Development of impedancemetric and biochemical methods for

Development of impedancemetric and biochemical
methods for detecting low bacterial contaminations in
complex liquid media
Sylvain Rouillard
To cite this version:
Sylvain Rouillard. Development of impedancemetric and biochemical methods for detecting low
bacterial contaminations in complex liquid media. Life Sciences [q-bio]. INAPG (AgroParis-
Tech), 2004. English. <NNT : 2004INAP0030>.<pastel-00002276>
HAL Id: pastel-00002276
https://pastel.archives-ouvertes.fr/pastel-00002276
Submitted on 22 Mar 2007
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INSTITUT NATIONAL AGRONOMIQUE PARIS-GRIGNON
Ecole Doctorale ABIES
THÈSE
pour obtenir le grade de
Docteur de l’Institut National Agronomique Paris-Grignon
Discipline : Microbiologie Appliquée
présentée et soutenue publiquement par
Sylvain ROUILLARD
le 17 décembre 2004
Développement de méthodes impédancemétriques et
biochimiques pour la détection rapide d’une faible
contamination bactérienne en milieu liquide complexe
Development of impedancemetric and biochemical methods
for detecting low bacterial contaminations in complex liquid
media
Directeur de thèse
Francis DUCHIRON
Codirecteur de thèse
Christine MIELCAREK
Jury
M. Jean-Claude Meunier Président
Mme Marie-Bénédicte Romond Rapporteur
Mme Nelly Cochet Rapporteur
M. Francis Duchiron Directeur de thèse
Mme Christine Mielcarek Examinateur
© UMLV

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Remerciements
Je tiens en premier lieu à remercier chacun des membres du Jury qui ont accepté de
juger les travaux effectués au cours de ma thèse.
Je remercie plus particulièrement Christine Mielcarek, pour son aide et son soutien
tout au long de ces quatre années, ainsi que M. Jean-Claude Meunier, sans qui rien de tout
cela n’aurait été possible.
J’ai également une pensée pour toutes les personnes qui ont guidé mes pas jusqu’à cet
aboutissement, par leurs conseils ou leurs encouragements, dans un passé récent comme
lointain. Je remercie toutes ces personnes, et en particulier M. Eric Pinelli.
Je remercie les partenaires du projet Microqual, pour leur coopération, et les échanges
fructueux, aussi bien sur le plan scientifique qu’humain, que nous avons pu avoir au cours de
ces travaux.
Je remercie enfin tout le personnel de l’EBI, dont chacun des membres a participé,
d’une manière ou d’une autre, aux travaux réalisés au cours de cette thèse. Je remercie tout
spécialement les courageux qui ont assisté à mes présentations, et encore plus les aventureux
qui s’y sont intéressé.

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Résumé
Dans un contexte général où les consommateurs se sentent toujours plus concernés par
les risques que font peser sur leur santé les biens de consommations, les industriels se doivent
d’assurer l’innocuité de leurs produits. Le risque microbiologique en particulier, affecte de
nombreux secteurs, dont l’agro-industrie, et il devient donc stratégique de disposer de
techniques permettant de l’évaluer de façon sensible et rapide. Le développement de telles
techniques est l’objectif du projet européen Microqual, dans lequel s’inscrivent les travaux
présentés au cours de cette thèse. Ceux-ci ont concerné la détection proprement dite, par le
biais du développement d’un nouveau prototype de suivi impédancemétrique de la croissance
bactérienne. Ils ont également porté sur une méthode originale de concentration, basée sur
l’utilisation de lectines immobilisées sur des micro-billes paramagnétiques, et ont permis de
mettre au point les outils nécessaires au futur développement de cette méthode.
Mots-clé : bactérie, détection, lectine, billes paramagnétiques, impédancemétrie

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Abstract
Consumers are more and more concerned by the risk put on their health by consumer
goods. In this context, industries have to certify the harmlessness of their product. Especially,
the microbiological risk is a particular threat in many sectors, including the food industries. It
is therefore strategic to master techniques that can assess this risk in an accurate and fast
manner. Developing such techniques was the aim of the Microqual European project, which
the researches presented here contributed to. They more specifically addressed the detection
issue, through the development of a new prototype device for the impedancemetric
measurement of the bacterial growth. They also dealt with an original concentration method,
based on the use of immobilized lectins on the surface of paramagnetic microbeads, and lead
to the setup of the necessary technical toolkit for the future development of this method.
Keywords : bacteria, detection, lectin, paramegntic beads, impedancemetry