Étude de l`implication de Gdt1 dans l`homéostasie golgienne de

Etude&de&l’implication&de&Gdt1&dans&l’homéostasie&golgienne&de&
Saccharomyces&cerevisiae
Eudoxie& DULARY,& S ven& PO TELLE,& François& F OULQUIER& et&Sandrine& DUVET
Unité&du&Glycobiologie&Structurale&et&Fonctionnelle&/&UMR&8576&CNRS
Université&des&Sciences&et&Technologies&de&Lille&59655&Villeneuve&d’Ascq&
GDT1%/%TMEM%165
•La&glycosylation&est&une&modification&des&protéines&impliquée&
dans&des&phénomènes&physiologiques&tels&que&la&migration&
cellulaire&et&les&interactions&cellules/cellules.
•Implication&de&la&N-Glycosylation&dans&des&pathologies&telles&que&
le&cancer&ou&les& Congenital Disorders of&Glycosylation&(CDG).
•Une&déficience&en&TMEM165&conduit&à&un&CDG-II.
•Protéine&transmembranaire de&324&AA&chez&l’Homme.
Intérêt%du%« modèle%levure »
•Présence&de&séquences& de&gènes& très&conservées&entre& GDT1&(S.&
cerevisiae)&et&TMEM165&(Homme)
•Modèle&facile&d’utilisation
•Facilité&de&supp ression&de&gènes&dans&les&levures
•Complémentation&(restauration&des&gènes)&possible&et&rapide
•Possibilité&de&réaliser&des&mutations&de&gènes
Savoir%faire%/%Savoir%être
•Disciplin aire:& Culture&Cellulaire&(Mammifères&et&Levures),&
Tr a n s f ec t i o n s& /& Tr a n sf o r ma t i o n s& d e& l ev u r e s, & W est er n & B l o t & / &
Immunoprécipitation /&Lectines Blot,&Immunofluorescence&par&
microscopie&confocale,&Spectrométrie&de&masse,&Activité&
invertase&sur&gel& natif
•Non&disciplinaire:&capacité&d’adaptation,&autonomie,&rigueur,&
persévérance,&travail&d’équipe,&rédaction&de&rapports,&
transmission&des& connaissances,&esprit&de&synthèse
Résultats%attendus
WT Δgdt1
Ca2+ 0,5M
Mn2+ 1mM +-
- -
-
+ +
++-
- -
-
+ +
+
•Défaut&de&
Glycosylation&en&
présence&de&Ca2+
•Défaut&restauré& en&
présence&de&Mn2+
•TMEM1 65/GDT1&
transporteur&de&
Mn2+?
Problématique
•Systèmes& de&Glycosylation&différents&entre&la&levure&
(mannosylation)&et&l’Homme&(galactosylation,&sialylation).
•MAIS l’environnement&golgien&(Homéostasie&golgienne)&&est&
semblable& entre&l’homme&et& la&levure.
TMEM1 65/GDT1&est&une&protéine&transmembranaire&dont&la&
déficience&conduit&à&un&défaut&de&glycosylation&chez&l’Homme.
Quel&est& le&rôle&de&TMEM165/GDT1&dans&l’homéostasie&golgienne?&
Et&quel&est& sa&fonction?
Conclusion%et%perspectives
•TMEM1 65/Gdt1&est&un&transporteur&impliqué&dans&
l’homéostasie&golgienne.
•Rôle&potentiel&dans&le&transport&de Manganèse,&ion&
indispensable&aux&glycosyltransférases.
•Quels&sont&les&domaines&impliqués&dans&ce&transport?
•Quel&est&l’impact&des&mutations&observées&chez&les&patients&dans&
la&fonctionnalité&de&TMEM165?
Financements
•Bourse&de&thèse:&financement&public&(MRT)
•Recherche:&financement&public&(CNRS)&/&ANR&/&Mizutani /&E-Rare