Après séchage à différentes températures, les feuilles de la mélisse ont été broyées à l’aide d’un broyeur
électrique de marque IKA. A11 basic. Les poudres des différents échantillons obtenues après broyage sont
tamisées à l’aide d’un tamiseur (de marque RETCS AS 2000) contenant plusieurs tamis de différentes
granulométries. Une poudre très fine de diamètre <45 µm de chaque échantillon est récupérée à la fin du
tamisage, puis conservée à l’abri de la lumière dans des flacons étiquetés et bien fermés.
II. 3. Extraction des polyphénols
Dans notre travail une extraction solide-liquide est suivie selon le protocole d’Owen et Johns [1].
Le taux d’extraction est calculé par la formule suivante (1):
(1)
P0 : poids du bécher vide (g) ;
P1 : poids du bécher après évaporation (g) ;
E : poids de l’échantillon (poudre) (g).
II. 4. Dosage des composés phénoliques
Les différentes classes de polyphénols contenues dans l’extrait méthanolique de la Mélisse ont été dosées
à l’aide d’un spectrophotomètre UV/ visible.
Le dosage des polyphénols totaux dans l’extrait de Melissa officinalis est réalisé par la méthode colorimétrique
de Folin-Ciocalteu rapportée par Brahmi et al. [2].
La détermination quantitative des flavonoïdes est effectuée selon la méthode colorimétrique du trichlorure
d’aluminium rapportée par Brahmi et al. [2].
La teneur en tannins de l’extrait méthanolique de la mélisse est déterminée selon la méthode donnée par
Amessis-Ouchemoukh et al. [3].
II. 5. Mesure de l’activité antioxydante
Le pouvoir réducteur de l’extrait de Melissa officinalis a été déterminé selon la méthode rapporté par
Makhlouf-Boulelbache et al. [4].
Pouvoir anti-radicalaire par la méthode au DPPH est réalisée selon la méthode décrite par Brahmi et al. [2].
II. Résultats et discussion
Les résultats de rendement d’extraction, de dosage des polyphénols totaux, flavonoides et tannins ainsi
que de l’activité antioxydante sont donnés dans les figures 1-A, 1-B, 1-C, 1-D, 2-A et 2-B respectivement.
Les résultats obtenus (Figure N°1) montrent que le taux d’extraction le plus élevé dans cette étude est évalué à
27,25% pour l’échantillon séché à l’air libre.
A partir des résultats de la figure N°1, la teneur en polyphénols totaux la plus élevée est attribuée à
l’échantillon séché à l’air libre
(
120,485 ± 20,965 mg EC / g de MS), pour l’échantillon séché à 40°C , la teneur
est de 102,115 ± 4,245 mg EC / g de MS. Une forte diminution de la teneur en polyphénols totaux est observée
pour les échantillons séchés à 50°C et à 60°C, les valeurs sont respectivement de
25,7175 ± 18,6925 mg EC
/ g de MS et
17,60 ± 0,70 mg EC / g de MS. La forte diminution en teneur de polyphénols totaux dans les
extraits de la Mélisse séchés à 50 °C et 60 °C pourrait être expliquée par leur sensibilité à la chaleur. D’ailleurs,
Chan et ses collaborateurs [6], ont rapporté que des pertes dans la teneur en polyphénols totaux d'échantillons de
plantes qui ont subit un traitement thermiques sont observées.
D’après les données obtenues (Figure N°1), le taux moyen le plus élevé des flavonoïdes est contenu
dans les feuilles de Melissa officinalis séchées à 40°C (4,11 ± 0,18 mg EQ / g de MS). L’échantillon séché à l’air
libre a donné une valeur proche de celle de l’échantillon séché à 40°C (3,295 ± 0,245 mg EQ / g de MS).
Tandis qu’une faible quantité en flavonoides est observée pour les échantillons séchés à 50°C et à 60°C.
L’élévation de la teneur en flavonoides des échantillons de la mélisse séchés à 40°C et à l’air libre, par rapport
aux échantillons séchés à 50°C et à 60°C est probablement due à la dégradation des composés phénoliques par
les hautes températures [6].
D’après les résultats de la figure N°1, la teneur de la Mélisse en tannins est très faible (0,505 mg EAT/ g de
MS).D’ailleurs, Melissa officinalis est connue comme une plante pauvre en tannins [7].
D’après les résultats de pouvoir réducteur, l’échantillon séché à 40°C, possède l’absorbance la plus
élevée (0,144 ± 0,036 nm), presque la moitié de l’absorbance du standard (0,281 nm). Tandis que, les
échantillons séchés à l’air libre, 50°C et 60°C, ont de très faibles absorbances qui sont respectivement de 0,018 ±
0,013 nm; 0,02 ± 0,003 nm ; 0,018 ± 0,004 nm.
A partir des résultats de l’activité scavenger au DPPH, l’activité anti-radicalaire la plus élevée est
attribuée à l’échantillon séché à 40°C (81,24 ± 0,26%), suivi par l’échantillon séché à l’air libre (49,34 ± 1,95%).
Taux (%) = [(P1-P0)/E] .100