
Gélose Esculine 
I. Principe 
L’hydrolyse de l’esculine est un des critères usuels de l’identification différentielle au sein de 
nombreux groupes bactériens : Streptocoques, Entérobactéries, Pseudomonas, Vibrionaceae, 
bactéries anaérobie strictes. 
L’esculine est un hétéroside (esculoside), c'est-à-dire qu’il est formé d’une partie glucidique et d’une 
partie non glucidique (aglycone). 
Si la bactérie possède une β-glucosidase (esculinase), elle hydrolyse l’esculine et libère du glucose et 
l’esculétine (composé aglycone qui possède une fonction phénol). 
L’esculétine produite réagit avec les ions de fer III ou les ions thallium pour former un précipité noir 
dans le milieu. 
 
II. Composition  
Pour 1L d’eau distillée : 
 Peptones : 10 g 
 Esculine : 1 g 
 Citrate de fer III : 1 g 
 Agar : 20 g 
 pH : 7.4 
III. Technique 
Ensemencer par piqûre centrale dans le culot avec du bouillon bactérien, ou si sur gélose 
ensemencer par des stries serrée. 
Incuber a 37°C pendant 24 heures. 
IV. Lecture 
Pour milieu en tube : 
Si le milieu est noire : le produit présent de l’hydrolyse de l’esculine a réagi avec les ions de fer III 
pour donner un précipité noir, Esculine +. 
Si le milieu reste inchangé : absence d’hydrolyse, Esculine -. 
 
Pour milieu en boite :  
Si le milieu est noir : le fer III a réagi avec l'esculétine, la bactérie possède l'enzyme esculinase, 
Esculine +. 
Si le milieu reste gris : il n'y a pas eu de réaction, la bactérie ne possède pas l'enzyme, Esculine -.