PHYSIOLOGIE DE LA REPRODUCTION: Rongeurs et lagomorphes Chrystophe Ferreira Plateforme commune ANIMA 5 Développement et coordination des animaleries Université Paris Descartes ASPECTS ‘‘ PSYCHOLOGIQUES’’ Implication de processus cognitifs dans le comportement de reproduction des rongeurs, les influences hormonales et phéromonales ne sont pas suffisantes (monte…) Différents types de processus neurobiologiques semblent impliqués: •Développement de la sensibilité génitale par le léchage maternel •Familiarisation à certaines odeurs (maternelles) •Représentation du « schéma corporel » par des contacts tactiles variés lors des jeux avec les partenaires pendant la période juvénile •Mémorisation contextuelle centrée sur le comportement en cours ou les caractéristiques d’environnement APPAREIL GENITAL MALE Maturation constante des gamétocytes: Cœxistence de différents stades Durée moyenne de la spermatogenèse: •5 semaine chez la souris •7 semaines chez le rat APPAREIL GENITAL MALE Voies spermatiques + glandes annexes dont: •Glandes coagulantes (prostate antérieure) chez le rat et la souris → bouchon vaginal •Glandes préputiales (ou inguinales chez le lapin) APPAREIL GENITAL FEMELLE Ovaire + Tractus génital = •Oviducte (infundibulum) •Utérus (corne + corps) •Vagin (vestibule / vulve) Utérus bifide duplex ou bipartite Glandes préputiales (et périnéales chez le lapin) → sécrétions odorantes attractives pour les males APPAREIL GENITAL FEMELLE Ratte et souris: ovaires complètement enfermés dans la bourse ovarique → pas de gestations extra utérines → problème pour la réimplantation des embryons par les voies naturelles graisse ovaire oviducte utérus OVAIRE ET FOLLICULES • les ovocytes ( 85 µm, prophase méïose 1) sont dans les follicules de De Graff → maturation → cellules et fluide folliculaire OVOCYTES • Les ovocytes fécondés sont initialement entourés de cellules folliculaires → Cumulus • Tous les ovocytes libérés ne conduisent pas à une gestation CYCLE OESTRAL Activité cyclique de l’ovaire sous contrôle hormonal, variable selon les espèces type durée des cycles (j) durée de l’oestrus Mécanisme d’ovulation souris Polyoestrus 4-5 9-20 h spontanée Ratte Polyoestrus 4-5 12-14 h spontanée hamster Polyoestrus 4 4-23 h spontanée cobaye Polyoestrus 16-19 6-15 h spontanée gerbille Polyoestrus 4-6 12-18 h spontanée lapine Polyoestrus 15-16 13 j provoquée CYCLE OESTRAL Exocrine: maturation et émission cyclique du gamète Ovaire à double fonction Endocrine: imprégnation hormonale de l’appareil reproducteur nécessaire à la fécondation et à l’implantation Fonctions contrôlées par les gonadotropines hypophysaires: FSH (hormone folliculo-stimulante) et LH (hormone lutéinisante) dont les taux circulants régulent la stéroidogenese ovarienne (progestérone et oestrogene). Les stéroïdes ovariens, en interaction avec différents peptides, sont à l’origine des phases du cycle grâce au rétrocontrôle qu’elles assurent a différents niveaux de l’axe hypothalamo-hypophyso-ovarien. CYCLE OESTRAL Pro oestrus (1J) Maturation folliculaire sous contrôle FSH Synthèse d’oestrogenes (Metestrus) Synthèse de progestérone par le corps jaune → maturation de L’endomètre Oestrus (1-2J) Ovulation sous contrôle LH Diestrus (1-2J) Phase lutéale CYCLE OESTRAL Identification de la phase d’oestrus possible par: Observation : •Vagin « ouvert » •Muqueuse rose et humide •Lèvres vaginales striées Mesure de la température: Augmentation de la temperature rectale de 1 à 1,5 C avec le début de la phase lutéale (chaleurs) Frottis vaginal (Ruckebusch, 1981) leucocytes ¢ epithéliales nuclées (+ leucocytes) ¢ epithéliales cornifiées ¢ epithéliales cornifiées (+ leucocytes) CYCLE OESTRAL Identification de la phase d’oestrus possible par: Mesure de l’impédance électrique de la muqueuse vaginale : •La résistance électrique mesurée est plus importante pendant la phase de pro œstrus (> 4 KΩ) → accouplement le soir même •Demande de l’habitude pour obtenir des mesures correctes •Prévision efficace œstrus chez le rat Ex Lewis: impédence (48%) > frottis (14%) >> « non triées » (6.7%) Jaramillo et al, Lab Anim (NY), 2012, 41(5):122-8 •Possible (sondes différentes ) chez souris et rats Ramos et al, J Appl Physiol, 2001 Matériel spécialisé ou « artisanal » CYCLE OESTRAL Mesure de l’impédance électrique de la muqueuse vaginale : •Pas prédiction à 100% (tri / enrichissement) •Stimulation vaginale peut induire des pseudo-gestations (idem frottis) •Efficacité variable selon position de la sonde, urine… •Plus aléatoire chez la souris + cout « élevé » → A réserver à priori aux structures ayant des besoins de grosses productions ou/et accouplements programmés Photo S. Reibel ACCOUPLEMENTS NATURELS Phéromones et olfaction: Signaux captés par l’épithélium olfactif et l’organe Vomeronasal ablation chez la femelle → comportement « male » - Effet Whitten: Stimulation et synchronisation des oestrus en introduisant un male (ou les phéromones de son urine ) dans une cage de femelles - Effet Wandenberg: Accélération de la puberté des jeunes femelles en présence d’un male adulte différent du père - Effet Lee-Boot: Les phéromones d’autres femelles retardent la puberté Tendance au ralentissement et à l’arrêt des cycles de femelles maintenues à long terme en groupes stables - Effet Bruce: Avortement augmenté (blocage de l’implantation) en présence d’un male différent du père ACCOUPLEMENTS NATURELS Maintien de bonnes performances zootechniques: Marquage territorial urinaire → nettoyage des cages et fréquence de change → transfert du nid « sale » dans le nouvel environnement Choix du male par la femelle ( dominance, expérience sexuelle, parenté…) Convention (ratte et souris): Ovulation 3 à 5 heures après le début de la période de nuit, fécondation 1 à 2 heures après accouplement → J0 ou E0 ou 0dpc = milieu de la période de nuit de la fécondation VERIFICATION DE L’ACCOUPLEMENT - Observation du bouchon vaginal: Coagulation des protéines du liquide séminal (glandes coagulantes) dans le vagin. - Taille, visibilité et durée variable. Théoriquement 12 à 14 h après accouplement - beaucoup plus visible (et utilisé) chez la souris - Frottis vaginal (+ bouchon) Prélèvement vaginal à J0.5 (anse, écouvillon) étalement sur lame et observation à la loupe: une forte densité de spermatozoïdes représente une gestation probable qui devra être confirmée par palpation à partir de J12. - Très utilisée chez la ratte DEVELOPPEMENT EMBRYONNAIRE DEVELOPPEMENT EMBRYONNAIRE PRE-IMPLANTATOIRE Ampoule Oviducte E:0,5-1 E:1,5 Cornes utérines E:2 E:2,5 E:3 E:3,5 E:4 DEVELOPPEMENT EMBRYONNAIRE E 6.5: différenciation du mésoderme (gastrulation) E 7.5: allantoïde et neurulation E 8.5 à 9.5: Retournement (mise en place de l’amnios et du futur cordon) + Organogenèse précoce: -Bulbes cérébraux -Cœur -somites DEVELOPPEMENT EMBRYONNAIRE Organogenese: - Mise en place des différents organes - Circulation sanguine - Cartilages NAISSANCE GESTATION Grande variabilité selon les espèces et les souches à l’intérieur d’une même espèce (nombre de petits) Durée (jours) Nombre de petits / portée Nombre de portées / an souris 19-21 4-8 3-4 Ratte 21-23 6-9 3 hamster 16 5-9 6-8 cobaye 63-70 1-6 4-5 gerbille 24-26 1-12 7-8 lapine 29-33 1-18 4-5 MAMELLES Mamelles Espèce Nombre (paires) Situation souris 5 2 axillaires, 1 pectorale, 2 inguinales Ratte 6 3 pectorales, 1 abdominale, 2 inguinales hamster 6-7 2 pectorales, 2-3 abdominales, 2 inguinales cobaye 1 inguinale gerbille 4 2 pectorales, 2 inguinales lapine 4-5 1 pectorale, 2-3 abdominales, 1 inguinale LA SOURIS Evolution séparée sous forme de souches consanguines depuis 1909 (DBA/2) → variabilité considérable entre les souches et les lignées C57BL/6 Petits sevrés par portée = 4,3 Intervalle entre portées = 34 J FVB Petits sevrés par portée = 8.2 intervalle entre portées = 27 J - Espérance de vie: 1 à 2 ans - Poids adulte: 25 à 35 grammes pour le male, 10 g de moins pour la femelle - Puberté entre 35 J ( ) et 45 j ( ), accouplement à 6 (♀) et 8 (♂) semaines - Système d’élevage variable selon la souche (agressivité) - Cycle oestral de 4-5 jours, vérification de la fécondation par bouchon vaginal - Gestation de 19 à 21 jours - Poids à la naissance d’environ 1 