Biologie du Lymphome de Hodgkin

Biologie du lymphome de
Hodgkin
Paris, le 26 septembre 2014
Un lymphome singulier…
EBER
Un phénotype particulier
•
•
•
•
CD30+
CD15+ (70-85%)
CD20± (20%)
CD79±, PAX5±,
MUM1/IRF4±
• CD45R• CD43• EMA-
Un microenvironnement prédominant…
CD4/CD45RO
CD68
FOXP3
CD117
CD20
CD8
Classification (OMS 2008)
• LH nodulaire à prédominance lymphocytaire
(para-granulome de Poppema et Lennert)
• LH classique
LH nodulaire à prédominance lymphocytaire
•
•
•
•
•
•
•
Nodulaire ou diffus
Cellules LP/pop corn
Lymphocytes, histiocytes
CD20, CD79, CD45
EMA (50%)
CD30-CD15Rosettes CD3+CD57+
LH classique
•
•
•
•
LH riche en lymphocytes (nodulaire ou diffus)
LH scléro-nodulaire
LH cellularité mixte
LH déplétion lymphocytaire
EBV
• 40 à 60% LH
• Latence de type 2 (LMP1, LMP2, EBER1,
EBER2 et EBNA1)
– LMP1 (CD40)
– LMP2 (BCR)
Bcl-2 et Mcl-1
CCL20 (MIP-3)
• Réponse Th1 anti-EBV
• CCL3, CCL5 (RANTES), CCL9 (MIG), CCL10
(IP-10)
Origine
• Dérive de cellules B du centre germinatif
• Réarrangement clonal ou nul (absence Ig dans 25%)
• « Perte » du programme B
– Méthylation (OCT2, PU.1, BOB1)
– Inhibition E2A par NOTCH1
– Expression PcG (BMI-1, EZH2)
• Expression aberrante de gènes « non B »
–
–
–
–
–
–
T (CD3, NOTCH1, GATA3)
T cytotoxique (GzB, perforine)
DC (fascine, CCL17)
NK (ID2: inhibe E2A et PAX5)
Myéloïde (CSFR1)
Polynucléaire (CD15)
CD15
HRS : une cellule pré-apoptotique
HRS
cFLIP
XIAP
(inhibiteur caspase 3)
TFH
HLA II
CD28
Activation
• Activation autocrine et paracrine
• Récepteurs membranaires
–
–
–
–
IL (IL2R, IL3R, IL6R, IL7R, IL13R)
TNFR (CD30, CD40, TNRS11A, TNFRS1A)
TKR (CMET, TRKA, DDR2)
LMP1 (CD40 like)
CD30
Bio-molécules
• Cytokines et chimiokines
• HRS
–
–
–
–
–
CCL5 (RANTES)
CCL17 (TARC)
CCL22
IL10, TGF-
IL13, IL6, IL7
• Micro-environnement
– IL8
– IL12
– IL10, TGF-
Steidl et al JCO 2011
neutrophils
17q21
2p13
19q13
Kuppers et al JCI 2012
Mutation IKB (L428)
Emmerich et al Blood 1999
Emmerich J Pathol 2003
PTPN1 mutations
(20%)
PDL-1
9p24
JAK2
mir135a
STAT3 (IL21)
STAT5
STAT6 (IL13)
Kuppers et al JCI 2012
Steidl et al JCO 2011
LyT CD4+ effecteurs mémoires
• Majorité LyT CD4+CD3+
TCR+CD45RO+CD69+CD25+CD26• Treg CD4+CD25+FOXP3+CD26-
CD4
Marshall et al. Blood. 2004
Echappement immunitaire
•
•
•
•
•
Recrutement Treg (CCL5, CCL17, CCL22, IL7)
IL-10, TGF- (HRS, Treg, TAM2)
PGE2
Expression (HRS) PDL, Galectine 1, FasL, HLA-G
Perte expression HLA classe I et II
• Galectine 1 (lactose binding lectine)
– Liaison à  galactoside (inhibe l’activité phosphatase de CD45)
– corrélé à infiltrat pauvre en LyT CD8+
– in vitro, sécrétion cytokines Th2 et expansion de Treg
• PDL1 (CD274)/PDL2 (CD273)
– liaison à PD1 (CTL)
– épuisement (« exhaustion »)
• CD95L (FasL)
