[email protected] Université Montpellier 2 - Master Sciences pour l’Environnement Mention : Biologie des Plantes, des Microorganismes, Bioingéniéries, Bioprocédés Spécialité : IMHE (Interactions Microorganismes, Hôtes, Environnements) Renvoyer la proposition de sujet de stage à : [email protected] / [email protected] / [email protected] Responsable des stages d’Initiation à la Recherche de M1 et de M2 : Tatiana Vallaeys : [email protected] Tél : 04 67 14 40 11 Administration : Patricia Quéméner : [email protected] Sujet de stage préciser le niveau souhaité M1 et/ou M2 (le cas échéant indiquez vos préférences: Préférence M2 Rôle du facteur de virulence MgtC chez Pseudomonas aeruginosa et Mycobacterium abscessus dans un modèle cellulaire d’infection. Responsable (s) de stage : Anne Blanc-Potard Encadrant (si différent du Responsable de stage notamment dans le cas où le Responsable n’est pas un Enseignant-Chercheur ou un Chercheur) : Personnel technique éventuellement impliqué dans la formation du stagiaire : Tel et Email du Responsable de stage et de l’encadrant (si différent du Responsable de stage) : 04-67-14-47-26. [email protected] Laboratoire d’Accueil et nom du Directeur : CNRS-UMR5235 Directeur : Catherine Braun-Breton Equipe d’Accueil : Régulation post-traductionnelle et pathogénie bactérienne (chef équipe Virginie Molle) Dans quel contexte s’insère le sujet de stage (démarrage d’un projet, travail partiel d’un sujet de thèse …….) : Le sujet s’inscrit dans la continuité d’un travail déjà initié (MgtC Pseudomonas), ainsi que dans une collaboration bien avancée (MgtC M. abscessus). Techniques qui seront principalement utilisées lors de ce stage : Le stage fera appel à des techniques de bactériologie, de biologie moléculaire et de microbiologie cellulaire. Biologie moléculaire : Etude de l’expression du gène mgtC lorsque les bactéries sont dans les macrophages (Q-RT-PCR ou utilisation de géne rapporteur) Microbiologie cellulaire : Infection de macrophages par P. aeruginosa et M. abscessus (souche sauvage ou mutant mgtC) et devenir des bactéries après infection. Les expériences seront faites en présence ou absence de différentes drogues (limitant l’acidification, le stress oxydatif ..) pour explorer le rôle de MgtC au sein du macrophage. Description du stage : donner un résumé (contexte, problématique, matériels et méthodes). Le facteur de virulence MgtC est une cible intéressante dans le cadre du développement de nouvelles stratégies anti-infectieuses. En effet, MgtC est un facteur de virulence remarquable car commun à plusieurs pathogènes bactériens intracellulaires majeurs (dont Salmonella typhimurium, Mycobacterium tuberculosis, Brucella suis et Burkholderia cenocepacia). Par ailleurs, nous avons à notre disposition un peptide naturel qui interfère avec MgtC et permet de valider son intérêt en tant que cible. MgtC est nécessaire pour la survie des bactéries dans les macrophages, probablement en modulant l’action de l’ATP synthase bactérienne, et nous essayons de mieux comprendre le rôle de MgtC dans cette étape intracellulaire. Nous étudions actuellement le rôle de MgtC dans la relation bactérie-macrophage chez deux bactéries pathogènes opportunistes responsables d’infections chez les patients atteints de mucoviscidose: Mycobacterium abscessus, qui est un pathogène émergent, et Pseudomonas aeruginosa qui est le pathogène opportuniste le plus fréquemment retrouvé chez les patients atteints de mucoviscidose. D’une façon surprenante, nous avons montré récemment que MgtC contribuait à la virulence du pathogène P. aeruginosa, qui est pourtant un pathogéne extracellulaire, lors d’une étape qui implique une phase intra-macrophagique. L’objectif du stage sera i) Etude de l’expression du gène mgtC lorsque les bactéries P. aeruginosa ou M. abscessus sont dans les macrophages (des données sont déjà disponible sur la régulation du gène dans un milieu de culture) ii) Etude du mécanisme par lequel le facteur bactérien MgtC contribue à une phase intra-macrophagique (résistance à un stress produit par le macrophage ??) en utilisant différentes drogues qui limitent spécifiquement certains stress du macrophage (stress acide, stress oxydatif ..) Ce projet est soutenu par l’association Vaincre La Mucoviscidose