L’électrophorèse verticale MV10 a été conçue pour la séparation des protéines et pour le séquençage de l’ADN. B A Electrophorèse verticale pour gel de polyacrylamide V IL L’unité peut être facilement alimentée par le générateur Edvotek (modèle 531 et 534 recommandés). La tension maximum est de 70-150 Volts. R CARACTERISTIQUES • • • E • Un seul bloc prévenant les éclaboussures. Electrodes platine résistantes à la corrosion et câbles de connexion isolés. Couvercle de sécurité courbés vers le bas ce qui permet de sécurisés les électrodes directement branchés sur le haut du couvercle. Fils électriques conçus d’un seul tenant : plus résistant contre l’effilochage. Les fils sont suspendus dans le couvercle pour prévenir tout choc électrique quand il est connecté à une alimentation Terminaux différenciés grâce à un code couleur et plombés afin d’assurer une polarité correct. S • Electrophorèse sur gel de polyacrylamide Modèle MV10 Précautions d’utilisation et maintenance Afin de ne rencontrer aucun problème de fonctionnement de l’électrophorèse, éteindre et déconnecter l’alimentation avant d’enlever le couvercle. Soulever doucement le couvercle, tout droit, pour éviter de toucher directement les électrodes. Ne pas mettre en route l’appareil sans couvercle. Le gel doit être enlevé de l'appareil avant coloration. Ne pas colorer de gels dans l’appareil. Eviter de toucher les électrodes platine qui sont délicates. Ne pas essayer de faire fonctionner l’appareil sans son couvercle. B 2. Pour laver la chambre de l’électrophorèse, rincer la avec de l’eau et laisser les éléments sécher à l’air libre. A Ne pas utiliser de détergent et n’exposer l’appareil à aucun solvant organique, acide ou alcalin. La cuve résistera à un usage normal et prévu dans le guide utilisateur. Cependant, si vous détectez une fuite coupez immédiatement l’alimentation et contactez-nous. B. Gel de polyacrylamide pour électrophorèse pour protéines négatives à alcalines pH 1. Plaque de gel polyacrylamide, Tris-HCI tampon, 12% de gel homogène (3 plaques ou 6 plaques). Kit de préparation pour gel de polyacrylamide. 2. Tampon de Glycine SDS pour électrophorèse IL SDS-protéines et gel de polyacrylamide 1. Plaque de gel de polyacrylamide, Tris-HCl tampon, 12% de gel homogène (3 plaques ou 6 plaques). Kit de préparation pour gel de polyacrylamide. 2. Tampon de Glycine SDS pour électrophorèse R V Applications A. S E Opération L’électrophorèse verticale MV10 a été conçue pour exécuter du gel de polyacrylamide pré fabriqué, EDVOTEK ou des gels fabriqués avec le kit de préparation de gel de polyacrylamide (Réf.250). Les kits de préparations sont vendus séparément. 1. 2. 3. Orienter l’électrophorèse de façon à ce que la sortie noire se situe côté gauche. Retirer doucement le couvercle Préparer les cassettes de gel selon les instructions. Electrophorèse sur gel de polyacrylamide Modèle MV10 Insertion du gel dans l’appareil 2. 3. 4. 5. 6. S E R V IL 7. 8. Insérer la cassette de gel dans l’appareil dans la bonne direction. Les échantillons de protéines ne pourront pas se séparés si le gel n’est pas orientés correctement. Suivre les instructions détaillées fourni avec l’appareil. Remplir la chambre avec environ 575 ml de solution. L’échantillon, doit être immergé par la solution. Ne pas utiliser plus de 575 ml de solution. Rincer le puits de gel avec une micropipette en injectant un peu de solution diluée dans chaque puits. Placer les échantillons dans les puits de gel. Replacer le couvercle sur l’appareil en plaçant correctement les fils (noir sur noir et rouge sur rouge). Brancher les fils noir et rouge sur les sorties négatives et positives en respectant l’alimentation électrique sauf contre-indication. Allumer l’appareil, définissez la tension recommandée pour le courant approprié. Laisser le colorant migrer vers le bas du gel mais pas jusqu’au bout. Eteindre l’appareil, retirer le couvercle et enlever la plaque de gel. Utiliser le kit d’instructions Edvo-Kit pour les procédures spécifiques de coloration. B 1. A 3. 4. Electrophorèse sur gel de polyacrylamide Modèle MV10 Pour utilisation avec une micropipette avec les cônes appropriés. 2. Placer un nouveau cône sur la micropipette. Utiliser seulement de cônes fins. 3. Placer la partie inférieure du cône de la pipette au-dessus de la surface de l’électrode, directement sur le puits d’échantillon. Le cône devrait être partiellement contre l’arrière de la plaque de gel mais l’ouverture de cônes devrait être audelà de l’échantillon. A Le peigne et la bande devraient être retirés du gel pré-moulés avant l’immersion de la solution dans la chambre de l’électrophorèse. Les puits d’échantillons devraient être submergés dans la solution. Rincer les puits à l’aide d’une pipette de transfert en injectant de la solution. V 1. B Le gel de polyacrylamide devrait être préparé et utilisé 1 à 2 heures avant l’expérience. Un contact prolongé entre le gel et la solution tampon sans l’insérer dans l’électrophorèse pourrait fausser les résultats. Ceci pourrait conduire à une diminution de la résolution des échantillons et altérés les résultats. Ce problème ne peut pas se produire si le gel et la solution sont les mêmes. IL Insertion de l’échantillon Sortir tous les échantillons en appuyant fermement sur le piston éjecteur de la pipette sans s’arrêter. Ne libérer pas le piston avant que tous l’échantillon ne soit sortie. (une éjection trop rapide du cône pourrait amener le mélange de la solution avec l’échantillon dans l’embout). E 4. R N’essayer pas de bloquer le cône de la pipette au milieu des plaques de gel. Libérer le piston de la pipette après que l’échantillon soit délivré et que le cône soit retiré de la solution. S 5.