Cyclosporine - Roche Diagnostics (Schweiz)
publicité
Elecsys® Cyclosporine Test par électrochimiluminescence (ECLIA) pour le dosage in vitro de la Ciclosporine dans le sang humain total Indication Le test Elecsys® Cyclosporine est utilisé comme aide dans le suivi des patients sous ciclosporine à la suite d’une greffe du cœur, du foie, du rein, du poumon ou de moelle osseuse. Les patients greffés reçoivent des médicaments immunosuppresseurs (IS) tels que la ciclosporine pour éviter un rejet du greffon par le système immunitaire. Les tests d’IS sont utilisés pour vérifier la concentration du médicament dans le sang du patient et ajuster la posologie au besoin de sorte à assurer un traitement efficace et bien toléré. Etant donné que les IS ont une marge thérapeutique étroite: la dose doit être suffisamment élevée pour empêcher un rejet du greffon, mais en même temps assez faible pour éviter une toxicité du médicament et une survenue d’infections opportunistes. Prétraitement manuel de l’échantillon Le test Elecsys® Cyclosporine est dosé sur des échantillons de sang humain total. Vu que la ciclosporine est largement lié aux globules rouges et aux protéines, un prétraitement manuel greffés est nécessaire pour libérer les substances à analyser des protéines. Le réactif de prétraitement est utilisé de façon universelle pour tous les tests Elecsys® d’IS. 1 300 µl de sang total bien mélangé (ou calibrateur ou contrôle) 2 300 µl de réactif de prétraitement pour échantillons d’IS Tubes à microcentrifugation de 2,0 ml Mélanger au vortex, puis centrifuger 4 min à 10 000 G à TA Transférer dans un nouveau tube le surnageant Principe du test: immunodosage par compétition Ciclosporine dans l'échantillon prétraité Ru + Ru Ru Microparticule de streptavidine Ru 9 min + Ru 9 min Détection Ciclosporine dans l'échantillon prétraité Anticorps biotinylé spécifiquement dirigé contre la ciclosporine Ru Ru 1re incubation (9 minutes) 20 µl de l’échantillon prétraité est incubé avec un anticorps biotinylé spécifique de dirigé contre la ciclosporine et un dérivé de ciclosporine fixé à un complexe de ruthénium. Selon la concentration de la substance recherchée dans l’échantillon et la formation des complexes immunitaires respectifs, le site de liaison de l’anticorps marqué est occupé en partie par la substance recherchée et en partie par l’haptène ruhténylé. 2e incubation (9 minutes) Après l’ajout de microparticules enrobées de streptavidine, le complexe entier se lie à la phase solide par l’interaction de la biotine et de la streptavidine. Mesure quantitative Le mélange de réaction est aspiré dans la chambre de dosage, où les microparticules sont attirées magnétiquement à la surface de l’électrode. Les substances non fixées sont alors évacuées. L’application d’un voltage à l’électrode induit alors une émission chimiluminescente qui est mesurée à l’aide d’un photomultiplicateur. Technologie Elecsys ECL (Electrochimiluminescence) est la technologie de Roche pour l’immunodosage. Sur la base de cette technologie et en association avec des tests d’immunodosage bien conçus, spécifiques et sensibles, Elecsys fournit des résultats fiables. Le développement des tests d’immunodosage par ECL repose sur l’utilisation d’un complexe de ruthénium et de tripropylamine (TPA). La réaction de chimiluminescence permettant la détection du complexe de réaction est initiée en appliquant un voltage à la solution échantillon, de sorte à obtenir une réaction contrôlée avec précision. La technologie ECL s’adapte à de nombreux principes d’immunodosage tout en offrant une performance supérieure. Caractéristiques du test Elecsys® Cyclosporine Durée du test Principe du test Traçabilité Echantillons utilisés Volume d’échantillon LoB, LoD, LoQ* Plage de mesure Précision intermédiaire (données représentatives) Informations pour commandes Elecsys® Cyclosporine Elecsys® Cyclosporine CalSet 18 min Test par compétition Test standardisé par rapport aux standards de référence traçables pour les produits de référence pour la ciclosporine par poids Sang total EDTA 300 μl 20 ng/ml, 30 ng/ml, 50 ng/ml 30 à 2000 ng/ml Analyseur cobas e 411: 4,2 à 9,2 % Modules cobas e 601/e 602: 3,1 à 6,4 % Plus faible conc. mesurée: 63,3 ng/ml 100 tests par rackpack 3 x 1 ml chaque CalSet pour ciclosporine niveaux 1 et 2 05889014 190 05889022 190 PreciControl ISDs 1 x 3 ml chaque PreciControl ISD 1, 2 et 3 05889081 190 Prétraitement pour échantillons d’IS 1 x 30 ml (= 100 utilisations) 05889073 190 * LoB = Limit of Blank (limite du blanc); LoD = Limit of Detection (limite de détection); LoQ = Limit of Quantitation (limite de quantification) (20 % d’erreur totale) COBAS, COBAS E, LIFE NEEDS ANSWERS et ELECSYS sont des marques de Roche. ©2013 Roche Roche Diagnostics (Suisse) SA Industriestrasse 7 CH-6343 Rotkreuz Suisse www.roche-diagnostics.ch
