Cyclosporine - Roche Diagnostics (Schweiz)

Elecsys® Cyclosporine
Test par électrochimiluminescence (ECLIA)
pour le dosage in vitro de la Ciclosporine dans
le sang humain total
Indication
Le test Elecsys® Cyclosporine est utilisé comme aide dans le suivi des patients sous ciclosporine à la suite d’une greffe du cœur,
du foie, du rein, du poumon ou de moelle osseuse. Les patients greffés reçoivent des médicaments immunosuppresseurs (IS)
tels que la ciclosporine pour éviter un rejet du greffon par le système immunitaire. Les tests d’IS sont utilisés pour vérifier la
concentration du médicament dans le sang du patient et ajuster la posologie au besoin de sorte à assurer un traitement efficace
et bien toléré. Etant donné que les IS ont une marge thérapeutique étroite: la dose doit être suffisamment élevée pour empê-
cher un rejet du greffon, mais en même temps assez faible pour éviter une toxicité du médicament et une survenue d’infections
opportunistes.
Prétraitement manuel de l’échantillon
Le test Elecsys® Cyclosporine est dosé sur des échantillons de sang humain total. Vu que la ciclosporine est largement lié aux
globules rouges et aux protéines, un prétraitement manuel greffés est nécessaire pour libérer les substances à analyser des
protéines. Le réactif de prétraitement est utilisé de façon universelle pour tous les tests Elecsys® d’IS.
300 µl de sang total bien
mélangé (ou calibrateur
ou contrôle)
Tubes à micro-
centrifugation
de 2,0 ml
300 µl de
réactif de prétraitement
pour échantillons d’IS
Mélanger au vortex,
puis centrifuger 4 min
à 10 000 G à TA
Transférer dans un nouveau
tube le surnageant
1 2
Ciclosporine dans
l'échantillon prétraité
Ciclosporine dans
l'échantillon
prétraité
Anticorps biotinylé
spécifiquement
dirigé contre la
ciclosporine
9 min 9 min
+
+
Microparticule
de streptavidine
Détection
Ru
Ru
Ru
Ru
Ru
Ru
Ru
Principe du test: immunodosage par compétition

Technologie Elecsys
ECL (Electrochimiluminescence) est la technologie de Roche pour l’immunodosage. Sur la base de cette technologie et en
association avec des tests d’immunodosage bien conçus, spécifiques et sensibles, Elecsys fournit des résultats fiables. Le
développement des tests d’immunodosage par ECL repose sur l’utilisation d’un complexe de ruthénium et de tripropylamine
(TPA). La réaction de chimiluminescence permettant la détection du complexe de réaction est initiée en appliquant un voltage
à la solution échantillon, de sorte à obtenir une réaction contrôlée avec précision. La technologie ECL s’adapte à de nombreux
principes d’immunodosage tout en offrant une performance supérieure.
1re incubation (9 minutes)
20 µl de l’échantillon prétraité est incubé avec un anticorps biotinylé spécifique de dirigé contre la ciclosporine et un dérivé de
ciclosporine fixé à un complexe de ruthénium. Selon la concentration de la substance recherchée dans l’échantillon et la formation
des complexes immunitaires respectifs, le site de liaison de l’anticorps marqué est occupé en partie par la substance recherchée et
en partie par l’haptène ruhténylé.
2e incubation (9 minutes)
Après l’ajout de microparticules enrobées de streptavidine, le complexe entier se lie à la phase solide par l’interaction de la biotine
et de la streptavidine.
Mesure quantitative
Le mélange de réaction est aspiré dans la chambre de dosage, où les microparticules sont attirées magnétiquement à la surface
de l’électrode. Les substances non fixées sont alors évacuées. L’application d’un voltage à l’électrode induit alors une émission
chimiluminescente qui est mesurée à l’aide d’un photomultiplicateur.
Caractéristiques du test Elecsys® Cyclosporine
Durée du test 18 min
Principe du test Test par compétition
Traçabilité Test standardisé par rapport aux standards de référence traçables
pour les produits de référence pour la ciclosporine par poids
Echantillons utilisés
Sang total EDTA
Volume d’échantillon 300 µl
LoB, LoD, LoQ* 20 ng/ml, 30 ng/ml, 50 ng/ml
Plage de mesure 30 à 2000 ng/ml
Précision intermédiaire (données représentatives) Analyseur cobas e 411: 4,2 à 9,2 %
Modules cobas e 601/e 602: 3,1 à 6,4 %
Plus faible conc. mesurée: 63,3 ng/ml
Informations pour commandes
Elecsys® Cyclosporine 100 tests par rackpack 05889014 190
Elecsys® Cyclosporine CalSet 3 x 1 ml chaque CalSet pour ciclosporine
niveaux 1 et 2
05889022 190
PreciControl ISDs 1 x 3 ml chaque PreciControl ISD
1, 2 et 3
05889081 190
Prétraitement pour échantillons d’IS 1 x 30 ml (= 100 utilisations) 05889073 190
* LoB = Limit of Blank (limite du blanc); LoD = Limit of Detection (limite de détection); LoQ = Limit of Quantitation (limite de quantification) (20 % d’erreur totale)
COBAS, COBAS E, LIFE NEEDS ANSWERS et ELECSYS sont des marques de Roche.
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