l`interleukine 2 ( PDF

L’interleukine-2,
outil de communication des
lymphocytes T4 aux T8
Introduction
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Le système immunitaire est un ensemble d’organes (ganglions, thymus et rate) et
de cellules circulant dans le sang et dans les tissus.
Ces cellules sont les leucocytes : _ Lymphocytes B
_ Macrophages
_ Polynucléaires
_ Lymphocytes T4 et T8
Lymphocyte
Macrophage
Polynucléaire
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Rôle : défendre l’organisme contre les corps étrangers et les tumeurs en
communicant entre elles.
Communication: _ Par contact (directe)
_ Par l’intermédiaire de molécules solubles (indirecte)
Par exemple les interleukines permettent cette communication à distance.
On s’intéresse plus particulièrement à l’interleukine-2 et aux Lymphocytes T.
Représentation de la structure de l’IL-2
Questions
• Comment s’effectue la communication entre les cellules du
système immunitaire ?
• Comment communiquent plus particulièrement les
lymphocytes T4 et T8 ?
• Hypothèse : Les lymphocytes T4 et T8 communiquent grâce à
IL-2.
• Quels sont les effets de l’IL-2 sur les T8 (CTLL) ?
• Quelle cellule produit de l’IL-2 ?
Protocole
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On utilise des CTLL, lignée de lymphocytes T8, de souris.
On y ajoute de l’IL-2 recombinante dans des concentrations différentes.
On mesure la prolifération des T8 grâce au test MTT
Principe du test MTT
Protocole
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On utilise des 3A9, lignée de lymphocytes T4, de souris.
On les stimule avec des anticorps anti-CD3 et anti-CD4.
On récupère le surnageant et on le met sur les T8.
On regarde l’effet de ces différents surnageants sur la prolifération
Déroulement de l’expérience
Résultats
Cellules T8 + IL-2
Ajout de MTT
Apres 4h formation de cristaux
Dissolution des cristaux
Résultats
Prolifération en fonction de la
concentration en IL-2
Prolifération en fonction de la
concentration en IL-2
1,2
1,4
Absorbance a 620 nm
1
Absorbance à 620 nm
0,8
0,6
1,2
1
0,8
0,6
Maëva
0,4
Anaïs
0,2
0
0,4
0
20
40
60
Concentration en IL-2 (U/mL)
0,2
Aléas de l’expérience
0
-10
0
-0,2
10
20
30
40
50
60
Concentration en IL-2 (U/mL)
- Augmentation rapide de la prolifération en présence d’IL-2.
- On arrive a un seuil
- Légère diminution à forte concentration.
Résultats
Prolifération des T8
1
Prolifération des T8
1
0,8
0,9
Absorbance à 620 nm
0,8
Absorbance à 620 nm
0,6
0,4
0,7
0,6
0,5
Marine
0,4
Cyril
0,3
Déborah
0,2
0,2
0,1
0
Milieu
0
Milieu
H2O2
Surnageant
de CD4 non
stimulé
CD3
CD4
-0,2
- H202 (mort des cellules) pas de prolifération.
- Milieu et surnageant non stimulé résultats égaux
- Anti-CD3 et CD4 résultats quasi égaux et deux fois
plus importants que les précédents
H2O2
Surnageant
de CD4 non
stimulé
CD3
CD4
Variations entre les différents résultats
Interprétation
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IL-2 est un facteur de la prolifération des T8
A partir d’un certain seuil de concentration en IL-2 la prolifération reste constante car la
solution est saturée
A partir d’une concentration en IL-2 il y a peut-être une toxicité
La stimulation des T4 avec des anti-CD3 et anti-CD4 est à l’origine de la sécrétion d’une
molécule qui engendre la prolifération des T8
Cette molécule a les mêmes effets que l’IL-2
Il s’agit peut-être d’IL-2 …(voir le groupe ayant fait le test ELISA)
Limites des expériences
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Réalisées in vitro
Utilisation de cellules tumorales de souris ( qui prolifèrent seules )
Utilisation d’IL-2 produite par des bactéries génétiquement modifiées
Variabilité expérimentale (plus ou moins de cellules au début, dissolution
variable… )
Conclusion
• L’IL-2 augmente la prolifération des T8
• Les cellules T4 produisent probablement de l’IL-2 si elles sont stimulées
• Il est probable que les T4 et les T8 communiquent grâce à l’IL-2
Les T4 agissent sur la prolifération des T8 en produisant probablement des IL-2