Electrophorèse verticale pour gel de

L’électrophorèse verticale MV10 a été
conçue pour la séparation des protéines et
pour le séquençage de l’ADN.
L’unité peut être facilement alimentée par
le générateur Edvotek (modèle 531 et 534
recommandés). La tension maximum est
de 70-150 Volts.
CARACTERISTIQUES
•Un seul bloc prévenant les éclaboussures.
•Electrodes platine résistantes à la corrosion et câbles de connexion isolés.
•Couvercle de sécurité courbés vers le bas ce qui permet de sécurisés les électrodes
directement branchés sur le haut du couvercle.
•Fils électriques conçus d’un seul tenant : plus résistant contre l’effilochage. Les fils sont
suspendus dans le couvercle pour prévenir tout choc électrique quand il est connecté à une
alimentation
•Terminaux différenciés grâce à un code couleur et plombés afin d’assurer une polarité
correct.
Electrophorèse verticale
pour gel de
polyacrylamide
S E R V I L A B

2. Electrophorèse sur gel de polyacrylamide Modèle MV10
Précautions d’utilisation
et maintenance
Afin de ne rencontrer aucun problème de fonctionnement de l’électrophorèse, éteindre
et déconnecter l’alimentation avant d’enlever le couvercle. Soulever doucement le
couvercle, tout droit, pour éviter de toucher directement les électrodes. Ne pas mettre
en route l’appareil sans couvercle. Le gel doit être enlevé de l'appareil avant coloration.
Ne pas colorer de gels dans l’appareil.
Eviter de toucher les électrodes platine qui sont délicates. Ne pas essayer de faire
fonctionner l’appareil sans son couvercle.
Pour laver la chambre de l’électrophorèse, rincer la avec de l’eau et laisser les éléments
sécher à l’air libre.
Ne pas utiliser de détergent et n’exposer l’appareil à aucun solvant organique, acide ou
alcalin. La cuve résistera à un usage normal et prévu dans le guide utilisateur.
Cependant, si vous détectez une fuite coupez immédiatement l’alimentation et
contactez-nous.
Applications
A. SDS-protéines et gel de polyacrylamide
1. Plaque de gel de polyacrylamide, Tris-HCl tampon, 12% de gel homogène
(3 plaques ou 6 plaques). Kit de préparation pour gel de polyacrylamide.
2. Tampon de Glycine SDS pour électrophorèse
B. Gel de polyacrylamide pour électrophorèse pour protéines négatives à
alcalines pH
1. Plaque de gel polyacrylamide, Tris-HCI tampon, 12% de gel homogène (3
plaques ou 6 plaques). Kit de préparation pour gel de polyacrylamide.
2. Tampon de Glycine SDS pour électrophorèse
L’électrophorèse verticale MV10 a été conçue pour exécuter du gel de
polyacrylamide pré fabriqué, EDVOTEK ou des gels fabriqués avec le kit de
préparation de gel de polyacrylamide (Réf.250). Les kits de préparations sont
vendus séparément.
1. Orienter l’électrophorèse de façon à ce que la sortie noire se situe côté
gauche.
2. Retirer doucement le couvercle
3. Préparer les cassettes de gel selon les instructions.
Opération
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3. Electrophorèse sur gel de polyacrylamide Modèle MV10
Insertion du gel
dans l’appareil
1. Insérer la cassette de gel dans l’appareil dans la bonne direction. Les
échantillons de protéines ne pourront pas se séparés si le gel n’est pas orientés
correctement. Suivre les instructions détaillées fourni avec l’appareil.
2. Remplir la chambre avec environ 575 ml de solution. L’échantillon, doit être
immergé par la solution. Ne pas utiliser plus de 575 ml de solution.
3. Rincer le puits de gel avec une micropipette en injectant un peu de solution
diluée dans chaque puits.
4. Placer les échantillons dans les puits de gel. Replacer le couvercle sur l’appareil
en plaçant correctement les fils (noir sur noir et rouge sur rouge).
5. Brancher les fils noir et rouge sur les sorties négatives et positives en
respectant l’alimentation électrique sauf contre-indication.
6. Allumer l’appareil, définissez la tension recommandée pour le courant
approprié. Laisser le colorant migrer vers le bas du gel mais pas jusqu’au bout.
7. Eteindre l’appareil, retirer le couvercle et enlever la plaque de gel.
8. Utiliser le kit d’instructions Edvo-Kit pour les procédures spécifiques de
coloration.
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4. Electrophorèse sur gel de polyacrylamide Modèle MV10
Insertion de
l’échantillon
Pour utilisation avec une micropipette avec les cônes appropriés.
Le gel de polyacrylamide devrait être préparé et utilisé 1 à 2 heures avant l’expérience.
Un contact prolongé entre le gel et la solution tampon sans l’insérer dans
l’électrophorèse pourrait fausser les résultats. Ceci pourrait conduire à une diminution
de la résolution des échantillons et altérés les résultats. Ce problème ne peut pas se
produire si le gel et la solution sont les mêmes.
1. Le peigne et la bande devraient être retirés
du gel pré-moulés avant l’immersion de la
solution dans la chambre de l’électrophorèse.
Les puits d’échantillons devraient être
submergés dans la solution. Rincer les puits à
l’aide d’une pipette de transfert en injectant
de la solution.
2. Placer un nouveau cône sur la micropipette.
Utiliser seulement de cônes fins.
3. Placer la partie inférieure du cône de la
pipette au-
dessus de la surface de
l’électrode, directement sur le puits
d’échantillon. Le cône devrait être
partiellement contre l’arrière de la plaque de
gel mais l’ouverture de cônes devrait être au-
delà de l’échantillon.
N’essayer pas de bloquer le cône de la
pipette au milieu des plaques de gel.
4. Sortir tous les échantillons en appuyant
fermement sur le piston éjecteur de la
pipette sans s’arrêter. Ne libérer pas le piston
avant que tous l’échantillon ne soit sortie.
(une éjection trop rapide du cône pourrait
amener le mélange de la solution avec
l’échantillon dans l’embout).
5. Libérer le piston de la pipette après que
l’échantillon soit délivré et que le cône soit
retiré de la solution.
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