TD3_BM_SVI_S6_2011 - Faculté des Sciences de Rabat

TD N°3:
MUTATIONS DE L’OPERON
LACTOSE & TRYPTOPHANE
Faculté des Sciences
Rabat
Laboratoire de Microbiologie
et Biologie Moléculaire
Filière SVI –S6
Module de Génétique et Biologie Moléculaire
Elément 2: Biologie Moléculaire

Exercice 1.
I- On possède deux souches de bactéries, E. coli Aet B. Les deux
souches sont mises à pousser sur milieu de culture en présence ou
en absence de lactose et leur capacité à synthétiser la β-
galactosidase et la perméase est étudiée , voir tableau 1.
Tableau1.
Absence de lactose Présence de lactose
Souche β-gal perm β-gal perm
A - + - +
B + - + -
C + - + +
D + - + +

L’ADN chromosomique de la souche A est soumis à une action
enzymatique. La région du système lac est isolée puis clonée au site
EcoRI du plasmide Pbr322 (figure 1).
Le plasmide recombinant est ensuite utilisé pour transformer les
bactéries de la souche B. La souche issue de cette transformation est
appelée C. Sa capacité à métaboliser le lactose est étudiée dans les
mêmes conditions que les souches A et B, voir tableau 1.

1- Quelle (s) différence (s) génétiques fondamentale (s) existe (ent) entre la
souche C et les souches A et B ?
Questions :

1/ Les différences génétiques qui existent entre les souches A et B
puis C sont:
-Les souches A et B sont haploïdes, la souche C est partiellement
diploïde.
-La souche C contient en plus de son chromosome principal un
matériel génétique extra-chromosomique=un plasmide.
2/Quel est le mode de synthèse de chacune des enzymes chez
les souches A, B et C ?
2/ -Pour la souche A, la β-gal possède un phénotype négatif, la
perméase un phénotype constitutif.
-Pour la souche B, la β-gal a un phénotype constitutif , la
perméase est négative.
-Pour la souche C, elle possède un phénotype constitutif pour la
β-gal et inductible pour la perméase.