Expression de la protéine Arc dans les cultures organotypiques d
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Expression de la protéine Arc dans les cultures organotypiques d’hippocampe Paula PACI, Emile GODAUX et Laurence RIS Laboratoire des Neurosciences, Université de Mons, Belgique INTRODUCTION METHODES Nos souvenirs s’inscrivent dans notre cerveau grâce à des modifications des efficacités des synapses connectant entre elles les neurones. La plasticité synaptique est la capacité des synapses à modifier leur efficacité après une activité préalable. L’augmentation de la transmission synaptique est une LTP (Long-Term Potentiation), à l’inverse, sa diminution est une LTD (Long-Term Depression). L’hippocampe est une structure cérébrale impliquée dans la mémorisation à long terme où les neurones communiquent par la voie trisynaptique. Arc est une protéine impliquée dans l’apprentissage et la mémoire qui se localise dans les épines dendritiques où elle est traduite localement. • La culture organotypique d’hippocampe consiste à cultiver une tranche d’hippocampe in vitro tout en y préservant l’organisation architecturale des neurones. épine dendritique • La détection de protéines à l’aide d’anticorps spécifiques par les techniques d’électrophorèse et d’électrotransfert. • La transfection biolistique est une technique par laquelle des billes d’or liées à de l’ADN sont accélérées par un flux d’hélium afin de les propulser à l’intérieur des cellules. • Microscopie confocale. Cellules pyramidales de CA1 Collatérales de Schaffer PROBLEMATIQUE Sachant que les mécanismes sous-jacents à la mémoire à long terme sont à l’heure actuelle peu connus, nous espérons apporter une aide à leur compréhension par l’étude de l’expression de la protéine Arc dans l’hippocampe. RESULTATS PRELIMINAIRES Visualisation des épines dendritiques par microscopie confocale dans un tranche organotypique d’hippocampe Les épines dendritiques sont de petites protubérances qui hérissent les dendrites et reçoivent l’information électrique du neurone pré-synaptique via son axone. Une constellation d’épines dendritiques est visible sur ces images traduisant une activité neuronale importante dans la tranche organotypique d’hippocampe. 100µm 100µm Expression et induction de la protéine Arc dans les cultures organotypiques d’hippocampe La protéine Arc est initialement exprimée dans l’hippocampe et dans les tranches d’hippocampe mais son expression diminue rapidement au cours du temps. Néanmoins, l’induction d’une LTP par l’administration de drogues (forskoline, IBMX et picrotoxine) entraîne sa réexpression de manière considérable. HIP 0j 1j 3j 6j 11j LTP24h 11j LTP2h 18j 22j LTP24h 22j PERSPECTIVES Suivre l’expression et la localisation de la protéine Arc dans la tranche organotypique d’hippocampe avant et après l’induction d’une LTP.
