David_Elise_2012_memoire - Papyrus
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Université de Montréal
Caractérisation et délétion de tous les systèmes d’adhésion connus de
Salmonella enterica sérovar Typhi
par
Élise David
Département de Microbiologie et Immunologie
Faculté de Médecine
Mémoire présenté à la Faculté de Médecine
en vue de l’obtention du grade de Maîtrise
en Microbiologie et Immunologie
Avril 2012
© Élise David, 2012
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Université de Montréal
Faculté des études supérieures et postdoctorales
Ce mémoire intitulé :
Caractérisation et délétion de tous les systèmes d’adhésion connus de
Salmonella enterica sérovar Typhi
Présenté par :
Élise David
a été évalué par un jury composé des personnes suivantes :
Dr George Szatmari,
Président-rapporteur
Dre France Daigle,
Directrice de recherche
Dr Mario Jacques,
Membre du jury
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Résumé
Les fimbriae sont des structures protéiques extracellulaires retrouvées chez une
vaste diversité de bactéries. Ces structures ont fait l’objet de nombreuses études et sont
maintenant reconnus pour leur implication dans l’adhésion et l’invasion aux cellules
eucaryotes, mais aussi dans la production de biofilms. Ils sont groupés selon leur voie de
sécrétion. Certains utilisent une machinerie spécifique et individuelle, c’est le cas des pili
de type IV, tandis que d’autres utilisent la voie de sécrétion générale suivit d’une voie
spécifique telle que la voie du chaperon-placier (« Chaperon Usher Pathway ») (fimbriae
CUP) ou la voie de nucléation précipitation (« nucleation precipitation pathway ») (Curli).
Malgré toutes les connaissances actuelles concernant les fimbriae, très peu d’informations
sont disponibles quant aux fimbriae de Salmonella enterica sérovar Typhi (S. Typhi). Ce
pathogène unique à l’homme est l’agent étiologique de la fièvre typhoïde. Puisque les
fimbriae sont reconnus pour être impliqués dans l’adaptation à l’hôte, nous avons décidé
d’étudier davantage l’arsenal fimbriaire de S. Typhi, dans l’espoir d’identifier des facteurs
de virulence uniques à S. Typhi et impliqués dans la ségrégation de l’hôte. La souche S.
Typhi ISP1820 possède 14 opérons codant pour des systèmes d’adhésion, mais plusieurs
contiennent des pseudogènes et leur expression n’a jamais été observée in vitro. Afin
d’étudier les systèmes d’adhésion de S. Typhi, nous avons supprimé chaque opéron du
génome individuellement et cumulativement à l’aide une technique de mutagénèse par
échange allélique. Ainsi, nous avons testé chaque mutant individuel et la souche mutante
pour tous les systèmes d’adhésion dans plusieurs essais tels que des infections de cellules
épithéliales et de macrophages, de mobilité et de formation de biofilm. Nous avons aussi
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