Guide des services Laboratoire de santé publique du Québec __________________________________________________________________________ Recherche du virus Ebola par détection d’acides nucléiques Révisé le 2016-07-22 Indication clinique Maladie à virus Ebola (MVE) suspectée. Consultez le document Maladie à virus Ebola (MVE) : guide pratique pour les demandes d’analyse pour des patients chez qui une MVE est suspectée (version 4.0) pour une description de l’indication clinique ainsi que pour la marche à suivre pour communiquer un cas probable. https://www.inspq.qc.ca/sites/default/files/lspq/guide_pratique_laboratoire_ebola_v5.pdf Spécimens - Deux (2) tubes de sang total-EDTA (bouchon lavande) - Un (1) tube à gel sans anticoagulant (tube« jaune » ou « doré », ou SST) Un minimum de 1,0 ml de chaque d’échantillon est requis pour l’analyse. Note importante: ne pas ouvrir ni centrifuger les échantillons. Requête d’analyse - Requête du LSPQ (FO-LSPQ-221) dûment complétée : inscrire « Virus Ebola » dans la section « AGENT ÉTIOLOGIQUE PRÉSUMÉ OU RECHERCHÉ »; cocher l’option « détection d’acides nucléiques - PCR» dans la section « ANALYSE(S) DEMANDÉE(S) »; veuillez fournir les symptômes et l'historique de voyage du patient si indiqué dans la section « AUTRES DONNÉES PERTINENTES ». Manipulation, conservation et expédition des spécimens Les échantillons doivent être conservés et expédiés réfrigérés. L'envoi d'échantillons prélevés chez des patients cas suspect d'une MVE requiert un Plan d'intervention d'Urgence (PIU) coordonné par le LSPQ. La procédure est décrite dans le document https://www.inspq.qc.ca/sites/default/files/lspq/guide_pratique_laboratoire_ebola_v5.pdf Page 1 sur 2 Méthodes utilisées et interprétation des résultats L’épreuve de recherche du virus Ebola par détection d’acides nucléiques est composée de deux réactions de RT-PCR avec détection en temps réel. Les deux réactions sont réalisées en parallèle, la première ciblant le gène de la polymérase (L) et la deuxième ciblant le gène NP (nucléoprotéine) de la souche Zaïre du virus Ebola. La réaction ciblant le gène L contient une deuxième sonde permettant la détection de la souche Guinée du virus Ebola. La réaction ciblant le gène NP sera utilisée pour confirmer le résultat obtenu pour le gène L. Cette épreuve est basée sur une procédure développée par le Laboratoire National de Microbiologie (LNM). Selon l’indication clinique et l’historique de voyage du patient, une épreuve de détection du Plasmodium pourrait être effectuée afin d’établir un diagnostic différentiel. Cette épreuve est réalisée avec la trousse de PCR en temps réel artus ® Malaria RG PCR de QIAGEN. Cette trousse permet la détection des acides nucléiques de 4 espèces de Plasmodium infectantes chez l’homme : Plasmodium falciparum, P. vivax, P. ovale et P. malariae. La trousse ne permet pas la différenciation des espèces. Dans tous les cas, les résultats des épreuves de détection du virus Ebola et du Plasmodium doivent être interprétés à la lumière des symptômes observés chez le malade et des données épidémiologiques. Des échantillons seront également soumis, sans délai, au LNM pour confirmation. Temps réponse Au LSPQ: 4h après la réception au laboratoire. Au LNM: de 24 à 48 h. Commentaires : La maladie à virus Ebola est une maladie à déclaration obligatoire (MADO) à surveillance extrême. La malaria est une maladie à déclaration obligatoire (MADO) par les laboratoires. De l’information sur les mesures de prévention et de contrôle des MVE pour les hôpitaux (avis scientifique du Comité sur les infections nosocomiales du Québec) est disponible sur le site de l’INSPQ : http://www.inspq.qc.ca/pdf/publications/1925_Ebola_Prevention_Controle_Decembre2014.pdf Personnes ressources : Pour des renseignements sur les analyses offertes par le LSPQ, communiquer avec le personnel technique du secteur Biologie moléculaire : (514) 457-2070, poste 2278. Responsable de l’analyse : Christine Martineau (Ebola), poste 2227, Karine Thivierge (Malaria), poste ou Hugues Charest, poste 2239. Pour initier une demande d'investigation en laboratoire, un PIU, ou pour obtenir de façon urgente des renseignements à l'égard des prélèvements, du transport, des analyses et des délais; communiquer avec le LSPQ (514) 457-2070 et composez le zéro (0) pour parler à la réceptionniste ou au gardien de sécurité. Demander de communiquer avec la personne de garde, EN MENTIONNANT QUE L' OBJET DE LA DEMANDE CONCERNE L'EBOLA. Page 2 sur 2