Gélose Esculine

Gélose Esculine
I.
Principe
L’hydrolyse de l’esculine est un des critères usuels de l’identification différentielle au sein de
nombreux groupes bactériens : Streptocoques, Entérobactéries, Pseudomonas, Vibrionaceae,
bactéries anaérobie strictes.
L’esculine est un hétéroside (esculoside), c'est-à-dire qu’il est formé d’une partie glucidique et d’une
partie non glucidique (aglycone).
Si la bactérie possède une β-glucosidase (esculinase), elle hydrolyse l’esculine et libère du glucose et
l’esculétine (composé aglycone qui possède une fonction phénol).
L’esculétine produite réagit avec les ions de fer III ou les ions thallium pour former un précipité noir
dans le milieu.
II.
Composition
Pour 1L d’eau distillée :
 Peptones : 10 g
 Esculine : 1 g
 Citrate de fer III : 1 g
 Agar : 20 g
 pH : 7.4
III.
Technique
Ensemencer par piqûre centrale dans le culot avec du bouillon bactérien, ou si sur gélose
ensemencer par des stries serrée.
Incuber a 37°C pendant 24 heures.
IV.
Lecture
Pour milieu en tube :
Si le milieu est noire : le produit présent de l’hydrolyse de l’esculine a réagi avec les ions de fer III
pour donner un précipité noir, Esculine +.
Si le milieu reste inchangé : absence d’hydrolyse, Esculine -.
Pour milieu en boite :
Si le milieu est noir : le fer III a réagi avec l'esculétine, la bactérie possède l'enzyme esculinase,
Esculine +.
Si le milieu reste gris : il n'y a pas eu de réaction, la bactérie ne possède pas l'enzyme, Esculine -.