ANNEE 2007 DANEL Sophie DIRECTEURS DE MEMOIRE : Dr BURGEL Pierre-Régis & Pr DUSSER Daniel TITRE DU MEMOIRE : Hypervascularisation péribronchiolaire dans la mucoviscidose : surexpression épithéliale de VEGF165 et régulation par Pseudomonas aeruginosa RESUME Introduction. Les hémoptysies, liées à une hypervascularisation bronchique d’origine systémique qui prédomine radiologiquement dans les zones d’infection bronchique, sont fréquentes dans la mucoviscidose. VEGF165 est un facteur de croissance impliqué dans l’angiogénèse normale et pathologique. Les liens entre l’hypervascularisation bronchique, l’infection bactérienne et VEGF165 sont inconnus dans la mucoviscidose. Méthodes. La vascularisation péribronchiolaire ainsi que l’expression et la localisation de VEGF165 ont été évalués à l’aide de marquages immunohistochimiques sur des poumons humains. Nous avons étudié les tissus pulmonaires chirurgicaux de sujets Témoins (n=10) et de sujets mucoviscidosiques (explants pulmonaires, n=10). Les marquages ont été quantifiés par analyse morphométrique quantitative. La régulation de la synthèse de la protéine VEGF165 par les cellules épithéliales respiratoires a été étudiée sur la lignée de cellules épithéliales NCI-H292. La production de VEGF165 a été mesurée par ELISA en absence et en présence de surnageant de culture de Pseudomonas aeruginosa. Le rôle de l’activation du récepteur de l’EGF dans la synthèse du VEGF165 a été étudié en utilisant un inhibiteur de la tyrosine kinase du récepteur de l’EGF, l’AG1478, et un anticorps dirigé contre le récepteur de l’EGF, le C225. Résultats. Il existe une augmentation du nombre et de la surface des vaisseaux péribronchiolaires chez les patients du groupe mucoviscidose (P<0,01 par rapport aux Témoins). L’épithélium bronchiolaire est un site majeur d’expression de VEGF165 et la surface épithéliale marquée pour VEGF165 est augmentée chez les patients mucoviscidosiques (P<0,01). Le surnageant de culture de Pseudomonas aeruginosa provoque une augmentation dose- et temps-dépendante de la synthèse de la protéine VEGF165 dans les cellules épithéliales NCI-H292 (P<0,05 ; n=3). Le prétraitement des cellules NCI-H292 par l’AG1478 ou le C225, prévient l’effet du surnageant de culture de Pseudomonas aeruginosa sur la synthèse de la protéine VEGF165. Conclusions. Chez les patients mucoviscidosiques au stade de la greffe, l’hypervascularisation péribronchiolaire est associée à une augmentation de l’expression de VEGF165 dans l’épithélium bronchiolaire, suggérant un lien de causalité. Les facteurs sécrétés de Pseudomonas aeruginosa induisent la synthèse de VEGF165 par des cellules épithéliales par activation du récepteur de l’EGF. Mots-clés : Infection, Inflammation, Mucoviscidose