Caractérisation enzymatique et biochimique du site actif de la

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FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES
U.F.R Sciences et Techniques biologiques
Ecole doctorale Biologie – Santé - Environnement
Thèse
présentée pour l’obtention du titre de
Docteur de l’Université Henri Poincaré, Nancy-I
en Enzymologie Moléculaire
par Arnaud Pailot
Caractérisation enzymatique et biochimique du site actif de la
Glycéraldéhyde-3-Phosphate Déshydrogénase non-phosphorylante de
Streptococcus mutans
Soutenue publiquement le 15 novembre 2006 devant la commission d’examen :
Membres du jury :
Rapporteurs : Mme. M. Reboud-Ravaux Professeur, Université Pierre et Marie Curie, Paris-VI
Mr. J.P. Samama Directeur de Recherche CNRS, Strasbourg
Examinateurs : Mr. J. Magdalou Directeur de Recherche CNRS, Nancy
Mme. C. Corbier Professeur, Université Henri Poincaré, Nancy-I
Mr. M.T. Cung Directeur de Recherche CNRS-ENSIC, INPL
Mr. G. Branlant Professeur, Université Henri Poincaré, Nancy-I
(Directeur de thèse)
Invité : Mr. F. Talfournier MCF, Université Henri Poincaré, Nancy-I
(Co-directeur de thèse)
Laboratoire de Maturation des ARN et Enzymologie Moléculaire
UMR CNRS-UHP 7567 – Faculté des Sciences- BP 239- 54506 Vandoeuvre-lès-Nancy
Je tiens à remercier Madame Christiane Branlant, Directeur de l’UMR CNRS-UHP
7567, pour m’avoir accueilli dans son laboratoire.
Je remercie également Monsieur le Professeur Guy Branlant, responsable de
l’équipe d’Enzymologie Moléculaire, qui m’a accordé sa confiance en acceptant de diriger
mon travail de thèse malgré une interruption de deux ans de mes études. Les discussions
que nous avons eues m’ont permis d’acquérir une rigueur et une réflexion nécessaires au
travail de recherche. Il a su me guider dans mes travaux jusqu’à la rédaction de ce
manuscrit.
J’adresse également mes plus sincères remerciements à Madame Michèle Reboud-
Ravaux, Professeur à l’Université de Paris VI, et à Monsieur le Docteur Jean-Pierre
Samama, Directeur de recherche au CNRS de Strasbourg, qui me font l’honneur de juger
ce travail. J’associe à ces remerciements Madame le Professeur Catherine Corbier et
Messieurs les Docteurs Manh Thong Cung et Jacques Magdalou qui ont acceptés de juger
cette thèse.
Je voudrais témoigner à Monsieur le Docteur François Talfournier ma plus
profonde gratitude pour avoir coencadré ce travail depuis le DEA. Ses conseils ainsi que les
nombreuses discussions scientifiques ou sportives que nous avons eues ensemble ont rendu
cette thèse plus agréable. Je tiens également à remercier Céline et Noémie pour la patience
dont elles ont fait preuve lorsque j’avais « besoin » de François.
Je tiens à remercier Madame le Professeur Catherine Corbier et Mademoiselle le
Docteur Katia D’Ambrosio du groupe de Biocristallographie de Nancy pour leur
fructueuse collaboration.
Mes remerciements vont aussi à Sandrine Boschi-Muller, Sophie Rahuel-Clermont
et Christophe Jacob avec qui les discussions ont toujours été enrichissantes. Merci
également à Arnaud Gruez pour son aide lors de la rédaction de ce mémoire et à Sandjiv
Sonkaria pour son aide lors de la rédaction des publications.
La qualité de l’équipe d’Enzymologie Moléculaire ne serait rien sans l’aide
technique, passée ou présente, de Séverine, Carine, Christophe, Alex et Saïd.
Je remercie toutes les personnes du laboratoire pour leur bonne humeur et leur
sympathie. En particulier Jacky, notre Moun’ nationale, sans qui ce labo ne ressemblerait
en rien à ce qu’il est aujourd’hui.
Merci également à tous les gens de mon ancien club de Longuyon, ma ville natale.
Romain, Philippe, Val & Alex, les deux frangins, Noël, Chab’, Bidon, Bono, merci
pour les soirées aux 3B et tous les délires passés, présents et futurs. J’en profite pour
remercier mes coéquipiers du club de hand de Jarville et en particulier Julie &
Thom, mon coach.
Ce travail n’aurait pas été le même sans le soutien de vrais amis. Je pense à
Sylvain & Marlène, Xav’ & Laure, Nico, Lionnel, Axel & Gaby, Jimmy. Je remercie
de tout mon cœur Aileen & Athanase pour les nombreuses soirées où ils ont du me
supporter.
A l’heure de ma soutenance, j’aurai une pensée sincère pour celui qui me
considère comme son jumeau de thèse, Mathias, qui a décidé de rejoindre les Etats-
Unis.
Je voudrais adresser un remerciement tout particulier à Adeline, qui a
toujours su me comprendre et m’apprécier, surtout quand je devenais la personne la
plus pénible du monde.
J’adresse un grand merci à Rachel qui m’a soutenu et encouragé jusque dans
les moments les plus pénibles. J’associe à ces remerciements toute sa famille. Je
voudrais rendre hommage à Christian, son papa, qui nous a quitté trop tôt, emporté
par la maladie.
Enfin, je tiens à saluer le courage de ma famille, mes oncles et tantes, cousins
et cousines, qui ont réussi à me supporter jusqu’à la fin de ce travail, et ma pounet’
pour sa fidélité. Je tiens particulièrement à remercier et à exprimer toute ma
gratitude et ma reconnaissance aux trois personnes qui m’ont permis de devenir ce
que je suis, mes grands-parents, Odette & Michel, et ma Maman, Marie-José. Merci
à tous les trois pour les sacrifices dont vous avez fait preuve afin que j’atteigne le but
que je m’étais fixé.
A tous MERCI !
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