Ils agissent, ils témoignent… - L`Association Française de l`Ataxie de

Trois ans de recherche
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Modulation du stress oxydatif dans l‟AF par les sirtuines - Alexandro Vaquero........ 3
Trois nouvelles équipes de recherche subventionnées – Juliette Dieusaert ................ 4
Approche de thérapie génique dans l‟Ataxie de Friedreich – Morgane Perdomini ...... 5
Etude du sécrétome de cellules neurales de patients AF – Dr. Javier Diaz-Nido ...... 7
La recherche a de plus en plus besoin de nous – Robert Breniaux ................................... 8
Des modèles biologiques complémentaires – JM Camadro et H. Tricoire.....................10
Suite de nos travaux sur les poissons zèbres – Nadia Soussi-Yanicostas .................... 11
1er essai ciblant le défaut génétique de l‟Ataxie de Friedreich - Fara ..........................14
Essai avec l‟EPI-A0001 aux USA – Juliette Dieusaert .......................................................15
Pr. Alexis Brice nommé directeur général de l‟ICM – Juliette Dieusaert ....................15
Travaux à partir de cellules induites à la pluripotence – Laetitia Aubry ......................16
Les microARNs : des régulateurs pleins d‟avenir – Pascal Nguyen ..................................17
Les protéines TALEs induisant l‟expression de frataxine – Pr. Tremblay ....................19
Les ligands des répétitions de trinucléotides de la frataxine – JL Mergny ................21
Stress Oxydatif et métabolisme respiratoire – Dominika Sliwa.................................... 24
L‟essai pioglitazone et le monde du médicament – Juliette Dieusaert ......................... 26
1er forum sur la recherche dans les maladies rares – Juliette Dieusaert ................... 29
Congrès Eurobiomed 2011 – Claudie Baleydier et Christiane Breniaux......................... 32
Nos travaux – Nadia Soussi-Yanicostas ................................................................................. 35
Nos travaux sur les souris Harlequin – Pierre Rustin et Paule Bénit............................. 36
Nos travaux – Marie-Anne Colle ............................................................................................... 38
Les travaux soutenus en 2010-2011 – Marianne Kerdougli ............................................... 40
Participer à la recherche dans l‟Ataxie de Friedreich –Fabien Lesne ...........................41
Cinquième colloque Meetochondrial – Christiane Breniaux et Marie-Claire Joguet . 43
Nouvelle ère de la recherche fondamentale dans l‟AF –Bernard Verne ....................... 44
La recherche fondamentale et clinique – Compte-rendu de Robert Breniaux ............ 45
Comprendre la maladie et la recherche – Compte-rendu de R. Breniaux & JC Dufeu50
Avenir et à venir – Pierre Rustin & Patrick Aubourg .......................................................... 53
Rôle de la frataxine dans la réponse au stress – Ilaria Guccini ...................................... 56
Les ligands des répétitions de trinucléotides de la Frataxine – Jean-Louis Mergny58
Recherche de nouvelles molécules thérapeutiques - Guy Lenaers ................................. 59
Modélisation de l'AF chez le poisson zèbre – Nadia Soussi-Yanicostas ...................... 60
Travaux de recherche soutenus par l'AFAF – J. Dieusaert & M. Kerdougli ............... 63
Mitochondrie & métabolisme de la vitamine B6 – Dominika Sliwa .................................. 64
Le défaut de réponse au stress oxydant dans l'AF – Aurélien Bayot ........................... 65
Les cellules souches pluripotentes induites- Marie Wattenhofer-Donzé ................... 67
La fonction auditive dans l'AF – Fabrice Giraudet ............................................................. 69
Une nouvelle molécule bientôt à l‟étude aux USA – RepliGen Corporation .................. 70
De nouveaux espoirs avec les inhibiteurs HDAc – Babel Family ......................................71
Le congrès EuroAtaxia – Marianne Kerdougli, Madeleine Schmeder ............................ 73
Mnesis : la situation en avril 2013 – Juliette Dieusaert ................................................... 75
Production de frataxine, un cercle vicieux à freiner ! – Alexandra Henrion-Caude . 78
Etude phase 2B avec l‟EPI sur les fonctions visuelles – Babelfamily.org ..................... 80
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Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 122 - janvier 2011 - www.afaf.asso.fr
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Traitement de la cardiomyopathie de l‟ataxie de Friedreich par thérapie génique – Pr.
Aubourg ......................................................................................................................................................81
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Exposé des chercheurs et médecins à Nouan – Christiane Breniaux ............................ 85
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La lutte contre l‟AF désormais sur un nouveau front – Pierre Rustin ............................91
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Le congrès SPATAX – Claudie Baleydier ................................................................................ 92
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Les anomalies du réseau d‟actine dans l‟AF – Aurélien Bayot .......................................... 92
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Deux essais avec l‟Interféron gamma – FARA et Ataxie UK ........................................... 94
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EFACTS : de nouveaux outils pour l‟Ataxie de Friedreich – Myriam Raï ..................... 95
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Stage à l‟école d‟ADN – Annie Reymond ................................................................................. 97
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Congrès Eurordis à Dubrovnick – Claudie Baleydier ........................................................... 98
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Nos vœux pour 2014 – Hélène Puccio, Patrick Aubourg, Françoise Pousset ............... 99
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Les recherches subventionnées début 2014 – Juliette Dieusaert .............................. 100
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Les protéines TALE : nos premiers résultats au Québec – Pr. Jacques Tremblay . 103
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Les travaux au CEA de Grenoble – Sandrine Ollagnier de Choudens .......................... 104
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Les travaux de l‟équipe du Pr. Pandolfo à Bruxelles – Amélie Hu ................................. 106
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Un essai de phase 1 avec VP_20629 – Ron Bartek ............................................................ 107
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Essais à Londres avec l‟HDCA – Pr. Festeintein ................................................................. 108
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La vitamine B3 : apport potentiel dans l‟AF – Pr. Festeintein ........................................ 109
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Généthon bioprod – AFM ........................................................................................................... 109
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Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 122 - janvier 2011 - www.afaf.asso.fr
Modulation du stress oxydatif dans l’AF par les
sirtuines - Alexandro Vaquero
Barcelone – septembre 2012
L‟Ataxie de Friedreich (FRDA) est une maladie génétique produite par l‟expression
défectueuse du gène FXN. Ce gène code pour une protéine appelée frataxine.
Même si elle n'est pas bien comprise, la fonction de la frataxine semble être liée à
la régulation du métabolisme cellulaire dans les mitochondries, le compartiment
cellulaire où l'énergie nécessaire à la vie cellulaire est produite. Dans les
organismes qui respirent l'oxygène comme nous, ces procédés nécessitent des
molécules d'oxygène. Cependant, en raison de la forte réactivité de l'oxygène dans
la cellule, son rôle doit être soigneusement contrôlé. En cas de perte frataxine, ces
mécanismes semblent être modifiés et l'oxygène réactif s'accumule dans les
cellules tel un poison, créant une situation que nous définissons comme le stress
oxydatif.
Parmi les organes les plus sensibles au stress oxydatif, on trouve le système
nerveux et le cœur. Les patients FRDA rencontrent deux problèmes majeurs en
raison de niveaux élevés de stress oxydatif : l‟hypertrophie cardiaque et la
dégénérescence du système nerveux.
Parmi la famille des facteurs qui semblent participer à la régulation de la
réponse au stress oxydatif, se trouvent les sirtuines. Nous proposons la
modulation de l'activité des sirtuines qui pourrait être un moyen efficace pour
contrer les effets négatifs du stress oxydatif dans FRDA, et donc retarder ou
même empêcher le développement de la pathologie.
Nos résultats préliminaires montrent une relation fonctionnelle entre les
sirtuines et la frataxine. Dans ce projet, nous cherchons à comprendre cette
relation fonctionnelle et à vérifier si la modulation de l'activité des sirtuines
pourrait protéger contre la dégénérescence associée au FRDA.
Nous prévoyons que les résultats obtenus seront importants non seulement pour le
traitement possible de patients FRDA, mais aussi pour comprendre le
développement
d'autres
stress
oxydatifs
associés
à
des
maladies
neurodégénératives.
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Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 122 - janvier 2011 - www.afaf.asso.fr
Trois nouvelles équipes de recherche subventionnées –
Juliette Dieusaert
septembre 2012
Suite à l‟Appel d‟Offre d‟avril 2012, nous avons reçu 4 dossiers, 2 français et 2
espagnols. Les membres du conseil scientifique ont donc étudié ces dossiers et nous
ont donné leurs avis lors de la réunion du 7 juillet 2012, réunion commune avec CSC
et ASL à l‟hôpital Robert Debré. 3 équipes ont été sélectionnées, le 4ème projet
étant trop éloigné du Friedreich.
En fonction de ces avis et des finances, le CA de l‟AFAF a donc décidé d‟attribuer
une subvention à ces 3 équipes. 60.000 € étaient à attribuer (en 2011, 2 fois
100.000 € ont été attribués).
1 - Equipe du Dr. Hélène Puccio (IGBMC) :
« Développement d’une approche de thérapie génique pour l’ataxie de Friedreich
utilisant les virus adéno-associés dans les modèles murins ». Cf. article de
Morgane Perdomini dans ce numéro.
Les scientifiques comme les adhérents AFAF connaissent bien cette équipe si
engagée dans la recherche Friedreich !
Somme demandée et attribuée : 25.000 euros
2 - Equipe du Pr. Diaz Nido (Madrid) :
« Etude du sécrétome de cellules neurales de patients afin d'identifier
nouvelles cibles thérapeutiques et biomarqueurs de l’AF ». Voir plus loin article
du Dr Nido.
Le Dr Diaz Nido est connu depuis de nombreuses années pour ses recherches dans
le Friedreich.
Somme demandée et attribuée : 20.000 euros
3 - Dr. Alejandro Vaquero (Barcelone)
« Lien entre les
sirtuines et la frataxine pour lutter contre le stress
oxydatif ». Résumé dans le prochain ESPOIR 130.
Les experts pensent que les « sirtuines » suscitent actuellement beaucoup de
recherches ; nouvelle piste dans l‟AF. A suivre.
Somme demandée : 50 000 euros... attribuée 15.000 euros
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Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 122 - janvier 2011 - www.afaf.asso.fr
Approche de thérapie génique dans l’Ataxie de
Friedreich – Morgane Perdomini
Equipe d’Hélène Puccio - IGBMC, septembre 2012
L‟ataxie
de
Friedreich (AF)
est due à une
répétition
du
triplet GAA dans
le gène codant
pour la frataxine.
Ceci
a
pour
conséquence une
diminution de la
production de la
frataxine.
Par des techniques de génie génétique,
nous remplaçons les gènes du virus par
le gène d‟intérêt, celui de la frataxine
humaine dans notre cas. Les virus
modifiés
sont
appelés
vecteurs
recombinants et permettent donc de
transporter le gène de remplacement
dans les cellules mais ils ne peuvent
plus se multiplier. Il existe différents
types de virus.
Morgane Perdomini
Nous avons choisi de tester une
approche de thérapie génique afin
de restaurer le taux de frataxine
dans les différents tissus atteints
chez les
patients de l’AF, les
neurones sensitifs des ganglions
dorso rachidiens, le cervelet, la
moelle épinière, le tronc cérébral,
les cardiomyocytes, les cellules β du
pancréas.
Le principe de la thérapie génique est
de remplacer le gène défectueux par
un gène sain grâce à l‟utilisation d‟un
virus modifié. En effet, les virus à
l‟état sauvage ont la capacité
d‟infecter
les
cellules
et
de
transporter leur matériel génétique
dans le noyau des cellules. Le virus
utilise ensuite la machinerie de la
cellule afin de produire ses propres
protéines et se multiplier.
Nous avons choisi d‟utiliser les virus
adéno-associés (AAV) qui présentent
plusieurs avantages. Les AAVs ont
déjà été utilisés dans des essais
cliniques
et
sont
faiblement
immunogènes. De plus, l‟ADN de ces
virus reste sous forme stable dans le
noyau des cellules, mais ne s‟intègre
pas directement dans le génome de la
cellule hôte, limitant les risques de
dérégulation d‟expression des gènes.
Les AAVs ont différents sérotypes et
infectent un type précis de cellules en
fonction du sérotype. Nous utilisons le
sérotype AAVrh10. En effet, l‟équipe
de notre collaborateur, le Pr Patrick
Aubourg, a pu montrer que ce
sérotype « infecte » les cellules
cardiaques, mais aussi les neurones
présents dans les ganglions dorso
rachidiens.
Pour évaluer l‟effet thérapeutique de
ce vecteur, nous utilisons le modèle
souris MCK développé dans le
laboratoire. Cette lignée de souris se
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Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 122 - janvier 2011 - www.afaf.asso.fr
caractérise
par
une
délétion
spécifique de la frataxine dans le
cœur et le muscle squelettique. Il a
précédemment été démontré que ces
souris
développent
une
cardiomyopathie
hypertrophique,
caractéristique de l‟AF et ont une
espérance de vie moyenne de 11
semaines.
Dans un premier temps, nous avons
injecté le vecteur en intraveineux
dans des souris pré-symptomatiques, à
3 semaines. La fonction cardiaque des
souris
est
évaluée
par
échocardiographie.
Toutes
les
mutantes MCK non traitées (n=10) ont
développé une dilatation progressive
du ventricule gauche associée à une
hypertrophie à partir de 6 semaines
qui s‟est conclue par leur mort à 65±10
jours. A l’inverse, aucune souris
mutante MCK traitée avec le
vecteur AAVrh10-hFXN n’a montré
de
signes
d’atteinte
cardiaque
jusqu’à 35 semaines (durée de
l’étude). De plus, toutes les souris
traitées étaient non différenciables
des souris sauvages (caractéristiques
cardiaques, poids, survie).
Nous avons également évalué la
correction des symptômes cardiaques
au niveau cellulaire. En particulier,
l‟expression de marqueurs spécifiques
d‟insuffisance cardiaque et de l‟AF
ainsi que l‟activité d‟enzymes Fe-S ont
montré une correction totale du
phénotype cardiaque. Nos résultats
démontrent
donc
qu'une
administration
pré-symptomatique
d'un vecteur AAVrh10 codant pour
la frataxine humaine
développement
cardiomyopathie dans
murin de l'AF.
prévient le
d'une
un modèle
Cependant, il nous faut évaluer la
fenêtre thérapeutique. Nous étudions
donc
actuellement
l‟effet
thérapeutique du vecteur dans des
souris post-symptomatiques, à sept
semaines d‟âge.
L’équipe d’Hélène Puccio au complet
Ensuite, nous aimerions étudier l‟effet
thérapeutique du vecteur dans un
modèle
souris
reproduisant
les
symptômes neurologies de l‟AF. Le
sérotype à utiliser ainsi que le type
d‟injection sont à déterminer.
Ce projet constitue ainsi une approche
thérapeutique innovante pour l‟ataxie
de Friedreich.
PS : nous sommes deux dans le
laboratoire à travailler à 100% sur ce
projet. La deuxième personne est
post-doctorant, il s'agit de Brahim
Belbellaa (sur ma droite sur la photo
d'équipe, avec des lunettes).
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Etude du sécrétome de cellules neurales de patients
AF – Dr. Javier Diaz-Nido
Centre de Biologie Moléculaire "Severo Ochoa" – Université de Madrid
août 2012
Objectif : identifier de nouveaux biomarqueurs
thérapeutiques dans l’Ataxie de Friedreich (AF).
et
de
nouvelles
cibles
avec la perspective de découvrir de
nouveaux biomarqueurs et de nouvelles
cibles thérapeutiques.
Dr. Javier Diaz-Nido et son équipe.
Le tissu nerveux est composé de deux
principaux types de cellules : les
neurones et les cellules gliales. Les
cellules gliales jouent un rôle
essentiel dans le soutien, la survie
et le bon fonctionnement des
neurones.
Les cellules gliales soutiennent les
neurones
par
une
variété
de
mécanismes, y compris la sécrétion de
protéines qui aident les neurones à
survivre et à bien fonctionner.
Dans
certaines
maladies
neurodégénératives, il a été constaté
que des altérations des cellules gliales
pouvaient
contribuer
au
dysfonctionnement et à la mort des
neurones. Notre projet vise à étudier
la contribution des cellules gliales à la
dégénérescence neuronale dans l‟AF,
Notre
hypothèse
est
que
la
dégénérescence des neurones dans
l‟AF ne provient pas seulement d'une
carence en frataxine dans les
neurones,
mais
aussi
du
dysfonctionnement
des
cellules
gliales
qui
sont
également
déficitaires en frataxine. Ainsi, nous
nous
proposons
d'étudier
les
changements moléculaires engendrés
par une carence en frataxine dans les
cellules gliales. En particulier, nous
allons étudier les changements dans
les protéines qui sont sécrétées par
les cellules gliales. En effet, les
changements dans la sécrétion de
protéines par les cellules gliales
pourraient
contribuer
à
la
neurodégénérescence dans l’ataxie
de Friedreich. Pour cette raison, nous
avons
l'intention
d‟étudier
les
éventuelles altérations des protéines
sécrétées par des cellules gliales qui
auront été rendues déficitaires en
frataxine.
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Cette recherche pourrait établir que
des
cellules
gliales
qui
sont
déficientes en frataxine sécrètent
moins de protéines neurotrophiques
(protectrices des neurones)
ou à
l‟inverse plus de protéines toxiques
pour les neurones. Dans un second
temps, ceci pourrait nous permettre
d'essayer d'augmenter la sécrétion de
protéines neurotrophiques ou de
neutraliser la sécrétion de protéines
neurotoxiques par les cellules gliales
pour diminuer la neurodégénérescence
dans l‟AF.
La recherche a de plus en plus besoin de nous –
Robert
Breniaux
septembre 2012
ou vaincre la maladie, élaboration d‟une
thérapie génique. Nous n‟avons jamais
autant progressé que pendant ces cinq
dernières années.
Robert Breniaux
Ou le mot du trésorier sur la baisse
des recettes…
La recherche progresse, certes pas
assez vite pour nous, et nous le
ressentons souvent douloureusement
dans notre vécu quotidien. Mais nos
chercheurs ont réussi à franchir de
nombreuses étapes malgré toutes les
difficultés rencontrées.
Ils ont maintenant une connaissance
approfondie de notre maladie et sont
de plus en plus nombreux dans le
monde à lancer de nouveaux projets :
essais de molécules pouvant ralentir
Le
monde
actuel
connaît
des
difficultés économiques inquiétantes
et nous devons préparer l‟avenir de
notre association, sans s‟alarmer, avec
suffisamment de vigilance et de
prévoyance. Les donateurs extérieurs
à notre association connaissent pour
certains des difficultés
et nous
constatons
que
nos
ressources
baissent depuis 2009.
En effet, en 2011, les recettes ont
baissé de 16% après avoir diminué de
12% en 2010. Les subventions et les
dons ne sont plus aussi importants que
lors des années précédentes. Nous
devons compter avant tout sur nousmêmes. De nombreux bénévoles parmi
vous renouvellent des actions qui
permettent de poursuivre
le
financement de la recherche avec
efficacité. Merci à eux !
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Mais nous devons veiller à maintenir ce
financement si nous voulons atteindre
notre
but
:
permettre
aux
laboratoires de recherche de plus en
plus nombreux de continuer leurs
travaux. Nous ne devons donc pas
relâcher
nos
efforts
dans
la
conjoncture actuelle.
Je pense aux fondateurs de notre
association comme Bernard Verne
toujours enthousiaste pour lancer des
actions et à beaucoup d‟autres qui ont
commencé avec lui à lutter contre
cette maladie. Ils ont commencé à
partir de zéro sans se décourager et
aujourd‟hui nous mesurons le chemin
parcouru. Nous avons encore plus
besoin d‟argent qu‟à cette époque car
de nombreux projets sont maintenant
en cours.
A tous ceux, non encore adhérents qui,
grâce au long travail des bénévoles de
notre
association,
ont
accès
maintenant
à
de
nombreuses
informations gracieusement (ex. le
classeur envoyé gratuitement à toute
personne AF), je demande de nous
rejoindre activement. Sans adhésions
ou sans dons, une association ne peut
pas exister, elle qui fournit tant de
documents divers que chacun peut
trouver sur le site, qui monte des
projets aidants pour les malades et
familles, et qui participe activement à
financer la recherche. Nous ne
sommes pas des consommateurs, mais
des
acteurs
pour
vaincre
définitivement l‟Ataxie de Friedreich.
Nous tous, adhérents, continuons à
faire connaître et vivre notre
association. Que chacun contribue
selon ses moyens à faire en sorte que
nous maintenions un bon niveau de
participation dans notre lutte. Des
dons personnels à la recherche de
subventions en passant par les actions
diverses, les possibilités
offertes
sont nombreuses et nous ne manquons
pas d‟amis autour de nous. Dans les
périodes
difficiles,
les
grandes
chaînes de solidarité sont les plus
efficaces et les plus durables. Merci
à tous.
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Des modèles biologiques complémentaires –
JM Camadro et
H. Tricoire
mai 2012
Le présent projet associe deux équipes (Camadro, Institut Monod et Tricoire,
Biologie Fonctionnelle et Adaptative - Paris) qui souhaitent mettre leurs
compétences en biologie, pathophysiologie, génétique au service d‟un objectif
commun : développer de nouvelles molécules à visées thérapeutiques permettant de
traiter l‟ataxie de Friedreich (FA) en combinant les avantages de deux modèles
biologiques très puissants : la levure et la mouche Drosophila melanogaster.
Cette démarche prolonge les efforts
réalisés dans les dernières années
dans le laboratoire de JM Camadro
pour
identifier
directement
de
nouvelles
molécules
à
potentiel
thérapeutique, par criblage de vastes
collections de molécules chimiques
sur le modèle levure de FA. Nous
avons ainsi isolé 69 composés de 1ère
génération (C1G) en criblant la
chimiothèque
Nationale
(9000
molécules) et la Prestwick Collection
(900 molécules), pour leur capacité
à restaurer la croissance d’une
souche de levure déficiente en
frataxine.
Jean-Michel Camadro
Nous voulons maintenant valider ces «
touches positives » et en évaluer le
potentiel thérapeutique. Pour cela,
nous voulons tirer parti de la synergie
entre deux modèles biologiques, la
levure et la Drosophile avec les
objectifs suivants :
1) Caractériser plus précisément le
mode d’action de ces composés chez
la levure. Parmi les paramètres
importants, nous analyserons leur
effet sur la croissance des cellules, le
métabolisme du fer, la synthèse et la
stabilité des centres fer-soufre,
l‟équilibre red-ox cellulaire, l‟oxydation
des protéines, la mort cellulaire, la
perte d‟ADN mitochondrial et le taux
de mutagénèse spontané.
2)
Explorer
le
potentiel
thérapeutique de ces composés chez
la Drosophile, en étudiant leurs effets
sur deux modèles de FA récemment
établis dans l‟équipe de H Tricoire : Un
modèle développemental qui a permis
de mettre en évidence des défauts
majeurs de synthèse des stérols chez
les mouches déficientes en Frataxine,
et un modèle cardiaque qui consiste à
inactiver la Frataxine spécifiquement
dans le cœur. Cette inactivation
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entraîne
des
dysfonctionnements
cardiaques importants que nous avons
la capacité d‟évaluer grâce à un
système d‟imagerie cardiaque in vivo
récemment développé au laboratoire.
avec éventuellement des effets
positifs
pour
d‟autres
maladies
neurodégénératives.
3) Générer une liste de composés de
seconde génération, établie à partir
des composés les plus prometteurs sur
la base de leur effet sur des modèles
Drosophile, et tester l‟efficacité de
ces nouveaux composés sur nos deux
organismes modèles.
Nous espérons, en réalisant ce projet,
découvrir des composés qui pourront
devenir des médicaments efficaces
pour guérir l‟ataxie de Friedreich,
Hervé Tricoire
Suite de nos travaux sur les poissons zèbres –
Nadia
Soussi-Yanicostas
mai 2012
Utilisation du modèle poisson zèbre pour étudier la FRDA et rechercher des
molécules thérapeutiques in vivo
Constantin Yanicostas, Julie Bertho et Nadia Soussi-Yanicostas
Inserm, U676, Hôpital Robert Debré - Paris
L‟ataxie de Friedreich (FRDA) est la
forme la plus fréquente d‟ataxie
d‟origine génétique. Cette maladie est
provoquée par des mutations du gène
FXN qui entraînent une forte
diminution de l‟expression de la
frataxine,
une
petite
protéine
mitochondriale dont la fonction
demeure mal comprise. L‟ensemble des
travaux réalisés au cours des 15
dernières années, tant sur des cellules
de patients que sur différents
modèles animaux, ont permis de mieux
comprendre la physiopathologie de la
FRDA. De plus, ces études ont conduit
à plusieurs essais thérapeutiques qui
sont
en
cours
de
réalisation.
Toutefois, à ce jour, de nombreux
aspects de cette maladie demeurent
mal compris et nous ne disposons
toujours pas d‟un modèle animal qui
reproduise fidèlement l‟ensemble de la
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physiopathologie de la FRDA. De
même, si les essais thérapeutiques en
cours laissent présager de réelles
avancées pour les patients dans les
années à venir, nous ne disposons pas
encore de traitements qui bloquent, ou
ralentissent très significativement,
l‟évolution de l‟ensemble de la maladie.
Nadia Soussi-Yanicostas et son équipe
Pour
progresser
dans
la
compréhension de cette maladie et
élaborer de nouveaux protocoles
thérapeutiques, il est essentiel de
disposer d‟un modèle animal qui soit
facilement
manipulable
et
qui
reproduise le plus fidèlement possible
l‟ensemble des dérèglements observés
chez les patients. En effet, si les
études réalisées in vitro sur des
fibroblastes de patients permettent
d‟identifier des agents ayant des
propriétés
thérapeutiques,
ces
travaux ne peuvent pas mettre en
évidence une toxicité éventuelle de la
molécule in vivo, ni déterminer sa
capacité à traverser la barrière
hémato-encéphalique. De plus, comme
la perte de fonction complète de la
frataxine conduit à une létalité
embryonnaire chez les mammifères,
seuls des modèles murins conditionnels
ont été réalisés. Enfin, comme la
FRDA est provoquée par une perte de
fonction incomplète de la frataxine
chez l‟humain, quel que soit le modèle
animal choisi, il est important de
pouvoir contrôler précisément le
niveau d‟inactivation de cette protéine
pour reproduire la situation observée
chez les patients.
Pour pallier les limitations des modèles
existants, en collaboration avec
l‟équipe de Pierre Rustin qui étudie la
FRDA depuis de très nombreuses
années, nous avons entrepris d‟étudier
les conséquences d‟une perte de
fonction partielle de la frataxine chez
le poisson zèbre. Ce petit vertébré est
particulièrement bien adapté pour la
modélisation des maladies humaines
provoquées par la perte de fonction
d‟un gène. En effet, dans cette
espèce, l‟inactivation spécifique d‟un
gène d‟intérêt par la micro-injection
d‟un oligonucléotide antisens modifié,
ou morpholino-oligonucléotide (MO),
est une technique courante et d‟une
grande efficacité qui permet de
produire en une seule journée
plusieurs
centaines
d‟embryons
exprimant un taux très réduit de la
protéine étudiée (la frataxine, par
exemple). De plus, il est aisé de
contrôler le niveau de déplétion de la
protéine ciblée en fonction de la
quantité de MO injectée.
Grâce au séquençage du génome du
poisson zèbre, nous avons identifié le
gène codant la frataxine dans cette
espèce. En accord avec les résultats
obtenus dans d‟autres espèces, nous
12
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avons observé que chez le poisson
zèbre la frataxine est exprimée tout
au long du développement de l‟embryon
et dans un grand nombre de tissus de
l‟adulte. Ensuite, nous avons étudié les
conséquences
d‟une
inactivation
partielle de la frataxine dans les
embryons de poisson zèbre. D‟une
manière intéressante, nous avons
observé que ces embryons présentent
plusieurs
défauts
très
reproductibles :