g, sexage par la distance ano-génitale - Sevrage à 3-4 semaines, séparation rapide des sexes Distance ano-génitale Raton nouveau né femelle Raton nouveau né mâle La distance entre la papille urogénitale et l’anus est plus grande chez les males LE RAT Importante variabilité entre les souches et les lignées (Wistar et SD distribués depuis plus de 50 ans) Sprague Dawley Poids femelle (15S) = 300 g Petits sevrés par portée = 11 stérilité = 0.4% Brown Norway Poids femelle (15S) = 175 g Petits sevrés par portée = 5 stérilité = 15,8% - Espérance de vie: 2 ans ½ à 3 ans - Poids adulte: 400 à 500 grammes pour le male, 100 g de moins pour la femelle - Puberté à 2 mois, accouplement à 3 mois (selon le poids) et jusqu’à 12 – 15 mois - Système d’élevage monogame ou harem (séparation des femelles gestantes) - Cycle oestral de 4 jours, vérification de l’oestrus et de la fécondation par frottis vaginal - Gestation de 21 à 23 jours pouvant aller jusqu’à 30 jours en cas de gestation postpartum (implantation retardée) - Poids à la naissance d’environ 5 g, sexage par la distance ano-génitale - Sevrage à 3 semaines (40 à 50 g), séparation des sexes à 7 semaines LE COBAYE Cobaye = cochon d’Inde = Guinea pig =Cavia porcellus Animal nerveux mais peu agressif avec des comportements de panique de groupe Suplémentation en vitamine C Hébergement adapté au comportement alimentaire Dunkin Hartley - Espérance de vie: 4 à 8 ans - Poids adulte: 600 g à 1 kg, variable selon la souche - Puberté des femelles à 4-5 semaines et des males à 10 semaines - Accouplement des femelles à 3 mois (450 à 600g) et des males à 3-4 mois - Système d’élevage monogame ou harem (4 à 20 femelles). Sevrage à 21 jours - Ouverture du vagin recouverte d’une membrane hormis pendant l’oestrus et la mise bas - Cycle oestral d’environ 16 jours, vérification de la fécondation par « bouchon » vaginal ou frottis - Gestation de 59 à 72 jours (63j) - Poids à la naissance de 70 à 110 g, bébés mobiles, pourvus de poils et d’yeux ouverts - Sevrage et séparation avant 1 mois (21 à 28 jours) LE HAMSTER Hamster doré = hamster syrien ≠ hamster chinois = Mesocrecetus auratus ≠ Cricetulus griseus Animal facilement perturbé. Assez agressif Hamster doré - Espérance de vie: environ 2 ans - Poids adulte: environ 100 g, femelle légèrement plus grosse - Puberté des femelles à 6-8 semaines et des males à 8-12 semaines. Accouplement après 6 semaines. - Système d’élevage monogame préférable, problèmes d’agressivité de la part de la femelle - Cycle oestral de 4 jours, écoulements vaginaux post oestrus - Gestation de 16 jours - A la naissance, éviter les perturbations pendant au mois une semaine, cannibalisme fréquent - Sevrage et séparation des males à 1 mois, séparation des femelles avant 2 mois LA GERBILLE Animal nocturne et pacifique Très adaptable en terme d’ environnement Besoins hydriques minimes - Espérance de vie: 3-4 ans gerbille de Mongolie - Poids adulte: 70 à 100 g - Puberté des femelles à 2 mois et des males à 3 mois. Accouplement après 3 mois et jusqu’à 18 mois (femelles). - Système d’élevage: couples exclusifs formés à 10-12 semaines. Acouplement en trios possible avant maturité. Pas de séparation longue. - Cycle oestral de 4 jours, nouvelle fécondation post partum avec implantation retardée - Gestation de 25 jours - Poids à la naissance de 3 g, nidicoles (ouverture des yeux vers 15 jours) - Sevrage à 1 mois, séparation à 6 semaines LE LAPIN Plusieurs races dont la plus utilisée est le « Nouvelle Zélande » albinos - Espérance de vie: 4 à 5 ans - Poids adulte: 3 à 5 kg - Puberté des femelles à 3 mois ½ et des males à 4 mois 1/2. Accouplement vers 5 – 6 mois. Maturité sexuelle des males à 4 mois 1/2 - Système d’élevage en général monogame. - Ovulation provoquée par le coït 10 à 12 heures après la saillie. Pas de cycle oestral spontané mais acceptation du male très variable. Poursuite des accouplements pendant la gestation malgré la progestérone - Gestation de 29 à 33 jours - Poids à la naissance d’environ 25 g, nidicoles (ouverture des yeux vers 10 jours) - Sevrage à 1 mois et séparation vers 7 semaines