– apoptose CTL
Wherry, Nat Immunol.. 2011
CMH
• Translocation CIITA
– 15% LH
– perte HLA (classe II)
– expression PDL1 et 2
Steidl et al Nature 2011
HLA G
Kuppers et al JCI 2012
Facteurs pronostiques biologiques
‘‘Hodgkin lymphoma prognostic factors’’ PubMed : 1885 articles
– Marqueurs de surface
– Micro-environnement
– cellules
– cytokines
– Biologie de la tumeur
– EBV
Expression CD20 HRS
• Expression variable : 10 à 30% LH
Rassidakis G Z et al. JCO 2002;20:1278-1287
Tzankov A et al. Clin Cancer Res 2003;9:1381-1386
Expression CD20 HRS
• Phase II: R-ABVD
Younes A et al. Blood 2012;119:4123-4128
Lymphocytes B CD20 +
du micro-environnement
Overall
Survival
Greaves P et al. JCO 2013;31:256-262
‘‘B-cells signature ’’
Chetaille B et al. Blood 2009;113:2765-3775
Macrophages du micro-environnement
Phase III ABVD vs. Stanford V
Steidl C et al. N Engl J Med. 2010 Mar 11;362(10):875-85
Tan K L et al. Blood 2012;120:3280-3287
EBV négatif
EBV positif
Tan K L et al. Blood 2012;120:3280-3287
Macrophages du micro-environnement
Early FDG-PET Early FDG-PET
positive
negative
n (%)
n (%)
CD68
expression
n
Low ≤ 25%
48
13 (27,1)
35 (72,9)
High >25%
15
10 (66,7)
5 (33,3)
Total
63
23 (36,5)
40 (63,5)
p
0,0061
Touati et al. ASH Annual Meeting Abstracts 2011 118:1558
Infiltrat ‘‘T’’
Chen K et al. Annu Rev Immunol. 2013; 31: 605–633
Lymphocytes T
• Polarisation Th1/Th2
–
–
–
–
Chemokines
Marqueurs d’activation
Production de cytokines
Facteurs de transcription
→ Profil Th1
Greaves P et al. Blood 2013;122:2856-2863
Inhibition de la réponse immune?
PD-L1
Greaves P , Gribben Blood 2013;121:734-744
PD-L1 – PD1
Green M R et al. Blood 2010;116:3268-3277
PDL1 – PD1
Greaves P et al. Blood 2013;122:2856-2863
Treg (FOXP3+)
high
low
Greaves P et al. JCO 2013;31:256-262
Treg (FOXP3+)/CD45RO
Rechute (oui=1 ; non=0)
100
FOXP3-CD45RO HIGH
80
FOXP3 FAIBLE OU
CD45RO FAIBLE
60
FOX
40
FOXP3-CD45RO LOW
20
0
0
20
40
60
Time
MOIS
80
100
120
140
N=52
Galectine
Kamper P et al. Blood 2011;117:6638-6649
Facteurs solubles : cytokines
Etude prospective LYSA : 519 patients
TNFA, TNF-R1, TNF-R2, IL-10, IL1RA, IL-6, CD30s
CD30s, IL-6, IL-1RA
IPS 0-2
IPS 3+
Casasnovas O et al. JCO 2007;25:1732
Facteurs solubles : cytokines
Mayo Clinic : 140 patients
Système multiplex (30 cytokines) : IL-6, IL-2R
Marri et al. Clin Cancer Res 2013;19:6812-6819
Biologie de la tumeur : GEP
• Formalin-Fixed Paraffin-Embedded Biopsies (nanostring technology)
Scott DW et al. JCO 2013;31:692-700
EBV
Diepstra A et al. JCO 2009;27:3815-3821
Conclusion
• Standardisation des données biologiques (sur tissus fixés)
• Confusion bio-marqueurs pronostiques et physiopathologiques
• Définition de groupes ‘‘biologiques’’ de patients
• Guide aux thérapies ciblées