de 4 (tétrade). Vous isolez une tétrade et sous binoculaire vous mettez en culture séparément
chacune des spores. Deux d'entre elles ont un phénotype sauvage, et deux d'entre elle sont des
mutants sec de phénotype B.
5) Quelle explication pouvez-vous donner à ce résultat? (4 pts)
Si, les deux mutations sont sur deux chromosomes différents, lors de la méiose, les deux
chromosomes portant les deux mutations sont ségrégés dans une des deux cellules filles.
Puis la mitose post réductionnelle fait que 2 spores sur 4 ont la double mutation; Si les
deux mutations sont sur le même chromosome, alors il y a eu un crossing-over.
Que pouvez-vous conclure sur les positions respectives des protéines mutées dans la
voie de sécrétion? (2 Pts)
La protéine B intervient avant la protéine A dans la voie de sécrétion.
Vous analysez le phénotype des mutants sec portant des mutations affectant des protéines
distinctes (respectivement Sec12, 13, 16, 17, 18, 22 et 23). Aux températures non permissives,
tous ces mutants sont incapables de réaliser le transport entre le réticulum endoplasmique et
l'appareil de Golgi.. Néanmoins l'analyse fine du phénotype vous permet de distinguer deux
familles de mutants: les mutants sec 17, sec 18, sec 22 accumulent des vésicules de diamètre
50 nm tandis que l'apparition de telles vésicules n'est pas observée pour les autres mutants.
7) Quelle(s) hypothèse pouvez vous formuler pour explique ce résultat? (4 pts)
Les protéines Sec 17, 18, 22 sont affectées dans la fusion des vésicules sur l'appareil de
Golgi d’où l'accumulation des vésicules. Les protéines Sec 12, 13, 16, 23 sont affectés
dans le bourgeonnement des vésicules à partir du réticulum endoplasmiqque.
Pour vérifier vos hypothèses, vous fabriquez des souches portant des doubles mutations.
L'analyse du phénotype est portée sur la figure 1. (Dans certain cas on ajoute de la
cycloheximide (Chx), qui bloque la synthèse protéique)
8) Les résultats expérimentaux confirment-ils votre hypothèse? (2 Pts)
Si cette hypothèse est vraie, alors tous les doubles mutants contenant une mutation du
premier groupe et une mutation du deuxièeme groupe n'accumulent pas de vésicules.
C'est ce que l'on observe sur la figure.