Une
désorganisation
très
importante des motoneurones de la
moelle épinière et de leurs axones.
Un défaut de différenciation des
neurones du cervelet, les cellules
de Purkinje et les cellules
granulaires.
Une hypertrophie du cœur qui
touche 30 à 40% des embryons.
Un défaut de différenciation de
l‟oreille interne.
Par contre, à ce jour, nous n‟avons pas
pu mettre en évidence une diminution
de l‟activité des enzymes de la chaîne
respiratoire qui contiennent des
noyaux fer-soufre chez les embryons
partiellement déficients en frataxine,
ni une sensibilité particulière de ces
embryons à un stress oxydant.
L‟ensemble de ces résultats démontre
l‟intérêt du modèle poisson-zèbre pour
étudier la physiopathologie de la
FRDA. En effet, ces résultats
suggèrent que la sensibilité au stress
oxydant et la perte de fonction des
enzymes à noyaux fer-soufre qui ont
été observés dans de nombreux
systèmes, mais pas dans tous, ne sont
pas des conséquences directes de
l‟inactivation partielle de la frataxine.
Un poisson zèbre
De
plus,
la
présence
d‟une
hypertrophie cardiaque chez un quart
des embryons exprimant un taux très
réduit de frataxine permet d‟espérer
pouvoir comprendre, grâce à ce
modèle, pourquoi certains patients ont
une atteinte cardiaque alors que
d‟autres ne présentent pas de défauts
au niveau du cœur.
Dans la continuité de ce travail, nous
construisons actuellement une lignée
transgénique de poisson zèbre qui
surexprimera
d‟une
manière
conditionnelle une forme mutante de la
frataxine. Cette lignée devrait nous
permettre
de
reproduire
plus
fidèlement cette pathologie chez le
poisson, d‟une part, et, d‟autre part,
elle mettra à notre disposition un
modèle facilement manipulable qui
devrait nous permettre de cribler des
molécules à visée thérapeutique.
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1er essai ciblant le défaut génétique de l’Ataxie de
Friedreich - Fara
mars 2012
Extrait d’un article du SunHerald.com ; publié le 15 mars 2012 par le Dr Luca
Durelli, docteur en médecine, responsable neurologie - Hôpital Universitaire San
Luigi Gonzaga, Turin. Traduction : Jean-Vivien Maurice et Sylviane Cattin
Repligen
Corporation
a
annoncé
aujourd‟hui avoir débuté son essai
clinique de phase 1 avec le RG2833
chez son premier patient adulte
atteint d‟Ataxie de Friedreich (AF).
Dr. Luca Durelli
L‟AF
est
une
maladie
neurodégénérative héréditaire causée
par des niveaux réduits de la protéine
frataxine, amenant des symptômes qui
se présentent le plus souvent durant
l‟enfance et qui conduisent à une perte
progressive des fonctions musculaires
et nerveuses.
Le RG2833 est un inhibiteur de
classe 1 de l’histone déacétylase
(HDACi) assimilable par voie orale,
conçu pour augmenter la production
de frataxine chez les patients
atteints
d’AF.
Lors
d‟études
précliniques sur des animaux et des
cellules de patients, il a été prouvé
qu‟il active la production de cette
protéine-clé. Cette étude est conduite
à Turin en Italie et constitue le
premier essai clinique d‟un médicament
qui cible le défaut génétique central
de l‟AF.
L‟essai de phase 1 consiste en une
étude croisée menée sur une
vingtaine
de
patients
adultes
atteints de l’AF, par la prise d’une
dose simple croissante. Il est conçu
pour évaluer la pharmacocinétique et
le profil de sûreté du RG2833. Cette
étude permettra aussi et surtout
d‟évaluer
la
réponse
pharmacocinétique du RG2833 sur
plusieurs biomarqueurs cellulaires et
moléculaires, entre autres la frataxine
mRNA et la protéine frataxine.
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Essai avec l’EPI-A0001 aux USA –
Juliette Dieusaert
mai 2012
L‟EPI-A0001 est une petite molécule absorbée par voie orale qui a passé le stade
des études de phase 1A et 1B sur des volontaires sains et de phase 2 dans l‟ataxie
de Friedreich. Les phases 1A et 1B d‟études avec des doses croissantes chez des
volontaires sains ont été terminées au 1er juin 2011. On n‟a observé aucun effet
secondaire négatif significatif dû au médicament.
Le recrutement pour une étude de phase 2 auprès de 30 patients atteints de
l‟Ataxie de Friedreich est terminé. Il s‟agira d‟une étude en double aveugle contre
placebo. Lieu de l‟essai : hôpital pédiatrique de Philadelphie – USA. Investigateur
principal : Dr. David Lynch. Source : http://www.edisonpharma.com
Pr. Alexis Brice nommé directeur général de l’ICM –
Juliette Dieusaert
juin 2012
Le Pr Alexis Brice, professeur des universités-praticien
hospitalier à l'UPMC a été nommé directeur général de
l'Institut du cerveau et de la moelle épinière(ICM) le 24 avril
2012.
Il était auparavant coordonnateur du centre de référence
"maladies rares" de neurogénétique depuis 2005 et de l'équipe
de recherche "bases moléculaires, physiopathologie et
traitement des maladies neurodégénératives" de l'ICM.
Ancien chef de service au département de génétique et cytogénétique à l'hôpital de
la Pitié-Salpêtrière et ancien directeur de l'ITMO (institut thématique multiorganismes) de neurosciences, sciences cognitives, neurologie et psychiatrie
d'Aviesan (Alliance nationale pour les sciences de la vie et de la santé), le Pr Brice
devient également le directeur scientifique de l'IHU (institut hospitalouniversitaire) A-ICM.
Il est membre correspondant de la section de biologie à l'Académie nationale de
médecine depuis 2007.
Source : http://www.upmc.fr/fr
Il est aussi membre du Conseil Scientifique de l‟AFAF- CSC- ASL.
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Travaux à partir de cellules induites à la pluripotence
– Laetitia Aubry
janvier 2012
Equipe du Dr. Marc Peschanski et Dr. Mathilde Girard. ISTEM/INSERM UMR 861/AFM/UEVE – Genopole- EVRY
www.genopole.fr
L‟ataxie de Friedreich (AF) est une
maladie mitochondriale à transmission
autosomique récessive caractérisée
par
une
dégénérescence
spinocérébelleuse progressive et une
cardiomyopathie hypertrophique. Elle
est due principalement à l‟expansion
d‟une séquence répétée de triplets
GAA dans le premier intron du gène
FXN codant pour une protéine
mitochondriale : la frataxine.
Au niveau cellulaire, le déficit en
frataxine qui en résulte a pour
conséquences physiopathologiques une
sensibilité accrue au stress oxydant,
un dysfonctionnement des protéines
mitochondriales à noyau fer-soufre, et
une perturbation de l‟homéostasie du
fer. Malgré les avancées réalisées au
cours de ces dernières années, la
fonction exacte de la frataxine, et par
voie de conséquence, les mécanismes
pathologiques impliqués dans l‟AF
restent
encore
très
largement
méconnus. La difficulté d‟accès à des
modèles humains pertinents pour la
pathologie explique en partie cela et
limite grandement la possibilité de
découvrir de nouveaux médicaments.
Le
développement
de
nouveaux
modèles cellulaires qui reproduisent au
plus près les principaux aspects de
l‟AF apparaît donc comme un enjeu
majeur.
Cellules souches
Les cellules souches induites à la
pluripotence (iPS) obtenues à partir
de cellules somatiques humaines
reprogrammées offrent la possibilité
de créer un tel modèle. En effet, ces
cellules peuvent potentiellement être
différenciées vers tous les types
cellulaires de l’organisme, tels que
les neurones, qui constituent une des
principales
populations
cellulaires
atteintes dans l‟ataxie de Friedreich.
Notre programme de recherche vise
donc à produire des cellules neurales
et des neurones issus de cellules iPS
porteuses de la mutation causale de
l’AF (iPS-AF), et à rechercher
l’expression
de
désordres
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moléculaires et cellulaires liés à la
pathologie dans ces cellules.
L‟objectif général est d‟identifier de
nouvelles molécules pharmacologiques
qui puissent atténuer ou normaliser les
effets délétères dus au déficit en
frataxine et responsables de la
maladie.
Les microARNs : des régulateurs pleins d’avenir –
Pascal
Nguyen
septembre 2011
L‟équipe d‟Alexandra Henrion Caude vient de dévoiler le rôle de régulateurs de
gènes que tiennent les microARNs dans les mitochondries. Une découverte au fort
potentiel thérapeutique et commercial.
C‟est au cours d‟une conférence des
« Lundis de Saint-Antoine » en 2007,
qu‟Alexandra Henrion Caude, coresponsable de l‟animation scientifique
du site hospitalo-universitaire, entend
parler, pour la première fois, des
microARNs, ces petits fragments
d‟ARN non codants, impliqués dans la
régulation de l‟expression des gènes.
Ce fut le déclic et le début d‟une
aventure scientifique aux forts
accents entrepreneuriaux.
Sans
partenaire
clinicien,
la
chercheuse décide de poursuivre une
recherche académique. Avec une idée
en tête : déboucher sur des
applications thérapeutiques et donc
créer une entreprise.
D‟ailleurs, confirme-t-elle, « le projet
a été conçu dès le départ comme une
start-up afin d‟en accélérer la mise en
œuvre ». Et elle se souvient avoir fait
alors « un joli rêve, celui où l‟on
pourrait soigner les enfants par les
microARNs. Et éventuellement même,
in utero ».
Première étape capitale pour cette
mère de cinq enfants : vérifier si ses
intuitions sont exactes. En effet, elle
soupçonne qu‟il existe un lien entre les
microARNs et les maladies génétiques.
Elle travaille d‟arrache-pied pendant
six mois en parallèle à ses activités à
Saint-Antoine. Elle établit le cahier
des
charges
d‟un
logiciel
qui
permettrait justement d‟étudier le
rôle des microARNs dans les maladies
génétiques.
Claude Mugnier, bio-informaticien, la
rejoint et le programme Mirifix, « fix
the diseases by the miRs » (soigner
les maladies par les microARNs), voit
le jour.
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Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 122 - janvier 2011 - www.afaf.asso.fr
syndromes
polymalformatifs
qui
affectent
le
développement
de
l‟enfant
lors
de
sa
formation
squelettique, l‟équipe identifie le
microARN responsable. Elle découvre
également que ces petits ARN non
codants parviennent à entrer dans les
mitochondries, ces « carrefours du
métabolisme et de la programmation
de la mort de la cellule
impliquées
dans de très nombreuses maladies
telles les cancers », pour contrôler la
bonne régulation des gènes.
Alexandra Henrion-Caude
Destiné à la collecte d‟informations
sur
lesquelles
s‟appliquent
des
algorithmes
computationnels
qui
permettent de définir les maladies à
étudier, le logiciel est voulu dès le
départ en accès libre sur Internet.
Toutefois, les intérêts économiques
potentiels, notamment pour des
fabricants de machines et produits
moléculaires,
n‟échappent
pas
à
l‟équipe, ni à Inserm Transfert.
Alexandra Henrion Caude dépose le
brevet et la filiale privée de l‟Inserm
se charge alors de la valorisation du
programme informatique. Néanmoins,
malgré quelques pistes, il n‟y a pas de
retombée financière.
Qu‟à cela ne tienne, les recherches se
poursuivent. Et finalement, grâce au
logiciel,
les
hypothèses
de
la
chercheuse se confirment. Pour
certaines pathologies, comme des
La démonstration est donc faite : en
interférant avec les microARNs, il est
possible de moduler la fonction
mitochondriale.
Les
débouchés
thérapeutiques
sont
immenses,
notamment
dans
les
maladies
neurodégénératives comme l‟ataxie de
Friedreich où les microARNs sont
impliqués.
Immédiatement, un nouveau brevet
est déposé et Inserm Transfert
décide, dès l‟annonce de la publication,
de valoriser ces découvertes. Quatre
ans après s‟être lancé un véritable
défi scientifique, Alexandra Henrion
Caude voit enfin se concrétiser ses
espoirs de débouchés commerciaux.
www.inserm-transfert.fr Source :
magazine sciences et santé - INSERM
septembre 2011
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Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 122 - janvier 2011 - www.afaf.asso.fr
Les protéines TALEs induisant l’expression de
frataxine – Pr. Tremblay
Université de Laval (Québec), février 2012
Le but à long terme de notre projet de recherche est de développer une
thérapie pour l‟ataxie de Friedreich basée sur l’administration aux
patients d’une protéine qui induit l’expression de la frataxine.
Petit
rappel
Friedreich :
sur
l’Ataxie
de
Le corps humain est constitué de
milliards de cellules. À l‟intérieur de
chacune de ces cellules, il y a de
petites
organelles
appelées
mitochondries.
Ces
mitochondries
servent entre autres à transformer
les sucres en énergie. Une des
protéines
situées
dans
ces
mitochondries est appelée frataxine.
L’Ataxie de Friedreich (FRDA) est
due une réduction de la quantité de
frataxine. Ceci entraîne un mauvais
fonctionnement des mitochondries et
conséquemment la mort des cellules,
plus particulièrement les cellules du
cerveau (les neurones) et les cellules
du cœur (les cardiomyocytes). La mort
de ces cellules est responsable des
symptômes
neurologiques
et
cardiaques des patients Friedreich.
L‟Ataxie de Freidreich est due à cette
réduction de frataxine et donc si on
pouvait augmenter cette protéine, on
pourrait prévenir le développement
des symptômes de cette maladie.
Mais pourquoi les cellules des
patients Friedreich font-elles moins
de frataxine ? Ceci est dû à une
mutation dans le gène codant pour
cette protéine. Un gène, c’est une
répétition de séquences de 4
nucléotides qu‟on désigne par la
première lettre de leur nom : A, T, C
et G (pour adénine, thymine, cytosine
et guanine). La mutation dans le cas
de l’Ataxie de Friedreich est en fait
une
longue
répétition
de
3
nucléotides (GAA). Les personnes
saines ont environ 5 à 30 répétions
GAA dans le gène de la dystrophine
alors que les patients Friedreich ont
70 à plus de 1000 GAA. Ces répétions
de GAA sont situées dans une partie
du gène de la frataxine qui ne code
pas pour la protéine frataxine. Ces
répétitions changent la conformation
du gène (la conformation de l’ADN)
et rendent plus difficile la formation
d’ARN
messager,
intermédiaire
entre le gène et la production de la
protéine frataxine.
Récemment des chercheurs ont trouvé
une nouvelle classe de protéines
(appelées TALEs) qui s’attachent à
des séquences spécifiques de 12 à
30 nucléotides dans l’ADN, exemple :
TAACGCGGTTAA…. Ces protéines
TALEs sont elles mêmes produites à
partir d’un gène. Le gène codant
pour une protéine TALE peut être
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Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 122 - janvier 2011 - www.afaf.asso.fr
modifié pour
TALE qui
spécifique à
choisie par le
produire une protéine
s’attache de façon
une séquence d'ADN
chercheur.
Le Pr. Tremblay dans son laboratoire
Au cours de nos travaux préliminaires
sur l‟Ataxie de Friedreich, nous avons
déjà produit 12 gènes codant pour des
protéines
TALEFrat
ciblant
spécifiquement
des
séquences
différentes
de
chacune
12
nucléotides, situées dans le promoteur
du gène humain de la frataxine. Le
promoteur étant une séquence de
nucléotides qui détermine quand est
produit un ARN messager (ARNm) qui
permet de produire des protéines.
Les gènes de ces TALEFrat que nous
avons faits, ont été fusionnés avec une
séquence codant pour quatre peptides
(morceaux de protéines) appelés VP16.
Ces 12 gènes sont désignés comme
TALEFrat-VP64.
Pour nos premières expériences, au
lieu de faire induire le gène de la
frataxine, nous avons testé nos
différentes
TALEFrat en faisant
induire un gène qui code pour une
protéine
fluorescente
rouge.
L‟induction de l‟expression du gène est
en effet plus facile à détecter parce
que
les
cellules
deviennent
fluorescentes rouges. Les trois
plasmides TALEFrat-VP64 induisant le
plus fortement l‟expression de cette
protéine rouge ont été par la suite
étudiés plus en détails pour leur
capacité à induire le vrai ARTN
messager de la frataxine.
Le premier objectif de notre projet
de recherche est donc de vérifier si
l’introduction des divers plasmides
TALEFrat-VP64
augmente
aussi
l’ARNm de la frataxine et la
protéine
frataxine
dans
des
fibroblastes normaux et dans les
fibroblastes de patients Friedreich
en culture.
La souris YG8R est un modèle de
l‟Ataxie de Friedreich qui a été
produit par le Dr. Pook (Londres). Les
deux gènes murins de la frataxine ont
été modifiés pour les rendre non
fonctionnels. Cependant cette souris
contient un gène additionnel provenant
d‟un patient Friedreich. Ce gène
humain de la frataxine contient les
séquences
de
nucléotides
du
promoteur, des parties codant pour la
protéine frataxine et une séquence de
230 trinucléotides GAA dans intron 1.
Au cours de notre projet de
recherche, nous vérifierons donc si
l‟introduction
des
plasmides
TALEFrat-VP64
augmente
l'expression de la frataxine humaine
dans les fibroblastes en culture
provenant de ces souris YG8. Les
expériences de ce premier objectif
vont nous permettre de sélectionner la
20
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 122 - janvier 2011 - www.afaf.asso.fr
TALEFrat-VP64 la plus efficace in
vitro.
Les protéines TALEFrat-VP64 ne
pénètrent normalement pas seules
dans des cellules. Pour permettre que
ces protéines entrent dans les
cellules, nous allons fusionner les
protéines TALEFrat-VP64 avec un
autre morceau de protéine appelé un
Domaine de Transduction de Protéine,
tel que Pep-1.
Le deuxième objectif de notre projet
de recherche est donc de vérifier si
la plus efficace des protéines
TALEFrat-VP64-Pep-1
peut
pénétrer par elle même dans les
cellules humaines en culture et les
cellules
de
souris
YG8R
non
seulement en culture, mais après une
injection dans le sang des souris.
Le troisième objectif est de vérifier
si la TALEFrat-VP64-Pep-1 la plus
efficace dans les cellules en culture
administrée dans le sang des souris
YG8R, incite l'expression de la
frataxine humaine et empêche le
développement de symptômes de
l’Ataxie de Friedreich dans ce
modèle animal. Des résultats positifs
dans ce modèle animal permettraient
par la suite de pouvoir demander aux
autorités règlementaires de pouvoir
faire un essai clinique d‟une thérapie
basée sur l‟administration d‟une
protéine TALEFrat-VP64-Pep-1.
Retrouvez une vidéo du Pr. Tremblay
sur google (recherche : « thérapie
potentielle de l‟ataxie de Friedreich »)
Les ligands des répétitions de trinucléotides de la
frataxine – JL Mergny
janvier 2012
Institut Européen de Chimie Biologie / INSERM U869 / Université de Bordeaux
L'ataxie de Friedreich est causée par la diminution du niveau d'expression d'une
protéine, la frataxine. Cette diminution résulte de la présence dans la séquence du
gène d'une séquence ADN répétée anormalement longue. Cette région peut adopter
une conformation inhabituelle, qui bloque l'expression du gène et empêche la
production de la protéine correspondante.
En nous appuyant sur notre expérience
dans le domaine des interactions
entre ADN et petites molécules,
nous avons recherché des composés
qui inhibent la formation de ce type
de conformations, même pour un
gène contenant un grand nombre de
répétitions.
Ces
ligands,
en
reconnaissant
la
conformation
"normale" de l'ADN, empêcheraient
ainsi sa conversion vers une forme
inappropriée.
Des
résultats
21
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intéressants avaient été publiés dans
cette voie de recherche par deux
équipes américaines. Néanmoins, les
composés décrits étaient soit peu
sélectifs – et donc susceptibles
d'induire
de
nombreux
effets
indésirables – soit de taille trop
importante, rendant leur utilisation en
tant que médicament problématique.
Nous avons donc entrepris:


de mettre au point une méthode
de criblage adaptée à la cible
ADN frataxine. Ce test permet de
tester en parallèle un
grand nombre de composés.
Le format choisi nous
permet
de
comparer
l'affinité
pour
quatre
cibles
différentes
Frataxine et trois autres
cibles pertinentes pour
d'autres pathologies - et
ainsi de connaître la sélectivité de
ces composés. Les tests sont
effectués in vitro sur un brin
d'ADN mimant les répétitions
pathologiques. La méthode est
décrite dans un article scientifique
à
paraître
dans
le
journal
"Methods" et jointe au rapport
scientifique. Le soutien de l'AFAF
y est évidemment remercié.
de réaliser ce criblage sur un
ensemble de petites molécules
("chimiothèque") de façon à
découvrir de nouveaux composés.
La première série de molécules
testées
provient
de
la
Chimiothèque Nationale du CNRS.
Cette collection de 640 composés
constitue
la
"Chimiothèque
Nationale Essentielle", mise à la
disposition des laboratoires publics
français qui le souhaitent. Nous
avons testé tous ces composés et
découvert
quelques
"touches"
("hits" en anglais).
On peut alors classer les molécules
testées en plusieurs catégories :




7 composés ont une affinité nulle
ou faible pour la séquence de
l'Ataxie mais sont actifs sur au
moins une des trois autres cibles.
2 autres molécules montrent une
affinité intéressante pour la
cible
Frataxine.
Malheureusement,
elles
interagissent plus fortement
avec d'autres cibles ADN/ARN,
ce qui démontre une sélectivité
insuffisante. Nous n'avons donc
pas poursuivi d'études sur ces
dérivés.
Une molécule semblait avoir une
activité légèrement supérieure sur
la cible Frataxine. Néanmoins,
l'affinité sur une des 3 autres
cibles est importante également.
Nous n'avons donc pas encore
découvert de composé "idéal", qui
montrerait un score très élevé sur
la frataxine, et nul pour les 3
autres cibles.
Les 630 autres molécules sont
inactives sur les 4 cibles. 98% des
composés de notre collection n'ont
donc pas d'intérêt pour nos
recherches. Ce pourcentage de
pertes, qui peut sembler décevant,
est tout à fait acceptable dans un
criblage, puisque nous pouvons
22
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évaluer beaucoup de molécules sans
perdre de temps. L'important est
de découvrir quelques "touches",
même s'il faut pour cela accepter
un fort taux d'échec.
Jean-Louis Mergny
Les
résultats
sont
donc
encourageants, mais nous n'avons pas
encore trouvé le candidat idéal pour
poursuivre ces études sur cellules en
culture. Nous orientons maintenant ce
travail dans deux directions:


en
testant
des
analogues
(molécules chimiquement proches)
du dérivé le plus prometteur, dans
l'espoir de découvrir des molécules
plus sélectives mais nous nous
heurtons à des problèmes de
solubilité du produit ;
en réutilisant le test sur d'autres
collections de molécules : nous
avons déjà à notre disposition une
petite
collection
de
dérivés
synthétisés dans notre institut, et
allons également tester d'autres
séries de composés. La mise au
point et la validation ayant été
réalisées, il est maintenant possible
de tester sur la cible Frataxine une
librairie de quelques centaines de
molécules en une semaine.
Ces expériences seront réalisées sans
demander
de
soutien
financier
supplémentaire,
les
produits
nécessaires étant déjà achetés, les
tests mis au point, les appareillages et
salaires financés par d'autres sources.
Les expériences présentées ci-dessus
ont été réalisées par deux postdoctorants, Daniel Renciuk et Jun
Zhou,
et
un
ingénieur,
Lionel
Beaurepaire, financés en partie par le
Conseil Régional d'Aquitaine, que nous
remercions également au passage !
Seul le soutien combiné AFAF/Région
/CNRS/INSERM a rendu ce travail
possible : l'Aquitaine ne finançant pas
de frais de fonctionnement, ceux-ci
ont pu être couverts par l'AFAF,
permettant ainsi de tester les
molécules mises à disposition par le
CNRS. Enfin, l'appareil servant au
criblage a été acheté sur des crédits
INSERM, le responsable scientifique
étant
rémunéré
par
le
même
organisme.
Si nous découvrons de meilleures
pistes chimiques, elles nous serviront
de base pour le développement, la
conception et la synthèse de molécules
plus actives. Les composés seront
ensuite testés sur des cellules
humaines
en
culture,
certains
modèles
étant
disponibles
pour
visualiser
plus
facilement
le
rétablissement
de
l'expression
normale d'un gène inhibé par la
présence de ces répétitions.
23
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Stress Oxydatif et métabolisme respiratoire –
Dominika
Sliwa
décembre 2011
Voici la synthèse des travaux financés en partie par l‟AFAF réalisés dans le
laboratoire de Jean Michel Camadro.
L‟objectif principal de mon projet de
thèse
était
une
meilleure
compréhension de la physiologie et
du
métabolisme
des
cellules
déficientes en frataxine. Pour cela,
je me suis intéressée à deux projets
différents : un sur la réponse au
stress oxydant et un autre sur le
métabolisme respiratoire.
Mitochondrie, vue de profil
Les cellules de levure sont très
sensibles au peroxyde d‟hydrogène, un
oxydant. En étudiant les mécanismes
de
résistance
au
peroxyde
d‟hydrogène, nous avons trouvé qu‟une
protéase, la métacaspase (homologue
aux
caspases
des
cellules
de
mammifère qui régulent la mort
cellulaire), inhibe les défenses antioxydantes
dans
les
cellules
déficientes en frataxine. Ainsi, quand
la métacaspase est enlevée de ces
cellules, celles-ci récupèrent presque
totalement les niveaux de défense
contre le stress oxydant. Cependant,
la respiration mitochondriale n‟est pas
améliorée.
Une autre réponse des cellules
déficientes
en
frataxine
au
peroxyde
d’hydrogène
est
la
fragmentation des mitochondries. Les
mitochondries sont des organelles
essentielles
à
de
nombreuses
fonctions cellulaires, telles que la
production d‟énergie, la régulation de
la concentration intracellulaire en fer
et en calcium ou encore les réponses
cellulaires aux stimuli qui induisent la
mort cellulaire. Les mitochondries
sont continuellement soumises à des
mécanismes de fission et fusion dans
les cellules. Un déséquilibre entre ces
deux processus induit de sérieux
changements dans le fonctionnement
de ces organelles. Par exemple, de
nombreuses études montrent que des
cellules
qui
possèdent
des
mitochondries
fragmentées
sont
beaucoup plus sensibles aux stress qui
induisent la mort cellulaire.
Par ailleurs, de telles dérégulations
sont également impliquées dans
plusieurs
maladies
neurodégénératives.
L‟atrophie
optique dominante et la maladie de
Charcot-Marie-Tooth de type 2A sont
24
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 122 - janvier 2011 - www.afaf.asso.fr
dues à des mutations sur les gènes
codant des protéines responsables de
la fusion des mitochondries. Des
problèmes
de
dynamique
mitochondriale
sont
également
observés chez les patients atteints
des maladies de Parkinson, Alzheimer
et Huntington.
Dominika Sliwa
Nous avons montré que dans les
cellules de levure ainsi que dans les
fibroblastes
prélevés
chez
des
patients atteints de l‟ataxie de
Friedreich,
la
morphologie
mitochondriale semble altérée en
réponse à un traitement par le
peroxyde d‟hydrogène. Nous avons
manipulé
la
morphologie
mitochondriale des cellules de levure
déficientes en frataxine vers la forme
filamenteuse et nous avons observé
une augmentation de la résistance au
stress oxydant, mais pas une
amélioration
de
la
respiration.
Néanmoins, il nous semble prometteur
de poursuivre cette étude dans les
cellules véritablement affectées chez
les patients, les neurones.
Nous
nous
sommes
intéressés
également à la respiration et au
métabolisme d’un intermédiaire, le
NADH, dans le modèle levure. Nous
avons étudié une des enzymes e dans
le transport du NADH entre la
mitochondrie
et
le
cytoplasme,
l‟aspartate aminotransférase. Nos
résultats montrent une diminution
importante de l‟activité enzymatique
dans les mitochondries de levures
déficientes en frataxine, alors que
l‟isoforme cytoplasmique a une activité
normale. Dans les cellules, les
protéines peuvent être soumises à
plusieurs modifications qui peuvent les
activer ou les inhiber. Nous avons
démontré que dans les mitochondries
des
cellules
déficientes
en
frataxine, l’ensemble des protéines
est
peu
acétylé.
Et
c’est
précisément le cas de l’aspartate
aminotransférase, ce qui conduit à
son inhibition. Dans les cellules de
mammifère,
plusieurs
protéines
impliquées dans la respiration sont
régulées par l‟acétylation ou la déacétylation. Des travaux récents
montrent
que
l‟aspartate
aminotransférase est impliquée dans la
sécrétion d‟insuline (stimulée par le
glucose) par les cellules beta du
pancréas. Il serait donc intéressant
de poursuivre ces études dans les
cellules humaines pour essayer de
comprendre si cette enzyme est
impliquée dans le développement du
diabète chez les patients atteints
de l’ataxie de Friedreich.
25
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 126 – janvier 2012 - www.afaf.asso.fr
L’essai pioglitazone et le monde du médicament –
Juliette Dieusaert
décembre 2011
Dans la foulée du Tsunami Mediator, plusieurs molécules ont été retirées du marché
dont la pioglitazone (Actos) pour un risque légèrement accru de cancer de vessie
chez les diabétiques, hommes, après 50 ans, fumeurs… (cf. ESPOIR 124 - juillet).
Nous avons donc interpelé l‟AFSSAPS
et Xavier Bertrand dans une lettre
commune AFM-AFAF, sur l‟existence
de cet essai en cours, sur le rapport
bénéfice/risque de la pioglitazone
dans le cas particulier de cet essai.
Après un mois laborieux de discussions
et de réunions, alors que toutes les
boîtes d‟Actos ont été récupérées
dans les pharmacies le 11 juillet,
l‟AFSSAPS a autorisé la poursuite de
l‟essai en raison des « bénéfices
potentiels de cette molécule et des
risques de la maladie » et les
laboratoires Takeda se sont engagés à
fournir les boîtes d‟Actos nécessaires
jusqu‟à la fin de l‟essai en 2013.
Fin juillet, l‟EMEA, Agence Européenne
du médicament, qui régente tous les
pays européens, donnait les résultats
de son enquête sur l‟éventuel risque
accru de cancer de la vessie : elle
recommande
simplement
une
surveillance accrue au niveau vésical,
sans retirer la molécule du marché.
l‟accès futur à
cette
molécule
retirée du marché
français.
« Si cet essai se
révèle
prometteur, quel sera l’accès possible
à la molécule dans deux ans, si elle
n’est pas réintroduite en France ?
Et quelle possibilité d’accès au
médicament pour les quelques patients
sortant de l’étude dans un cadre dit
compassionnel, en attendant les
résultats de l’essai ?
Au nom des malades et familles qui
sans cesse doivent se battre pour ne
pas perdre pied, je vous demande de
réfléchir à ces questionnements
importants pour tous et d’y apporter
une réponse aidante. »
En septembre, je reprenais la plume
ainsi que quelques parents que je
salue, vers l‟AFSSAPS et le ministère
de la santé, posant les questions sur
26
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 126 – janvier 2012 - www.afaf.asso.fr
Voici la réponse du Pr LECHAT Directeur
de
l'Evaluation
des
Médicaments
et
des
produits
Biologiques - AFSSAPS :
« J'ai bien reçu votre lettre du 2
Octobre au sujet de la poursuite de
l'essai avec la Pioglitazone dans
l'Ataxie de Friedreich.
remboursement et de conditions de
délivrance.
Les patients atteints de la maladie de
Friedreich auront ainsi, si le rapport
bénéfice/risque s'avérait favorable
dans cette pathologie, une possibilité
de se procurer le médicament. Il est
encore trop tôt pour savoir dans
quelles conditions, car il s'agira d'une
condition hors AMM, mais je tenais à
vous faire part de cet état de fait et
de ces éventuelles perspectives pour
les
patients,
qui
effectivement
doivent se battre tous les jours pour
ne pas perdre pied. Nous y sommes
sensibles
bien
évidemment.
Bien cordialement
Pr. Philippe Lechat »
Je voulais juste vous apporter
l'information suivante concernant la
pioglitazone sur le marché français. Il
est fort probable que la Commission
Européenne dans un avenir assez
proche, décide du maintien de l'AMM
de la pioglitazone sur l'ensemble du
marché européen, suite à l'arbitrage
demandé par la France. Dans ces
conditions, il n'est pas impossible que
la pioglitazone soit à nouveau
disponible sur le marché français, mais
avec des conditions différentes de
Je voudrais saluer les actions
conjointes
des
responsables
associatifs (AFAF, AFM, Alliance
Maladies Rares), des familles, et
l‟écoute de l‟AFSSAPS, de Xavier
Bertrand rencontré à deux reprises,
des laboratoires Takeda, sans oublier
les responsables de l‟essai qui
dépensent beaucoup d‟énergie pour
mener cet essai jusqu‟au bout !
Sous
la
pression
de
patrons
diabétologues qui soulignent l‟apport
indiscutable de cette molécule chez un
certain nombre de diabétiques, elle va
de nouveau revenir sur le marché en
France,
mais
ne
serait
plus
remboursée …
A suivre !
27
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 126 – janvier 2012 - www.afaf.asso.fr
Et le monde du médicament….
Une
chose
est
sûre : le monde du
médicament, dans
la
déferlante
Mediator, est en
pleine révolution et évolution. En
première, les prescriptions hors AMM
(Autorisation de Mise sur le Marché),
ce qui est le cas de beaucoup de
maladies rares, quand elles ont un
médicament …
Aussi nous devons veiller à ce que les
décideurs en matière de politique du
médicament ne nous oublient pas et
réfléchissent aux cas particuliers des
prescriptions dans les maladies rares.
Il semble que Xavier Bertrand,
présent au forum recherche dans les
maladies rares à l‟AFM, l‟ait bien
compris.
ORPHANET
dans
son
éditorial de novembre s‟en fait l‟écho
aussi :
« Vote d’une nouvelle loi suite à
l'affaire Mediator® :
Quelles
conséquences
sur
les
prescriptions hors AMM pour les
maladies rares ?
L'Assemblée nationale a voté le mardi
4 octobre, par 309 voix pour et 31
voix contre, le projet de loi
renforçant
le
contrôle
des
médicaments,
présenté
par
le
gouvernement. Ce texte, qui veut
refonder en urgence le système de
sécurité sanitaire des produits de
santé après l'affaire du Mediator®,
est
composé
d'articles.
d'une
trentaine
Dans un souci de protection des
patients, le projet de loi prévoit un
encadrement des prescriptions hors
AMM, en créant des recommandations
temporaires d'utilisation élaborées
par l'Agence nationale de sécurité du
médicament et des produits de santé,
une
nouvelle
gouvernance
qui
remplacera l'Agence française de
sécurité sanitaire des produits de
santé. Le prescripteur devra en outre
porter la mention « hors AMM » sur
l'ordonnance et en informer son
patient.
La communauté des maladies rares est
inquiète sur ce point car il existe de
nombreuses maladies rares pour
lesquelles
aucun
médicament
spécifique n'a été développé et qui
sont traitées actuellement par des
prescriptions hors AMM. Le projet de
loi vient d'être discuté au Sénat. Les
sénateurs veulent de plus limiter à
trois ans la durée des autorisations
temporaires
d'utilisation.
Une
véritable
catastrophe
pour
les
maladies rares ! »
Mi-décembre,
il
sera
voté
à
l‟Assemblée
nationale
les
lois
définitives concernant les hors AMM
et ATU (cas du Mnesis). Nous vous
tiendrons au courant.
28
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 126 – janvier 2012 - www.afaf.asso.fr
1er forum sur la recherche dans les maladies rares –
Juliette Dieusaert
décembre 2011
L‟AFM et Alliance Maladies Rares ont organisé le 18 novembre 2011 au Génocentre
d‟Evry, une journée sur les enjeux et perspectives de la recherche dans les
maladies rares. Laurence Tiennot-Herment, présidente de l‟AFM et Viviane Viollet,
présidente d‟Alliance Maladies Rares soulignent l‟importance de ce 1er forum.
Le ministre Xavier Bertrand créa la
surprise en répondant présent. Il
redit son attachement et son
investissement aux associations de
maladies rares et à l‟AFM. Dans le
Tsunami Mediator, beaucoup de
médicaments sont sur la sellette. La
plupart des médicaments dans les
maladies rares sont prescrits hors
Autorisation de Mise sur le Marché ;
or dans le contexte d‟épuration du
monde du médicament suite au
Tsunami Mediator (expression qu‟il a
reprise), ce sujet sera débattu à
l‟assemblée nationale fin novembre ; il
redit que la spécificité des maladies
devrait être prise en compte pour les
prescriptions en ATU et hors AMM. A
suivre…
M. le ministre Xavier Bertrand
Dr.
Serge
Braun,
scientifique de l’AFM.
directeur
Beaucoup d‟avancées depuis 20 ans :
thérapie cellulaire, thérapie génique,
etc. Exemples :

Dans l’amaurose de Leber (une
forme de rétinite) : un essai de
thérapie génique débute : par la
suite, les applications pourraient
servir à la DMA (dégénérescence
maculaire) ou la cécité de certains
diabétiques.

Dans la myopathie de Duchenne,
on tente le saut d‟exon (partie de
l‟ADN qui fabrique la protéine) là
où il y a problème pour que la
protéine puisse être de nouveau
fabriquée ; par conséquent, on peut
aussi bloquer la fabrication de
protéines : intérêt dans les
cancers, les maladies infectieuses.

Dans la progeria (vieillissement
prématuré
avec
décès
à
l‟adolescence), 1er essai clinique
avec un anti cholestérol et un anti
ostéoporotique
(aminobiphosphonate) : on retrouve
dans les cellules progeria le même
29
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 126 – janvier 2012 - www.afaf.asso.fr
phénomène
que
dans
le
vieillissement, que dans les effets
secondaires
de
certaines
chimiothérapies et la trithérapie
du SIDA.
D‟où l‟intérêt des laboratoires vers le
développement de thérapies dans les
maladies rares car elles pourront
s‟appliquer à des maladies plus
fréquentes.
Dr. Serge Braun
En résumé, sources
plutôt positives.
d‟innovations
Pr. Ségolène Aymé, responsable
Orphanet : diagnostic des maladies
rares.
Depuis 1990, année du programme du
génome humain, beaucoup de maladies
rares sortent de l‟ombre. Il y a en
Europe 93 labos pour diagnostiquer
1570 gènes.
On ne peut pas tester tous les gènes
dans chaque pays. Les collaborations
sont donc nécessaires ; il faut aussi
trouver les accords pour pallier aux
coûts supplémentaires engendrés et
vérifier la qualité du laboratoire :
programme de soins transfrontaliers.
Il vaut mieux un seul labo en Europe
mais de qualité.
Actuellement il y a restructuration
des labos : 75 % de génériques,
licenciements,
épuisement
du
portefeuille
pour
les
nouvelles
molécules.
Certes, il faut 100 millions d‟euros
pour développer un médicament dans
une maladie rare. Mais le coût est
quand même moins élevé que pour
d‟autres médicaments car il faut moins
de malades pour monter les essais, ce
qui suscite un nouvel intérêt des
firmes pharmaceutiques. On voit
surgir de nombreuses « start-up »
innovantes
et
de
gros
labos
commencent à s‟appuyer sur des
associations de maladies rares : GSK,
Pfizer, Novartis.
Pr. Ségolène Aymé
Le futur : le séquençage du génome
pour repérer toutes les variations
30
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 126 – janvier 2012 - www.afaf.asso.fr
allant de normal à pathologique. On
séquence les exons : ce sont les
parties de l‟ADN qui codent pour une
protéine (3% seulement de l‟ADN).
Actuellement les machines sont
performantes, l‟offre aux personnes
fleurit, mais l‟interprétation des
résultats est difficile : normal ou
pathologique ?
Les questionnements portent sur le
coût, le contrôle qualité insuffisant,
l‟interprétation
des
tests
quasi
inexistante, la non évaluation de
l‟utilité clinique, l‟absence de conseil
génétique, la consommation de tests
inutiles, l‟absence de prise en charge
et les conséquences psychologiques
sur la personne testée et sa famille.
De
plus
il
manque
de
bioinformaticiens et de conseillers
génétiques
(nouveaux
métiers
difficiles à mettre en place
en
France).
Pr.
Pascale
de
métabolicienne à Necker
11 équipes travaillent sur les cellules
souches embryonnaires. En raison de
la révision de la loi éthique de 2011, on
ne peut utiliser que sur dérogations
les cellules souches embryonnaires en
France. C‟est un grand frein à la
recherche.
Les propriétés des cellules souches :

elles se répliquent à l‟infini : autorenouvellement

elles sont pluripotentes : peuvent
se différencier en toute cellule de
l‟organisme
1er essai clinique dans la régénération
tissulaire dans les ulcères : intérêt
pour les grands brulés
Lonlay,
Bond en avant aussi dans les maladies
métaboliques souvent liées à un déficit
enzymatique. Nombreux exemples
dans des maladies rares, souvent
simples à traiter si… le diagnostic est
précoce. Cela sert à d‟autres maladies
plus courantes. Le dosage facile des
enzymes permet de suivre l‟efficacité
des médicaments.
Pr. Marc Peschanski, responsable de
l’I Stem – cellules souches
Pr. Peschanski
De même par le DPI, avec le
consentement du couple, on a des
embryons non réimplantés ayant des
atteintes génétiques, d‟où criblage de
médicaments possible.
La greffe cellulaire est plus facile
quand le tissu est ciblé ; donc difficile
pour l‟instant dans les motoneurones.
Equipe Dr. Moullier – Nantes : la
thérapie génique
31
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 126 – janvier 2012 - www.afaf.asso.fr
Mendel n‟a que 146 ans ; les
chromosomes 50 ans ; la 1ère carte
des gènes 19 ans, les 1ers séquençages
8 ans.

les bébés bulles (Pr Fisher) : 1er
essais en 2000, 7 enfants guéris en
2011…

l‟adrénoleucodystrophie
(Pr
Aubourg) : 2010, la maladie est
stoppée chez 2 enfants

l‟amaurose de Leber (rétinite),
l‟équipe de Nantes démarre un
essai clinique chez l‟homme
C‟est complexe, long et coûteux mais
les espoirs sont réels !
Dr. Philippe Moullier
Ceux-ci vont informer sur : est-ce une
variante ou est-ce pathologique ?
Grosses
questions
éthiques/
découverte du génome.
1ère identification de
maladies rares en 1990
gènes
de
Objectif de la thérapie génique :
introduire
dans
l‟organisme
des
séquences d‟ADN dans le corps qui
vont « réparer ».
GENETHON BIOPROD va ouvrir ses
portes en 2012 : c‟est le 1er
laboratoire au monde dans la
production de vecteurs de thérapie
génique.
Le Dr Nicolas Lévy, directeur du
GIS Maladies Rares, a développé de
nouvelles
perspectives
pour
la
recherche.
Ensuite nous avons pu visiter les
laboratoires.
Les essais cliniques commencent, mais
sont souvent encore au stade 1
(toxicité). Exemples :
Congrès Eurobiomed 2011 –
Claudie Baleydier et Christiane
Breniaux
novembre 2011
Ce congrès, consacré à l'innovation et les partenariats au service des malades
rares, a réuni 300 participants : experts, labos pharmaceutiques, associations de
patients.
32
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 126 – janvier 2012 - www.afaf.asso.fr
D‟emblée, beaucoup d'inquiétudes et
d'incertitudes concernent la future loi
sur
le
médicament
qui
est
actuellement en discussion au Sénat et
à l'Assemblée et qui, dans l'intention
de « protéger » le malade (suite à
l‟affaire Médiator), entre dans une
« folie réglementaire » (terme utilisé
par un participant). En particulier, les
ATU seraient remplacées par des RTU
(recommandation
temporaire
d'utilisation) de durée plus courte et
restreinte pour les indications hors
AMM. Néanmoins, il semblerait que
des dérogations et des formules moins
rigides
seraient
accordées
aux
maladies rares.
Ce
congrès
sur
les
nouvelles
BIOTECHNOLOGIES
recouvrait
surtout les machines screening à
haut débit et les « ontologies »
informatiques
(sortes
de
regroupements « intelligents » de
données informatiques).
Le professeur Jean-Louis Mandel a
démontré tout le mérite du haut débit
pour
la
détection
des
gènes
défectueux,
des
« variants »
expliquant
des
différences
surprenantes. De même, le diagnostic
préimplantatoire ou prénatal pourrait
être réalisé de façon « non invasive »
grâce au sang du fœtus présent dans
celui de sa mère et détectable par ces
machines.
Ces machines font gagner un temps
précieux pour le recueil des données,
de sorte que le métier de généticien
consisterait à moins rechercher ces
données fournies par les machines et
passer plus de temps à les interpréter.
Le problème de ces machines est leur
coût mais surtout le fait qu'elles
deviennent rapidement obsolètes et
que les nouvelles (pas forcément plus
chères)
sont
encore
plus
performantes en terme de rapidité et
surtout en possibilité de données plus
fines.
Pr.Jean-Louis Mandel
La deuxième biotechnologie est
l‟importance
croissante
de
« bioinformaticiens » capables de
créer
et
d'interpréter
des
« ontologies informatiques » c‟est-àdire des sortes de regroupements
intelligents et de croisement de
données
informatiques
faisant
apparaître
des
caractéristiques
communes insoupçonnées de plusieurs
maladies rares.
Le congrès a énormément insisté sur
l'importance
capitale
des
REGISTRES, des bases de données.
De même que les patients ont appris
que la recherche fondamentale, malgré
sa lenteur, était indispensable avant la
recherche clinique et thérapeutique, il
33
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 126 – janvier 2012 - www.afaf.asso.fr
serait de plus en plus évident que les
avancées pour la compréhension et le
traitement éventuel d'une maladie
rare ne peuvent se faire sans ces
registres, souhaités par le « Plan
maladie rare 2 » et destinés à être
des registres européens.
L'ataxie de Friedreich est bien placée
grâce au projet EFACTS et il est
important d'inciter nos adhérents à y
participer via Fabien Lesne cf Espoir
125 Octobre 2011. Il reste à savoir
quelles données entrent dans ces
registres et comment elles sont
relevées : centres de référence, de
compétence, médecin traitant, malade
lui-même : divers exemples anglais,
espagnols, italiens ont montré la
variété des pratiques.
Le prix du médicament orphelin a
fait l'objet de nombreuses discussions
et les échanges entre les différents
participants, dont les industriels du
médicament ont été, à la fois chauds
et fructueux.
L’assemblée pendant la conférence
La présence de représentants des
instances nationales : HAS (haute
autorité de santé), souvent centrée
sur le médico-économique ainsi que des
représentants de l'AFssaps ont
permis de faire entendre et défendre
le point de vue différent des
associations de malades, insistant sur
les devoirs de solidarité et d'équité, la
prise en charge sociale étant souvent
d'un prix plus élevé que la prise en
charge médicamenteuse.
La représentation des associations de
malades était essentiellement assurée
par les Fédérations d'associations de
maladies rares : l'Alliance maladies
rares, très active sur son stand mais
peu invitée aux débats, Eurordis via
Christelle Nourissier et l'AFM via
Christophe Duguet et Serge Braun sur
le versant scientifique.
En conclusion, congrès riche surtout pour les questions posées, tant dans le domaine
économique, avec la présence des représentants des entreprises du médicament,
que dans de nouveaux domaines de recherche biotechnologiques et informatiques
ouvrant des perspectives nouvelles tout en insistant sur la spécificité des maladies
rares.
34
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 126 – janvier 2012 - www.afaf.asso.fr
Nos travaux –
Nadia Soussi-Yanicostas
décembre 2011
NB : Après avis du Conseil scientifique, nous avons renouvelé le soutien à Nadia
Soussi Yanicosta.
Etude de la fonction de la frataxine et de la pathophysiologie de l’ataxie de
Friedreich dans le modèle poisson zèbre et recherche de molécules à visées
thérapeutiques in vivo
Résumé du Projet :
Il est important de disposer d‟un
modèle animal facilement manipulable
et reproduisant la physiopathologie de
la maladie pour tenter de mieux
comprendre la fonction de la frataxine
et tester de nouvelles approches
thérapeutiques.
est aisé d‟inactiver spécifiquement un
gène d‟intérêt par la microinjection
d‟oligonucléotides antisens modifiés ou
morpholino-oligonucléotides (MO). De
plus, on peut facilement contrôler le
niveau de déplétion de la protéine
ciblée en fonction de la concentration
du MO injecté, une caractéristique
fondamentale pour la FRDA qui est
due à une forte diminution, mais non
une absence, de la frataxine.
En collaboration avec l‟équipe de
Pierre Rustin, nous avons entrepris
d‟utiliser le poisson zèbre pour mieux
comprendre la fonction de la
frataxine et la pathophysiologie de
la maladie, puis tester l‟effet de
molécules
qui
ralentiraient
ou
bloqueraient l‟évolution de la maladie.
Après avoir identifié le gène codant la
frataxine chez le poisson zèbre, le
gène zfrx, nous avons fait synthétiser
un MO dirigé contre le site de
démarrage de la traduction de l‟ARN
zfrx. Grâce à cet outil, nous avons pu
produire des embryons exprimant un
taux réduit de frataxine, puis
étudier les phénotypes induits. Les
embryons défectueux en frataxine
présentent un défaut de mobilité, un
défaut des nerfs périphériques, ainsi
qu'un défaut du développement du
cervelet et, enfin, une hypertrophie
cardiaque.
Le poisson zèbre est particulièrement
adapté pour la modélisation des
maladies humaines héréditaires, car il
Avec ces outils, nous avons aussi
commencé à étudier le rôle de la
frataxine dans la synthèse des
Poisson zèbre
35
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 126 – janvier 2012 - www.afaf.asso.fr
protéines à noyau Fer-Soufre et, de
manière
intéressante
et
contrairement aux conclusions de
plusieurs séries de travaux, nous avons
observé que la frataxine n'était pas
indispensable pour la synthèse et
l'activité de ces protéines. Ces
résultats, ainsi que la réminiscence de
certains des phénotypes observés
chez
les
embryons
avec
la
pathophysiologie de la FRDA, nous
confortent dans notre choix d'utiliser
le poisson zèbre pour étudier la
frataxine et la FRDA et nous amènent
à proposer de poursuivre ces travaux.
En particulier, nous voulons étudier les
liens éventuels entre la neuropathie et
les cellules gliales, d'une part, et,
d'autre
part,
la
dégénération
neuronale
et
des
éventuelles
altérations de la gaine de myéline qui
entoure les axones. De plus, les
différents phénotypes que nous avons
mis en évidence chez les embryons
exprimant
un
taux
réduit
de
frataxine, vont nous permettre de
réaliser
les
premiers
essais
thérapeutiques chez le poisson zèbre.
Enfin, nous voulons produire une lignée
transgénique contenant un transgène
muté par l‟insertion d‟un motif
polyGAA et codant la protéine
fluorescente GFP. Grâce à cette
lignée, nous réaliserons une deuxième
série de tests thérapeutiques en
utilisant des molécules agissant au
niveau de la chromatine afin de tenter
de lever l‟inhibition de la transcription
induite par la présence de ce domaine
polyGAA
qui
est
l‟événement
déterminant de la maladie chez plus de
95% des patients.
Nos travaux sur les souris Harlequin –
Pierre Rustin et Paule
Bénit
novembre 2011
Projet Harlequin 2011 : tester et identifier les ligands des PPAR. INSERM
U676, Hôpital Robert Debré
Depuis plusieurs années, l‟équipe de Recherche animée par
Pierre Rustin à Robert Debré, grand hôpital pour enfants
du Nord de Paris, poursuit ses efforts pour mieux
comprendre les maladies mitochondriales dont l‟ataxie de
Friedreich, dans le but de développer de nouvelles
thérapies. Dans ce but, cette équipe mène des études
fondamentales sur des modèles cellulaires : plus appliquées
avec l‟utilisation de souris ataxiques (souris Harlequin), ou
plus directement des études cliniques en particulier un essai de Phase III, pour
36
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 126 – janvier 2012 - www.afaf.asso.fr
déterminer l‟éventuel effet bénéfique de la Pioglitazione dans l‟ataxie de
Friedreich.
Buts du Projet :
Il n‟existe malheureusement pas à ce
jour de modèle murin, obtenu en visant
le
gène
codant
la
frataxine,
développant de façon fidèle les
principaux signes de l‟ataxie de
Friedreich. Par contre, la souris
Harlequin avec un déficit partiel du
complexe
I
de
la
chaîne
respiratoire, présente une ataxie
mitochondriale progressive, variable
d‟un individu à l‟autre, associant des
atteintes
occulaires,
et
éventuellement
cardiaques selon certaines
études. Le mécanisme en
partie commun (déficit du
complexe I chez la souris
Harlequin et déficit des complexes I,
II, III dans l‟ataxie de Friedreich)
explique sans doute les analogies entre
les deux types d‟atteintes d‟origine
génétique différentes.
Dans ce contexte, un programme à
long terme faisant usage de ces souris
a été initié pour tester différentes
approches
thérapeutiques.
Plus
particulièrement en 2011, l‟idée est de
développer des travaux pour répondre
en particulier aux menaces sur la
possibilité d‟utilisation en France de la
Pioglitazone (Actos).
L‟objectif est de pouvoir présenter
des alternatives à l‟usage de cette
molécule dont il est reconnu que les
propriétés
(augmentation
des
défenses
antioxydantes
;
augmentation de nombreuses activités
mitochondriales ; augmentation de la
frataxine)
pourraient
s‟avérer
bénéfiques pour lutter contre l‟ataxie
de Friedreich.
Le projet soutenu par l‟AFAF
comprend
différents
volets
qui
s‟étendront sans doute sur plusieurs
années :
1Tenter de mieux comprendre le
mode d’action de la Pioglitazone, afin
de convaincre de la nécessité
de son utilisation dans les
maladies
mitochondriales
incluant l‟ataxie de Friedreich.

Tester l‟action sur la biogenèse (=la
fabrication) des mitochondries in
vivo dans une souris ataxique dont
les mitochondries sont déficitaires.
En effet, si sur cellules en culture
il a été décrit une biogénèse
mitochondriale, cette hypothèse
reste à tester in vivo chez la souris
car il a été récemment décrit
l‟existence d‟une régulation très
complexe
de
la
biogénèse
mitochondriale.

Tester l‟activation des enzymes
antioxydantes, ces enzymes dont
on pense qu‟ils sont largement
inactifs dans l‟ataxie de Friedreich.

Tester la diminution de la réaction
anti-inflammatoire dans le cerveau
(l‟inflammation est un problème
37
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 126 – janvier 2012 - www.afaf.asso.fr
rencontré
Friedreich
frataxine)
dans
l‟ataxie
lié au manque
de
de
2Tester l’effet thérapeutique
de la Pioglitazone en association
avec d’autres molécules à propriétés
anti-inflammatoires, pour rechercher
un
effet
synergique
potentiel.
L‟Ibuprofen (un anti-inflammatoire non
stéroïdien) en association avec la
pioglitazone a ainsi montré son
efficacité dans un modèle murin de
maladie neurodégénérative.
3Tester d’autres ligands des
PPAR (c‟est en partie parce qu‟elle se
fixe sur les PPAR dans les cellules que
la Pioglitazone
est active)
en
particulier
des
ligands
qui
n‟appartiennent pas à la famille des
glitazones.
La mise en oeuvre se fera par l’étude
des muscles et cervelets des souris
précédement traitées et par une
nouvelle série de tests thérapeutiques
sur la souris Harlequin dont un anti-
Nos travaux –
inflammatoire non stéroïdien comme
l‟Ibuprofen en association avec la
Pioglitazone. Ce traitement à déjà
montré son efficacité dans un modèle
de souris avec maladie neurologique.
Pierre Rustin
Par ailleurs, nous mettrons à profit
notre collaboration engagée avec le
laboratoire iStem de l’AFM à Evry
pour étudier l‟action de ces ligands sur
des cellules humaines dérivées de
cellules IPS (Induced Pluripotent
Stem cells).
Article
complet
www.afaf.asso.fr
sur
le
site :
Marie-Anne Colle
septembre 2011
NB : Après avis du Conseil scientifique, nous avons décidé de soutenir les travaux
de Marie-Anne Colle, de l‟Ecole Nationale Vétérinaire à Nantes.
Transfert de gène intrathecal à l'aide d'un vecteur aav10 pour le traitement
de l’ataxie de Friedreich
Résumé du Projet:
38
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 126 – janvier 2012 - www.afaf.asso.fr
L'apport par thérapie génique d'un
gène FXN (frataxine)
fonctionnel
dans
les
neurones,
permettant
d'augmenter de manière durable
l'expression de frataxine, constitue
une
perspective
thérapeutique,
particulièrement pertinente pour le
traitement de l'ataxie de Friedreich.
Les vecteurs dérivés des adenoassociated virus (AAV) sont capables
d‟apporter un transgène thérapeutique
à un grand nombre d‟organes y compris
au système nerveux central (SNC).
L‟apport du gène directement dans le
cerveau correspond à la stratégie la
plus souvent employée pour traiter,
par thérapie génique, les maladies
neurodégénératives dans des modèles
animaux rongeurs ou de grande taille.
Cette stratégie est cependant limitée
par le caractère invasif de la
technique, la diffusion restreinte du
transgène à proximité du site
d‟administration
du
vecteur
et
l‟absence du gène thérapeutique dans
la moelle épinière.
L‟originalité du projet est d‟utiliser
pour la première fois chez le primate
non humain une voie d‟administration
locale et non invasive, la voie
intrathécale, pour injecter via le
liquide céphalorachidien un nouveau
vecteur
de
thérapie
génique
(adénovirus associé de sérotype 10,
AAV10) permettant de délivrer un
gène thérapeutique dans les cellules
neuronales de la moelle épinière, des
ganglions spinaux et du cervelet. Chez
le rat, nous avons démontré que
l‟injection intrathécale de vecteur
AAV10 codant un gène rapporteur
(green fluorescent protein, GFP)
permet de cibler efficacement les
cellules neuronales de ces structures.
L'objectif de ce projet est de
démontrer
la
pertinence
du
transfert de gène intrathécal à
l’aide de l’AAV10 et d'en évaluer la
faisabilité et l'efficacité préclinique
chez le primate non humain dont le
cerveau et la moelle épinière, de plus
gros volumes que celui des rongeurs,
se rapprochent de ceux d‟un enfant.
Dans un premier temps, le gène de la
GFP
sera
utilisé
comme
gène
rapporteur pour évaluer l‟efficacité et
la sécurité du transfert de gène via le
liquide céphalorachidien. L‟efficacité
thérapeutique sera ensuite évaluée
par apport du gène médicament codant
la frataxine.
Si ces résultats sont encourageants,
les conclusions de cet essai préclinique
pourront être utilisées pour une
application clinique chez des patients
souffrant d‟ataxie de Friedreich.
39
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 125 –octobre 2011 - www.afaf.asso.fr
Les travaux soutenus en 2010-2011 –
Marianne Kerdougli
septembre 2011
Les demandes de soutien aux travaux de recherche font l‟objet d‟études très
sérieuses du Conseil Scientifique que nous remercions vivement. Nous donnons
notre réponse définitive après réunions en juillet du CS puis du CA. Des
engagements réciproques sont alors signés.
Le contenu des travaux soutenus sera développé dans le prochain ESPOIR 126.
1.
Renouvellement du soutien (2ème année) au projet de Nadia SoussiYanicostas (Hôpital Robert Debré – Paris) pour une somme de 26000€ :
"Modélisation de l’ataxie de Friedreich chez le poisson zèbre et
recherche de molécules thérapeutiques in vivo"
2.
Soutien au projet de Marie-Anne Colle (Ecole Nationale Vétérinaire
de Nantes) pour une somme de 29910€ : "Transfert de gène intrathécal à
l’aide d’un vecteur AAV10 pour le traitement de l’ataxie de Friedreich,
chez le chez le primate non humain"
3.
Soutien au laboratoire d’Hélène Puccio (IGBMC Strasbourg) pour
l‟achat d‟un système d‟observation ergonomique "LYNX Biomed " pour une
somme de 7250 €
4.
Soutien au projet de Pierre Rustin (Hôpital Robert Debré – Paris) :
sur les souris harlequins, mieux comprendre le mode d‟action de la
pioglitazone, tester son effet thérapeutique avec d‟autres molécules et
tester d‟autres ligands des PPARγ, pour une somme de 20000€
Un appel d’offre a été lancé en collaboration avec les associations CSC (Connaître
les Syndromes Cérébelleux), ASL-HSP France (Association Strümpell Lorrain) sur :
"La Fatigabilité observée chez les patients atteints d’Ataxie de Friedreich, de
Syndromes Cérébelleux, de Paraparésies Spastiques : compréhension de ses
mécanismes physiopathologiques, ses aspects cliniques et thérapeutiques"
Exceptionnellement cette année l‟AFAF fera un deuxième appel d‟offre au mois de
novembre.
40
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 125 –octobre 2011 - www.afaf.asso.fr
Participer à la recherche dans l’Ataxie de Friedreich –
Fabien Lesne
août 2011
EFACTS est un consortium européen (European Friedreich Ataxia Consortium for
Translational Studies) - composé de plusieurs équipes européennes, financé par la
Commission européenne pendant 4 ans, qui permettra d‟avancer plus vite dans la
compréhension de l‟ataxie de Friedreich.
Quels sont les objectifs d’EFACTS ?
Les objectifs principaux sont :


Etablir une banque de données
cliniques et biologiques à l‟échelle
européenne.
Définir
un
ensemble
d‟outils
d‟évaluations cliniques pour une
utilisation
dans
les
essais
thérapeutiques futurs

Développer les connaissances sur
les mécanismes cellulaires et
moléculaires liés à la maladie

Développer
thérapeutiques
des
outils
La France fait partie de ce Consortium
Européen EFACTS. La responsable
clinique en France est le Dr Alexandra
Dürr, dont les coordonnées figurent
au bas de cet article.
Les 2 objectifs principaux pour cette
équipe avec d‟autres en Europe sont :

Créer une base de données et
alimenter un registre européen sur
l‟Ataxie de Friedreich

Améliorer
la
caractérisation
clinique de l‟Ataxie de Friedreich
Vous êtes atteint d‟ataxie de
Friedreich, vous êtes volontaire pour
vous rendre au Centre clinique à Paris
dans le service du Dr Alexandra Dürr,
(Département de génétique, Hôpital
de la Pitié Salpêtrière), vous pouvez
participer.
Le transport ne sera pas à la charge
des patients. Ils seront vus en
consultation, et les modalités pour les
transports
seront
celles
des
consultations classiques.
41
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 125 –octobre 2011 - www.afaf.asso.fr
Que demande-t-on aux participants ?
Vous devrez passer une visite
d’inclusion, pendant laquelle vous
signerez un consentement pour la
participation, vous engageant à venir
une fois par an en consultation
pendant quatre ans.
Lors de cette première visite, un
examen neurologique, un entretien
neuropsychologique,
et
des
prélèvements, sanguin et cutané,
seront pratiqués.
Le prélèvement sanguin de 56 ml est
pratiqué par une infirmière en
consultation de génétique.
Le prélèvement cutané est simple,
sans complication, et réalisé sous
anesthésie
locale
sur
la
face
intérieure du bras. Il sera exécuté par
le neurologue. La partie de peau
prélevée est de 3 mm de diamètre. Un
pansement 3M steri-strip sera mis sur
la zone de la biopsie. Les biopsies de
peau auront pour but de mettre en
culture des fibroblastes, cellules du
tissu conjonctif, qui est un nouveau
modèle cellulaire très important pour
l‟étude des pathologies neurologiques.
Elle est proposée à un sous-groupe de
10 patients uniquement.
Alexandra Dürr
Des questionnaires seront également à
compléter, afin de recueillir votre
vécu.
Lieu
de
génétique :
Bottard, à
Salpêtrière à
heures.
la
consultation
de
bâtiment
Marguerite
l‟hôpital de la Pitié
Paris. Durée : environ 5
Quels en
possibles ?
seront
les
bénéfices
Votre participation à cette étude et
les données qui seront générées sont
précieuses pour avancer plus vite dans
la connaissance de l‟ataxie de
Friedreich. De plus, l‟appartenance à
ce registre vous permettra d‟être
informé rapidement sur de nouveaux
essais cliniques auquel vous pourriez
participer.
Contacts : Fabien Lesne : Attaché de recherche clinique en charge d‟EFACTS,
[email protected], Tél : 01 57 27 46 92 et Alexandra Dürr : Investigateur
principal
Hôpital de la Pitié Salpêtrière, Bâtiment ICM, bureau 01-017 - 47-83, boulevard de
l‟hôpital - 75651 PARIS cedex 13 - EFACTS : plus d‟infos sur www.e-facts.eu
42
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 125 –octobre 2011 - www.afaf.asso.fr
Cinquième colloque Meetochondrial –
Christiane Breniaux et
Marie-Claire Joguet
mai 2011
Cette année, rendez-vous au VVF de
La Colle sur Loup dans les Alpes
Maritimes, du 2 au 5 mai 2011
par leur intermédiaire que s‟équilibre
(ou pas) la balance entre nutrition et
dépense énergétique.
Les mitochondries produisent des
radicaux libres (dérivés réactifs de
l‟oxygène, ROS) et sont aussi équipées
pour lutter contre ces radicaux. Leur
rôle dans le stress oxydant dépend de
la balance entre ces deux activités,
cet aspect prend une importance
croissante
dans
les
processus
pathologiques et le vieillissement.
Schéma descriptif
de la structure
mitochondriale :
Nous avons retrouvé nos équipes de
recherche sur la mitochondrie et plus
précisément sur les pathologies liées à
la mitochondrie.
Les mitochondries sont présentes
chez tous les Eucaryotes, les modèles
d‟étude peuvent être des animaux, des
végétaux, des champignons ou des
micro-organismes.
L'essentiel
de
notre
énergie
provient
des
mitochondries. La mitochondrie est
définie comme l‟organite cellulaire de
la respiration où se rencontrent
l‟oxygène et les aliments (substrats)
pour, par oxydation, libérer de
l‟énergie utilisée par la cellule. C‟est
1 : membrane interne ;
2 : membrane externe ;
3 : espace inter-membranaire ;
4 : matrice
Le
groupe
"Mitochondrie
et
Pathologie" est en partie composé
par
le
réseau
Maladies
Mitochondriales, qui regroupe les
biologistes, les cliniciens et les
membres
des
associations
de
patients
concernés
par
ces
pathologies héréditaires. Ce réseau
est soutenu par l'AFM, le GISInstitut
des
maladies
rares,
l'association contre les maladies
mitochondriales
(AMMi)
et
l'association Ouvrir les yeux (OLY).
43
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 125 –octobre 2011 - www.afaf.asso.fr
Cependant, cet axe "Mitochondrie et
Pathologie" a la volonté de s'étendre à
l'ensemble
des
processus
pathologiques
impliquant
la
mitochondrie. Compte tenu de son
importance
physiologique,
la
mitochondrie se révèle en effet
aujourd'hui au cœur de nombreux
processus pathologiques. Les maladies
neurodégénératives, le diabète et
l'obésité,
les
processus
d'ischémie/reperfusion, la toxicité de
certains médicaments, ainsi que les
processus
prolifératifs
sont
étroitement
associés
à
des
dysfonctionnements mitochondriaux.
L'objectif essentiel de ce groupe de
travail
est
de
contribuer
au
développement de nouvelles stratégies
thérapeutiques
ciblant
la
mitochondrie, afin d‟améliorer la vie
des patients. Le partenariat au sein du
réseau MeetOchondrie avec les
équipes
abordant
les
aspects
fondamentaux et physiologiques de
l'organelle, constitue un cadre unique
pour atteindre ce but.
Les Associations, (AMMi, AFM, AFAF)
ont présenté leur travail, leurs
attentes, le vécu des malades et de
leurs familles.
Nouvelle ère de la recherche fondamentale dans l’AF –
Bernard Verne
juillet 2011
Depuis quelques temps, la recherche s‟oriente sur
la “thérapie génique”. Cela consiste à introduire un
gène dit thérapeutique dans les cellules malades.
Le 9 mars 2011, l‟Assemblée Nationale a adopté un
amendement permettant à des organismes à but
non lucratif, comme Généthon, de créer un
établissement pharmaceutique pour “produire et
commercialiser” des médicaments, des activités
réservées jusque-là aux sociétés privées. Lorsqu‟il ouvrira ses portes, Généthon
Bioprod pourra solliciter la labellisation, donc devenir un établissement
pharmaceutique à part entière.
La collaboration entre Etat et Associations devient indispensable, signe d‟une
évolution des mentalités. Dans cet esprit, notre intérêt est de collaborer et
travailler ensemble pour obtenir un traitement curatif le plus rapidement possible.
Voir : www.genethon.fr
44
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 125 –octobre 2011 - www.afaf.asso.fr
La recherche fondamentale et clinique –
Compte-rendu de
Robert Breniaux
Mai 2011
Lors de la rencontre annuelle de l‟AFAF les 2 et 3 avril 2011, Pierre Rustin,
président du conseil scientifique, et Alexandra Dürr, présidente du conseil médical
et paramédical, ont demandé à chaque chercheur de présenter ses travaux.
LA RECHERCHE FONDAMENTALE
Alexandra Henrion-Caude (Hôpital Neckerlaboratoire du Pr Munnich) travaille sur les microARN.
Ce sont des petits régulateurs de gènes qui produisent
des protéines. Les malades présentent une combinatoire
(séquence au niveau du gène + microARNs qui viennent la
réguler) spécifique de ces éléments de régulation qui
est associée à une production de base réduite de la
frataxine, et ce indépendamment de toute mutation.
Elle poursuit ses travaux pour voir comment on
peut restaurer le taux de production de frataxine, chez
l'animal et chez l'homme, et réguler la fonction
mitochondriale. Cf. Espoir 118
Pierre Rustin, Aurélien Bayot (Hôpital
Robert Debré) et leur équipe étudient l‟action
du stress oxydant sur des cellules de la peau
prélevées chez des patients et le défaut
d‟induction des systèmes antioxydants.
Ils cherchent à mettre au point des
cellules souches qui représentent un grand
espoir pour la recherche : elles peuvent se
développer pour en remplacer d‟autres. Leur
utilisation n‟est pas encore au point. Cf. Espoir
122.
45
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 125 –octobre 2011 - www.afaf.asso.fr
Nadia
Soussi-Yanicostas
(Hôpital
Robert
Debré) et son équipe ont entrepris d‟étudier la fonction
de la frataxine en utilisant le poisson zèbre comme
modèle. Le poisson zèbre est un petit vertébré qui
présente de nombreux avantages sur le plan
expérimental et qui est devenu un des organismes
modèles favoris des biologistes. En effet, les embryons
de ce petit poisson ont un développement très rapide,
sont transparents, possèdent un système nerveux proche
de celui des mammifères (présence d‟une moëlle épinière,
d‟un cervelet, d‟un hypothalamus et de tous les neurotransmetteurs trouvés chez
l‟homme) et sont perméables aux petites molécules. L‟inactivation partielle de la
frataxine (la situation observée chez les patients) entraîne des défauts qui
affectent les mêmes organes que chez les malades et, en particulier, le système
nerveux et le coeur. En utilisant ce modèle, Nadia Soussi-Yanicostas et son équipe
vont tester prochainement les propriétés thérapeutiques de différentes classes
de molécules. Cf. Espoir 123.
Jean-Michel Camadro, Renata Santos,
Dominika
Sliwa
(Institut
Jacques
Monod)
cherchent à comprendre les conséquences du
déficit en frataxine et travaillent sur la levure. Sur
9000 molécules testées, 40 semblent augmenter la
présence de frataxine. Ils testent aussi la
drosophile pour mieux comprendre l‟action de la
frataxine dans les mitochondries. Cf. Espoir 121.
La thérapie génique a un fort potentiel ; la recherche
débute (Pr Aubourg - Hélène Puccio). Nous serons informés de
l‟avancement des travaux.
46
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 125 –octobre 2011 - www.afaf.asso.fr
LA RECHERCHE CLINIQUE
Le Pr.Arnold Munnich (Hôpital Necker)
présente l‟essai avec la Deferiprone.
Après avoir rappelé que la recherche allait
bénéficier du Grand Emprunt National et que
seraient créés des CHU d‟excellence avec des
pôles de recherche, Arnold Munnich nous
rappelle l‟action du Deferiprone, chélateur de
fer. Une IRM cérébrale permet de suivre la
quantité de fer présente initialement dans le
cerveau dans l‟ataxie de Friedreich, puis éliminée
dans le cerveau après traitement par la
deferiprone. La molécule pénètre dans toutes les
cellules de l‟organisme. Cf Espoir 120.
L‟essai a eu lieu en double aveugle sur 72 patients dans 5 pays sur une durée
de 6 mois. Il faut éviter les fortes doses car la molécule peut être toxique pour les
globules blancs. Il a noté quelques améliorations dont il ne peut encore nous parler.
Avec des petites doses de 20 à 40mg/kg, on constate aussi une baisse de
l‟hypertrophie cardiaque. Un autre essai de longue durée (3 à 5 ans) est prévu. Pas
d‟autres précisions pour l‟instant.
Le Dr Isabelle Husson (Hôpital Robert
Debré) dirige l‟essai avec la Pioglitazone. Le
dernier patient a été inclus fin 2010 et donc
l‟essai se terminera en 2013. Il est donc
impossible de communiquer le moindre résultat
actuellement. 40 jeunes patients y participent.
Cet essai se déroule en double aveugle. Il est
difficile pour les patients de ne pas savoir dans
quel groupe ils se situent. Cependant, ils
bénéficient d‟u suivi médical et psychologique,
tous les six mois, à l‟hôpital Robert Debré. L‟étude
du vécu de l‟essai est très approfondie et les
patients qui le souhaitent peuvent solliciter en
plus l‟aide de la psychologue. Entre deux visites à l‟hôpital Debré, ils voient leur
médecin généraliste. Aucun effet secondaire n‟a été observé à ce jour. Cf. Espoir
120.
47
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 125 –octobre 2011 - www.afaf.asso.fr
Le Pr. Alexis Brice (Hôpital Pitié Salpêtrière)
présente les résultats de l’étude européenne Miconos
avec l’idebenone. Cf. aussi Espoir 123
L‟essai a commencé en 2006 et a duré au total 4
ans. Il a eu lieu dans 13 centres de 6 pays différents
(Angleterre, Autriche, Allemagne, Belgique, Hollande et
France) chez 232 patients. Il y a eu 4 groupes de
patients : 3 avec 3 doses différentes d‟idebenone (180
ou 360 mg/j- 450 ou 900 mg/j- 1350 ou 2250mg/j) et
un groupe placebo, traités pendant un an.
Les objectifs principaux :



comparer l‟efficacité de 12 mois de traitement l‟atteinte neurologique
(idebenone vs. placebo), en utilisant l‟échelle ICARS
comparer l‟efficacité de 12 mois de traitement sur l‟atteinte cardiologique,
en étudiant la fonction de la pompe ventriculaire
évaluer la sécurité et la tolérance de l‟idebenone chez les patients sur
divers critères
Résultats globaux :


Les analyses statistiques réalisées sur l‟ensemble des données recueillies
n‟ont pas permis de montrer une tendance à l‟efficacité de l‟idebenone sur
les paramètres étudiés.
L‟étude a permis de confirmer que l‟idebenone a été bien tolérée et sans
effets secondaires majeurs.
Conclusions préliminaires :



Bien que l‟étude n‟ait pu fournir la preuve de l‟efficacité de l‟idebenone après
1 an de traitement, il est trop tôt pour déterminer si l‟idebenone pourrait
avoir un effet bénéfique pour un sous groupe de patients.
Les résultats combinés de plusieurs études d‟efficacité de l‟idebenone sont
en cours d’analyse et ont déjà montré une tendance à l‟efficacité de la dose
la plus forte comparativement au placebo après 6 mois de traitement.
Nous attendons les résultats de l‟extension sur 24 mois pour conclure
définitivement quant à l‟efficacité de l‟idebenone. Il est donc très
important de compléter cette étude.
Autres commentaires du Pr Brice : il est important de souligner que certains
patients réagissent mieux que d‟autres ; on peut noter chez eux une moins grande
48
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 125 –octobre 2011 - www.afaf.asso.fr
fatigabilité et une meilleure élocution sous traitement. Il faut donc prendre en
compte ces sous-groupes et relativiser les résultats globaux, d‟autant plus que la
durée d‟un an semble insuffisante pour une maladie dont l'évolution est lente. La
prolongation de l’essai est à envisager. Il convient de maintenir les
prescriptions de MNESIS par ATU.
Pierre Rustin rappelle que l‟idebenone a permis la
ventricule gauche chez 40% des malades. Dans les
remarque que les patients réagissent différemment.
traitements, d‟autres pas. Il faut donc rester prudent
résultats. Il convient de maintenir l’ATU.
réduction de la masse du
essais de molécules, on
Certains répondent aux
dans l’interprétation des
Myriam Raï (service Pr Pandolfo- hôpital
Erasme Bruxelles) a développé les axes de travail du
consortium EFACTS mis en place en 2010, financé par
l‟Europe pour 4 ans. Cf. Espoir 121
Ce consortium européen regroupe 14 pays, 200
médecins et chercheurs impliqués dans l‟AF. Les axes de
travaux sont les suivants :








Etablir une base de données européenne sur
l‟ataxie de Friedreich.
Définir des outils pour les essais cliniques
Etude de la fonction de la frataxine
Pathogénèses de l‟ataxie de Friedreich
Nouveaux modèles cellulaires et animaux
Action sur le gène : stratégies thérapeutiques
Développement de bio-marqueurs pour les essais cliniques
Mise en place d‟un site internet pour faciliter le travail des chercheurs
Un projet d’une telle ampleur n’a encore jamais vu le jour. La recherche
progresse, se donne plus de moyens et réunit de plus en plus de chercheurs.
Pour preuve, le congrès mondial de FARA (US et Australie) qui se déroulera à
Strasbourg Illkirch du 3 au 7 mai suivi de la 2ème réunion du consortium
européen : plus de 200 médecins et chercheurs mobilisés dans l’Ataxie de
Friedreich. Une première !
49
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 125 –octobre 2011 - www.afaf.asso.fr
Comprendre la maladie et la recherche –
Compte-rendu de
R. Breniaux & JC Dufeu
mai 2011
Il y eut plusieurs ateliers avec les médecins et chercheurs des équipes de Jean
Michel Camadro et Renata Santos, Nadia Soussi, Pierre Rustin, Isabelle Husson et
Alexandra Caude. Cet article est un compte-rendu de l'atelier avec Pierre Rustin,
Isabelle Husson et Alexandra Caude, répondant aux questions des participants.
Pierre Rustin et Isabelle Husson pendant l’atelier
- Après l’essai Miconos, peut-on
craindre la suppression de l’ATU
pour l’idebenone ?
Pierre Rustin est intervenu auprès des
autorités italiennes à la demande
d‟associations
qui
craignent
la
suppression du remboursement de
l‟idebenone. Il pense que les risques
pris par la suppression de la prise du
médicament éviteront une
telle
décision car les pouvoirs publics en
France ont déjà rencontré de graves
problèmes
engageant
leur
responsabilité. De plus, l‟idebenone ne
présente aucun danger pour la santé ;
ne plus en prendre comporterait par
contre un risque, d‟après lui. L‟essai,
de toute façon, montre un bénéfice
pour certains patients, il faut donc
continuer.
- Où en est l’essai avec l’EPO?
L‟EPO est un traitement lourd avec
des
effets
secondaires
non
négligeables. On a constaté une
augmentation
de
production
de
frataxine, mais on ignore par quel
mécanisme. Une communication sur cet
essai
aura
sans
doute
lieu
prochainement. Pour l‟instant, il
semble que les travaux n‟aient pas
beaucoup avancé. Les essais durent au
50
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 125 –octobre 2011 - www.afaf.asso.fr
moins quatre ans et les résultats
tardent donc à se faire connaître.
- Comment
(Actos)?
agit
la
pioglitazone
La pioglitazone peut, d‟après Pierre
Rustin, améliorer les mécanismes de
défense des cellules. C‟est une
molécule super active qui nécessite un
suivi médical.
Pour le moment, il n'y a pas d'effets
négatifs notés. L‟essai se fait en
double aveugle, donc contre placebo.
Un comité d'experts indépendant
surveille les effets secondaires. On
est obligé de tous les déclarer. Ce
comité peut décider de l'arrêt d'un
protocole s'il juge qu'il y a un risque
trop élevé. L'essai se terminera en
2013.
- Les résultats des essais sont-ils
restreints aux participants ?
Non. Tout le monde bénéficiera des
résultats, même si parmi les critères
pour participer à l'essai il y a la
capacité de marcher. Les personnes
diabétiques peuvent aussi parfois être
exclues
de
l‟essai
(signes
d'hypoglycémie
en
associant
le
traitement de Pioglitazone avec
l'insuline - traitement du diabète), ce
qui ne veut pas dire qu‟elles ne
pourront pas bénéficier des résultats.
On sait qu'il est parfois frustrant
pour les malades de ne pas faire partie
d'un panel de testeurs, mais c'est
aussi dur à vivre de faire l'essai, d'un
point de vue psychologique. Il faut
donc être conscient du fait que tous
les essais vont bénéficier à tout le
monde en même temps.
- Une dépression, un drame familial,
peuvent-ils être des déclencheurs de
la maladie ?
On a constaté en effet l‟apparition de
la maladie à la suite de tels
évènements chez certaines personnes.
On ne peut pas cependant en tirer des
conclusions scientifiques. Alexandra
Caude pense que des bio-marqueurs
efficaces pourraient nous renseigner à
ce sujet.
Comment
explique-t-on
différences d'évolution entre
malades ?
les
les
C‟est une question centrale et
complexe. Si on était capable de
comprendre, on serait capable de
comprendre beaucoup de choses sur la
maladie.
On a constaté qu'à un même niveau
bas de frataxine, les problèmes sont
différents. Plusieurs hypothèses sont
possibles :
1) Hypothèse d'un patrimoine de
résistance au stress oxydant qui
s'épuise au cours des années.
2) Hypothèse d'une agression qui
augmente au cours de la vie. En ce cas,
l'alimentation
pourrait
peut-être
jouer un rôle.
Même des jumeaux ont parfois des
réactions différentes à la maladie.
51
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 125 –octobre 2011 - www.afaf.asso.fr
Aujourd'hui, on ne comprend pas
encore ce qui explique ces différences
d'évolution.
- Existe–t-il un régime alimentaire
qui puisse mieux convenir aux
personnes ataxiques ?
Pierre Rustin a constaté que des
souris atteintes de l‟Ataxie se
portaient mieux avec une alimentation
riche en lipides. Une série d'articles a
été publiée sur l'impact des régimes
alimentaires sur certaines maladies
mitochondriales. C'est peut-être aussi
une piste pour l'AFAF dans le futur. A
ce stade, il n'y a pas encore d'étude
sur la corrélation entre nourriture et
maladie. Toutes les molécules testées
sont potentiellement dangereuses,
mais il ne faut pas négliger les pistes
alternatives.
Ça vaut donc le coup de regarder
l'impact de l'alimentation, mais Pierre
Rustin précise bien qu‟il s‟agit d‟une
simple constatation de laboratoire et
non d‟une incitation à dévorer de
nombreuses tartines de beurre !
Isabelle Husson rappelle que toute
modification du régime alimentaire ne
peut se faire que dans une démarche
globale
contrôlée
par
un
nutritionniste.
- Les gènes des souris ataxiques
évoluent-ils dans le temps ?
On ne sait pas car pour chaque
nouvelle expérience, on utilise de
nouvelles souris.
Conclusion : si beaucoup de points restent encore en suspens, la recherche
s'organise pour trouver des réponses, qui sont souvent loin d'être immédiates.
Comme le dit Pierre Rustin, c'est une période avec un gros point d'interrogation,
mais les questions sont posées. Il n'y a jamais eu autant de moyens et de
ressources alloués à la recherche, et on peut espérer en sortir quelque chose dans
les mois, années à venir.
Pendant l'atelier
52
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 125 –octobre 2011 - www.afaf.asso.fr
Avenir et à venir –
Pierre Rustin & Patrick Aubourg
Février 2011
Vos questions sur l‟à venir des travaux de recherche, sur l‟avenir, sur de
réels espoirs de traitements, de guérir sont récurrentes : " Quid des
mécanismes de la maladie : fonction de la frataxine, les mitochondries, le
centre fer-soufre, le stress oxydant, etc. ? Quid des pistes actuelles de
traitements : chélateurs de fer, HDAc, thérapie cellulaire, thérapie
génique, … ? Régénérer les neurones, stabiliser la maladie, remarcher,
retrouver une vie normale ? "
Pierre Rustin (Hôpital Robert Debré) et le Pr Patrick Aubourg (Hôpital St Vincent
de Paul) ont accepté de faire le point sur ces questions prégnantes… L‟un dirige un
laboratoire axé sur les pathologies mitochondriales dont l‟AF, et l‟autre est
neuropédiatre, très impliqué dans la recherche de thérapie génique dans la
leucodystrophie.
***********************
a) Une mauvaise réponse au stress
oxydant
Pierre Rustin
1- La fonction de la frataxine ?
Sa fonction est sans doute plus
compliquée que juste la synthèse des
centres
fer-soufre
;
ou
plus
exactement quand il manque de la
frataxine, les conséquences semblent
multiples (beaucoup de " semble " dans
ma
réponse
:
les
chercheurs
travaillent encore sur ces points !)
La plus initiale de ces conséquences
apparait être la sensibilité au stress
oxydant (c‟était l‟idée lancée en 1999
d‟utiliser l‟idébénone ou Mnesis, ou la
MitoQ, etc). Si l‟action neurologique
des antioxydants est mineure (et
encore pour certaines personnes),
chez un certain nombre d‟enfants les
effets sur le cœur restent là. Le rôle
des antioxydants dans la nourriture au
cours de la vie est d‟ailleurs peut être
très important dans l‟évolution très
mal comprise de la maladie.
b) Une mauvaise synthèse des centres
fer-soufre
Le déficit des protéines fer-soufre
est sans doute une autre conséquence
possible du manque de frataxine ; ce
53
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 123 - avril 2011 - www.afaf.asso.fr
déficit est pour partie lié de façon
primaire au niveau abaissé de
frataxine (les centres fer soufre
peuvent également être détruits
secondairement au stress oxydant).
De façon étonnante, le niveau de
frataxine est bas, même avant la
naissance (l‟anomalie génétique qui
contrôle le niveau de frataxine est
présente dès le début) et cela ne
semble pas avoir d‟impact durant des
années avant l‟apparition de la maladie,
même si parfois des signes de la
maladie peuvent être présents assez
tôt chez certaines personnes.
c) Une utilisation perturbée du fer
Le
fer
s‟accumule
(semble
s‟accumuler) très graduellement à
priori
et
plutôt
tardivement.
Heureusement, comme souvent quand
quelque chose ne marche pas bien dans
la cellule, celle-ci se défend, par
exemple en utilisant le fer autrement
(stockage sous forme inerte) ou en
modifiant son entrée dans la cellule (il
en va de même sans doute pour le
soufre). Ces problèmes de quantités
sont néanmoins importants et ces
quantités doivent être surveillées avec
attention en particulier si l‟on utilise
des chélateurs qui peuvent être utiles
dans une gamme de concentration en
fer et plutôt défavorables dans une
autre.
2- Resynthétiser de la frataxine?
Pour quelles cellules ?
Il y a maintenant plusieurs espoirs de
pouvoir synthétiser plus de frataxine :
les
inhibiteurs
des
histones
deacetylases (HDAc), les ligands des
PPAR gamma (comme la Pioglitazone) ;
mais évidemment il faut que les
cellules soient encore là. En fait la
question exacte est : il faut que DES
Cellules (et non nécessairement toutes
LES) soient encore là.
Parmi ces cellules je pense bien sûr 1à des neurones, mais aussi 2- à des
cellules qui les nourrissent et les
protègent (les astrocytes) et 3éventuellement à des cellules qui
peuvent prendre le relais en se
différenciant encore, genre cellules
souches (dans ce domaine on va de
surprise en surprise).
L‟AF est une maladie progressive et il
reste
toujours
une
quantité
importante de cellules. Il faut se
rappeler que tout le début de la vie se
passe souvent très bien même avec
peu de frataxine, a priori ni plus ni
moins que quand la maladie se révèle.
On a l‟impression que dans cette
maladie (comme dans beaucoup de
maladies où les mitochondries sont
impliquées), il en faut peu pour passer
un seuil en dessous duquel on n‟a pas
de gros problèmes (avant que la
maladie ne se révèle) ou au dessus
duquel la maladie est là. Pour repasser
le seuil, les chercheurs espèrent
pouvoir exploiter les cellules qui sont
toujours là et leur faire fabriquer la
frataxine qui manque, pour elles, mais
aussi pour le fonctionnement de
l‟ensemble de la " collectivité cellulaire
". Une autre idée est de bloquer en
parallèle la disparition des cellules,
54
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 123 - avril 2011 - www.afaf.asso.fr
disparition qui procède par un
mécanisme qui pourrait être bloqué, au
moins en partie.
3- Jusqu’où peut-on revenir ?
On ne se sait pas à ce jour jusqu‟où on
peut revenir en arrière. Il y a 15 ans
on aurait dit que tout était perdu… Et
puis sont venus quelques cas sans
doute extraordinairement rares mais
incroyables,
de
récupération
inattendue (par ex. en France dans une
ataxie d‟origine mitochondriale par
déficit en ubiquinone). Puis on a
découvert que le corps recelait des
cellules souches et que les neurones
pouvaient se donner la main pour
travailler quand certains d‟entre eux
étaient défaillants, et que les
astrocytes pouvaient servir de soutien
fonctionnel. Il reste bien sûr aux
chercheurs à être capables de
"manipuler" tout cela pour faire aller
les choses dans le bon sens.
Tout va bien sûr trop lentement, mais
l‟espoir d‟en sortir est là désormais,
d‟où les essais qui se multiplient
partout dans le monde. Voilà ce que je
répondrai à vos questions qui encore
une fois sont bien proches en réalité
de celles que se posent bien des
chercheurs.
Amicalement, Pierre Rustin
***********************
du traitement. On n‟a dans cette
maladie aucun élément formel pour
déterminer ce qui peut être réversible
ou pas.
Patrick Aubourg
Guérir, comme vous le savez, veut dire
ne garder aucune séquelle d‟une
maladie, quelle qu‟elle soit.
Ce que nous espérons, c‟est pouvoir
traiter la maladie de Friedreich, c‟est
à dire en arrêter son évolution, et
obtenir si possible une amélioration
des symptômes présents au moment
Comme dans toutes les maladies, le
traitement aura d‟autant plus de
chances de pouvoir être efficace,
c‟est à dire donner aux patients une
meilleure qualité de vie, que s'il est
administré au début de la maladie.
Cela est vrai pour TOUTES LES
MALADIES. Prenez un exemple, les
infections des poumons par des
bactéries : prises à temps, avec
l‟arsenal des antibiotiques puissants
que l‟on a aujourd‟hui, on peut en effet
les guérir ; mais passé un certain
stade, les antibiotiques ne sont plus
suffisants, les bactéries ayant fait
des dégâts irréversibles et au delà de
55
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 123 - avril 2011 - www.afaf.asso.fr
toutes les
actuelles.
possibilités
médicales
la maladie dans les premiers mois
suivant la naissance.
La maladie de Friedreich est comme
beaucoup
d‟autres
maladies
héréditaires une maladie, au départ,
incurable. J‟espère qu‟avec cet espoir
de traitement de thérapie génique,
cela ne sera plus le cas. Mais je vais
être franc, dans l‟état actuel de nos
connaissances, une guérison vraie ne
pourra être envisagée que si on traite
Cependant, d‟ici peu, d‟autres progrès
de la médecine régénérative du
cerveau et de la moelle épinière auront
aussi fait des progrès. Et je suis sûr
que certains d‟entres-eux pourront
être utilisés pour les patients atteints
de maladie de Friedreich gardant des
séquelles.
Bien à vous, Patrick Aubourg.
Rôle de la frataxine dans la réponse au stress –
Ilaria
Guccini
Février 2011
Compte-rendu de la thèse de Doctorat - janvier 2007/décembre 2010. Etude
réalisée avec le soutien de l’AFAF.
Le principal axe de recherche du
laboratoire concerne l‟étude du rôle
de la frataxine dans le contrôle de la
réponse au stress et aux programmes
de mort cellulaire. L‟équipe du Prof. R.
Testi a observé que la frataxine peut
effectivement protéger de l‟apoptose
induite par différents stimuli. En
particulier, ils ont identifié une forme
extramitochondriale
capable
de
supprimer la mort cellulaire de cellules
déficitaires en frataxine de la même
manière
que
la
frataxine
mitochondriale. L‟objectif de mon
projet de recherche a été dans un
premier temps d‟approfondir le rôle
de la frataxine extramitochondriale
dans la survie cellulaire et dans un
second temps de caractériser le rôle
général de la frataxine en réponse
au stress hypoxique.
La frataxine est une protéine
impliquée dans le transport du fer et
dans la synthèse des protéines à
noyaux fer-soufre, protéines comme
les aconitases et les protéines
constituant la chaîne respiratoire des
mitochondries, qui assurent des
fonctions
cellulaires
essentielles.
Sachant que la frataxine joue un rôle
de chaperon vis-à-vis du fer dans les
mitochondries, le premier objectif de
ma recherche a été d‟étudier le rôle
physiologique
de
la
frataxine
extramitochondriale
dans
le
compartiment
cytoplasmique
en
recherchant
des
interactions
56
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 123 - avril 2011 - www.afaf.asso.fr
dépendantes des noyaux fer-soufre.
Nous avons ainsi observé que, dans les
cellules déficitaires de frataxine,
issues de patients atteints de l‟ataxie
de Friedreich, le défaut d‟activité de
l‟aconitase cytoplasmique est rétabli
par la présence de la frataxine
extramitochondriale définissant ainsi
un rôle direct de cette dernière dans
la régulation de la fonction de
l‟aconitase cytoplasmique.
Ilaria Guccini
La frataxine est une protéine
indispensable pour la survie cellulaire
puisque son absence complète est
létale dans les modèles murins et
végétaux comme la plante Arabidopsis
et arrête le développement du
nématode C. Elegans. Une faible
quantité de frataxine permet le
développement et la survie des
organismes mais conduit à une
dégénérescence
progressive
de
certains tissus. La frataxine protège
les cellules tumorales du stress
oxydatif et de l‟apoptose mais agit
également comme un suppresseur de
tumeur. Les bases moléculaires de cet
apparent paradoxe ne sont pas
élucidées. Le deuxième objectif de ma
recherche a consisté à étudier les
voies de signalisation à travers
lesquelles la frataxine augmente la
résistance au stress des cellules
tumorales. Nous avons ainsi observé
l‟augmentation de la frataxine dans
diverses lignées cellulaires tumorales
en réponse au stress hypoxique, une
condition souvent associée à la
progression tumorale. Pour la première
fois,
nous
décrivons
in
vivo
l‟augmentation de la frataxine dans
des échantillons humains de cancer
comme le glioblastome et le carcinome
du côlon.
En conclusion, ce travail a permis
d‟établir un rôle de la frataxine
extramitochondriale dans la synthèse
des protéines à noyaux fer-soufre
cytoplasmiques comme l‟aconitase ainsi
que la participation de la frataxine
dans la réponse au stress hypoxique
impliquant que la modulation de son
expression pourrait jouer un rôle
fondamental dans la survie et/ou la
progression tumorale.
Laboratoire "Signal Transduction"
(http://www.labst.org) du Pr Testi –
Univ. “Tor Vergata” - Département de
Médecine
ExpérimentaleRomeItalie.
57
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 123 - avril 2011 - www.afaf.asso.fr
Les ligands des répétitions de trinucléotides de la
Frataxine – Jean-Louis Mergny
Novembre 2010
L'ataxie de Friedreich est provoquée par la diminution du niveau d'expression d'une
protéine, la frataxine. Cette diminution est causée par la présence dans la séquence
du gène d'une séquence ADN répétée anormalement longue. Cette région peut
adopter une conformation inhabituelle, qui bloque l'expression du gène et empêche
la production de la protéine correspondante.
Jean-Louis Mergny
En nous appuyant sur notre expérience
dans le domaine des interactions entre
ADN et petites molécules, nous allons
chercher des composés qui inhibent la
formation
de
ce
type
de
conformations, même pour un gène
contenant un grand nombre de
répétitions.
Ces
ligands,
en
reconnaissant
la
conformation
"normale" de l'ADN, empêcheraient
ainsi sa conversion vers une forme
inappropriée.
Des résultats intéressants ont été
publiés dans cette voie de recherche
par
deux
équipes
américaines.
Néanmoins, les composés décrits sont
soit peu sélectifs – et donc
susceptibles d'induire de nombreux
effets indésirables – soit de taille
trop
importante,
rendant
leur
utilisation en tant que médicament
problématique. Nous nous proposons
d'effectuer des expériences de
criblage sur un ensemble de petites
molécules ("chimiothèque") de façon à
découvrir de nouveaux composés. Les
tests seront effectués in vitro sur un
brin d'ADN mimant les répétitions
pathologiques.
A partir d'un large ensemble de
composés de départ, nous espérons
découvrir dans ces tests in vitro
quelques "touches" ("hits" en anglais)
qui nous serviront de base pour le
développement, la conception et la
synthèse de molécules plus actives.
Les composés seront ensuite testés
sur des cellules humaines en culture,
certains modèles étant disponibles
pour visualiser plus facilement le
rétablissement
de
l'expression
normale d'un gène inhibé par la
présence de ces répétitions.
58
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 123 - avril 2011 - www.afaf.asso.fr
Le projet ci dessus ne concerne donc
que les premières étapes de la
conception d'un médicament. Les
molécules actives dans nos tests – si
nous avons la chance d'en trouver – se
révéleront peut être inutilisables en
thérapie (toxiques ou trop peu
efficaces).
Mais
cet
axe
de
recherche,
relativement
peu
développé, mérite d'être exploré.
Institut Européen de Chimie Biologie INSERM U869 Pessac
Recherche de nouvelles molécules thérapeutiques -
Guy
Lenaers
Novembre 2010
L‟Ataxie de Friedreich (AF) est une maladie mitochondriale associée à l‟expansion
de triplets GAA dans le premier intron du gène de la Frataxine (FXN), affectant
son taux d‟expression, entrainant des atteintes neurologique, cardiaque et parfois
ophtalmologique sévères.
L‟analyse
physiopathologique
de
biopsies de patients et de modèles de
la pathologie, a mis en évidence une
succession d‟évènements délétères :
d‟abord un stress oxydant associé à
une augmentation de la susceptibilité à
l‟apoptose, puis une dérégulation des
protéines mitochondriales à noyaux
fer-soufre,
dont
l‟aconitase
et
certaines
unités de
la chaîne
respiratoire, et une accumulation de
fer dans les mitochondries.
Notre projet consiste à rechercher
de
nouvelles
molécules
pharmacologiques
qui
puissent
atténuer
les
effets
cellulaires
responsables de la maladie. Il repose
sur un crible de survie cellulaire
réalisé sur une lignée de fibroblastes
de tissu de patient AF, impliquant une
chimiothèque rassemblant les 1600
molécules composant la pharmacopée
européenne actuelle. Pour tous ces
médicaments, les dossiers d‟AMM
(autorisation de mise sur le marché)
sont disponibles, rendant accessibles
les informations clés sur les principes
actifs (possibilité de traitement
chronique,
effets
secondaires,
passage de la barrière hématoencéphalique, mode d‟action connu). Ils
ont par ailleurs la particularité d‟être
tombés dans le domaine public,
autorisant leur exploitation pour de
nouvelles applications thérapeutiques.
Nous venons de réaliser un tel crible
pour une autre maladie mitochondriale,
l‟Atrophie Optique Dominante, et
avons identifié plus de 80 molécules
augmentant la survie cellulaire de plus
de 10%. 60 de ces produits
appartiennent à 6 catégories de
59
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 123 - avril 2011 - www.afaf.asso.fr
prescription,
suggérant
une
convergence de mécanisme d‟action
pour chaque groupe. L‟un inclut des
produits
aux
propriétés
antioxydantes.
Guy Lenaers
La
réalisation
du
crible
pharmacologique avec les fibroblastes
de patients AF représente l‟objectif
unique de cette première demande de
financement.
Il
permettra
de
comparer les résultats obtenus pour
les deux maladies, et de définir des
molécules qui sont communes aux deux
pathologies ou spécifiques de l‟AF.
L‟analyse des données bibliographiques
pour chaque " hit " spécifique de l‟AF
ou commun aux deux pathologies
contribuera à les sélectionner ou non
pour les cribles secondaires.
Une seconde année de financement
permettra la réalisation de cribles
secondaires,
pour
établir
la
concentration optimale de chaque
molécule issue du crible primaire, pour
vérifier leur activité sur d‟autres
souches de fibroblastes de patients
AF et déterminer leur mode d‟action
sur la physiologie mitochondriale.
Les molécules retenues à l‟issue de
cette succession de cribles cellulaires
pourront ensuite entrer dans un
protocole d‟étude pré-clinique au cours
duquel leurs effets thérapeutiques et
innocuité seront testés sur des
modèles animaux de la pathologie.
Institut
des
Montpellier
Neurosciences
Modélisation de l'AF chez le poisson zèbre –
–
Nadia
Soussi-Yanicostas
Novembre 2010
L‟ataxie de Friedreich (FRDA) est provoquée par une perte de fonction de la
frataxine, une protéine mitochondriale dont la fonction demeure mal comprise. Les
travaux réalisés sur des modèles cellulaires in vitro et dans différents modèles
animaux in vivo, ont permis de mettre en évidence trois dérèglements du
métabolisme mitochondrial chez les patients: (1) une accumulation anormale de Fer
dans les mitochondries ; (2) une perte de fonction des enzymes du complexe FerSoufre ; (3) une hypersensibilité au stress oxydant.
60
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 123 - avril 2011 - www.afaf.asso.fr
des agents ayant des propriétés
thérapeutiques intéressantes, elles ne
permettent pas de mettre en évidence
une toxicité possible de la molécule in
vivo, ni de déterminer leur capacité à
traverser
la
barrière
hématoencéphalique. De plus, comme la perte
de fonction complète de la frataxine
conduit à une létalité embryonnaire,
seuls des modèles murins conditionnels
ont permis de modéliser la maladie
chez les vertébrés.
Nadia Soussi-Yanicostas
Au cours de la dernière décennie,
différents essais thérapeutiques ont
été réalisés sur des systèmes
cellulaires, des modèles animaux et
des essais cliniques en phase III. A ce
jour, les molécules aux effets antioxydants comme l‟Idebenone, semble
apporter une réelle amélioration au
plan cardiaque, sans avoir d‟effets
secondaires
importants.
D‟autres
stratégies sont encore en cours,
utilisant des chélateurs du fer ou des
molécules qui, telle l‟érythropoiétine
ou la Pioglitazone, sont susceptibles
d‟induire une augmentation de la
synthèse de frataxine dans des
systèmes cellulaires.
Il est important de disposer d‟un
modèle animal facilement manipulable
et reproduisant la physiopathologie de
la maladie pour tester de nouvelles
thérapies. En effet, si les études
réalisées in vitro sur des fibroblastes
de patients permettent d‟identifier
Pour pallier les limitations des modèles
existants, en collaboration avec
l‟équipe de Pierre Rustin qui a une
grande expertise de la FRDA, nous
proposons d‟utiliser le poisson zèbre
pour modéliser cette maladie, puis
tester l‟effet de molécules qui
ralentiraient ou bloqueraient son
évolution. Dans un premier temps, nous
voulons comparer l‟efficacité des
différentes thérapies actuellement à
l‟essai chez les patients, puis procéder
à l‟étude de nouvelles molécules.
Le poisson-zèbre est en effet
particulièrement bien adapté pour la
modélisation des maladies humaines
provoquées par la perte de fonction
d’un gène. En effet, l‟inactivation
spécifique d‟un gène d‟intérêt par
micro-injection d‟un oligonucléotide
antisens modifié, ou morpholinooligonucléotide
(MO),
est
une
technique courante et d‟une grande
efficacité qui permet de produire
plusieurs centaines d‟embryons en une
journée. De plus, il est aisé de
contrôler le niveau de déplétion de la
protéine ciblée en fonction de la
61
Association Française Ataxie de Friedreich - Espoir 123 - avril 2011 - www.afaf.asso.fr
concentration du MO injecté. Ainsi, il
devrait être aisé de produire des
embryons
de
poisson
zèbre
n‟exprimant plus que 10 à 20% du
niveau sauvage de la frataxine, un
niveau qui devrait être compatible
avec la viabilité des embryons mais qui
devrait reproduire la physiopathologie
de la maladie. Chez le poisson zèbre, il
existe un gène homologue codant la
frataxine dont la séquence est connue.
Nous allons tout d‟abord déterminer la
concentration maximale tolérée de
MO par les embryons. Une fois cette
concentration
établie,
indépendamment
d‟éventuels
phénotypes
non-prévisibles
(une
mobilité réduite ou des anomalies du
cerveau) qui pourraient être d‟une
grande utilité pour l‟identification de
molécules à visée thérapeutique, nous
testerons la sensibilité de ces
embryons à un stress oxydant afin de
vérifier qu‟ils reproduisent un des
principaux
défauts
métaboliques
observés chez les patients.
La modélisation de l‟ataxie de
Friedreich chez le poisson zèbre
devrait nous permettre d‟étudier in
vivo
chez
un
vertébré,
les
conséquences d‟une déplétion partielle
en frataxine, similaire à celle mise en
évidence chez les patients. Nous
disposerons
alors
d‟outils
extrêmement puissants pour tenter de
mieux comprendre la physiopathologie
de cette maladie, puis étudier l‟effet
de molécules qui sont déjà en phase
d‟essai clinique, comme l‟Idebenone et
la Pioglitazone. A plus long terme,
l‟analyse fine des phénotypes induits
par la perte de fonction de la
frataxine dans les embryons de
poisson zèbre, devrait permettre
d‟orienter la recherche de nouvelles
molécules
ayant
une
activité
thérapeutique.
Centre de Recherche de l'Institut du
Cerveau et de la Moelle épinière
(CRICM) - Paris
62
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Travaux de recherche soutenus par l'AFAF –
J.
Dieusaert & M. Kerdougli
décembre 2010
Grâce à vous, grâce aux donateurs, nous pouvons encore soutenir plusieurs projets
de recherche en 2010-2011. