de ces
modèles repose sur la cinétique de développement et d’activation transcriptionnelle du génome
embryonnaire. Très étroitement régulée, au cours de plusieurs cycles de divisions cellulaires,
l’activation transcriptionnelle du génome chez ces espèces est plus représentative de celle qui prévaut
pour la plupart des mammifères - et notamment de l’homme- que de la situation rencontrée chez la
souris. Cette cinétique nous semble particulièrement intéressante pour poser la question fondamentale
des interactions entre information maternelle stockée dans l’ovocyte et information embryonnaire
synthétisée à partir du génome nouvellement constitué, et de leur rôle dans la mise en place d’un
programme de développement harmonieux
Titre du projet de stage : Altération de l’expression du gène MAT2A par les conditions de
culture in vitro de l’embryon de mammifères: analyse des conséquences fonctionnelles.
Responsable du stage : Véronique Duranthon
(Tél : 01 34 65 25 92 - mail : [email protected])
Projet de stage :
Les conditions d'environnement amènent des modifications épigénétiques du génome
embryonnaire, dont les répercussions pourraient remettre en cause l'innocuité des procédures d'AMP
chez l'homme. En particulier, les modifications du métabolisme de la méthionine pourraient altérer
l’épigénome et induire des phénotypes tardifs. Chez l’embryon de lapin choisi comme modèle (ses
besoins métaboliques et ses cinétiques d'activation et de méthylation du génome sont proches de
ceux de l'homme) certaines conditions de culture altèrent le niveau d'expression du gène MAT II A.
Parce que cette enzyme est responsable de la synthèse de S adénosyl methionine, principal
pourvoyeur de groupements méthyl pour les réactions de méthylation de l'ADN et des histones, nous
en accentuerons la sous-expression par ARN interference pour étudier les conséquences
fonctionnelles de l'altération de son expression sur le niveau général de méthylation du génome et sur
le transcriptome de l'embryon.
Techniques mises en œuvre par le stagiaire :
Real time quantitative RT-PCR.
Immunoflurescence sur embryons de mammifères.
Transcriptomique
RNA interference
Publications du Responsable de stage au cours des 5 dernières années :
Bui, L-C, Leandri, R, Renard, J.P. and Duranthon, V., 2005. SSH adequacy to preimplantation
mammalian development: Scarce specific transcripts cloning despite irregular normalisation BMC
Genomics 6: 155-162.
*Bui, L-C Faure, C., Vignon, X., Renard, J-P. and Duranthon, V., 2005. Analysis of early embryonic
transcription in the bovine embryo using a dedicated cDNA library. Reprod. Fertil. Dev. 17: 202.
Duranthon, V. and Renard, J-P., 2003. Storage and functional recovery of molecules in oocytes. In
Trounson, A. and Gosden, R. (eds.), Biology and Pathology of the oocyte: its role in Fertility and
Reproductive Medicine, Cambridge University Press, pp. 81-112.
Miller, D-J., Eckert, J-J., Lazzari, G., Duranthon-Richoux, V., Sreenan, J., Morris, D., Galli, C., Renard
J-P. and Fleming, T-P., 2003. Tight junction messenger RNA expression levels in bovine embryos are
dependent upon the ability to compact and in vitro culture methods. Biol. Reprod. 68: 1 394-1 402.
Pacheco-Trigon, S., Hennequet-Antier, C., Oudin, J-F, Piumi, F., Renard, J-P. and Duranthon, V.,
2002. Molecular Characterization of Genomic Activities at the Onset of Zygotic Transcription in
Mammals. Biol. Reprod. 67: 1 907-1 918.
Autres informations
Etudiants actuellement en thèse ou en M2 dans l’équipe d’accueil. Pour chaque étudiant indiquez
le nom du responsable de thèse, l’année du début de la thèse et l’Ecole Doctorale de rattachement
Daulat Raheem Khan M2 responsable Véronique Duranthon
Etudiants ayant préparé ou soutenu leur thèse, leur DEA ou leur M2 dans l’équipe d’accueil au
cours des cinq dernières années. Pour chaque étudiant indiquez le nom du responsable de
l’étudiant, l’année du début de la thèse et de fin de la thèse, l’Ecole Doctorale de rattachement et le
devenir de l’étudiant.
- BUI Linh Chi thèse débutée en octobre 2002 soutenance septembre 2006
actuellement en Post
doc
- Léandri Roger (médecin) octobre 2002. Soutenance prévue en octobre 2007
Cette proposition de stage s’adresse-t-elle spécifiquement à un étudiant scientifique, médecin
ou vétérinaire ou bien est-il ouvert à tous les profils ?
Etudiant médecin.
Ce sujet peut-il donner lieu à une thèse ?
A analyser en fonction des résultats obtenus au cours du M2.