Expression de la protéine Arc dans les cultures organotypiques d

Expression de la protéine Arc dans les
cultures organotypiques d’hippocampe
INTRODUCTION
Nos souvenirs s’inscrivent dans notre cerveau grâce à des
modifications des efficacités des synapses connectant entre
elles les neurones. La plasticité synaptique est la capacité
des synapses à modifier leur efficacité après une activité
préalable. L’augmentation de la transmission synaptique est
une LTP (Long-Term Potentiation), à l’inverse, sa diminution
est une LTD (Long-Term Depression). L’hippocampe est
une structure cérébrale impliquée dans la mémorisation à
long terme où les neurones communiquent par la voie
trisynaptique. Arc est une protéine impliquée dans
l’apprentissage et la mémoire qui se localise dans les
épines dendritiques où elle est traduite localement.
METHODES
• La culture organotypique d’hippocampe consiste à cultiver
une tranche d’hippocampe in vitro tout en y préservant
l’organisation architecturale des neurones.
• La détection de protéines à l’aide d’anticorps spécifiques
par les techniques d’électrophorèse et d’électrotransfert.
• La transfection biolistique est une technique par laquelle
des billes d’or liées à de l’ADN sont accélérées par un flux
d’hélium afin de les propulser à l’intérieur des cellules.
• Microscopie confocale.
PERSPECTIVES
Suivre l’expression et la localisation de la protéine Arc dans la tranche organotypique d’hippocampe avant et après l’induction
d’une LTP.
Expression et induction de la protéine Arc dans les cultures organotypiques d’hippocampe
PROBLEMATIQUE
Sachant que les mécanismes sous-jacents à la mémoire à long terme sont à l’heure actuelle peu connus, nous espérons
apporter une aide à leur compréhension par l’étude de l’expression de la protéine Arc dans l’hippocampe.
HIP 0j 1j 3j 6j 11j
LTP24h
11j 22j
LTP2h
18j
LTP24h
22j
La protéine Arc est initialement exprimée dans l’hippocampe et dans les tranches d’hippocampe mais son expression diminue
rapidement au cours du temps. Néanmoins, l’induction d’une LTP par l’administration de drogues (forskoline, IBMX et picrotoxine)
entraîne sa réexpression de manière considérable.
RESULTATS PRELIMINAIRES
Visualisation des épines dendritiques par microscopie confocale dans un tranche organotypique d’hippocampe
100µm 100µm
Les épines dendritiques sont de petites
protubérances qui hérissent les dendrites
et reçoivent l’information électrique du
neurone pré-synaptique via son axone.
Une constellation d’épines dendritiques
est visible sur ces images traduisant une
activité neuronale importante dans la
tranche organotypique d’hippocampe.
Collatérales de Schaffer
Cellules pyramidales de CA1
épine
dendritique
Paula PACI, Emile GODAUX et Laurence RIS
Laboratoire des Neurosciences, Université de Mons, Belgique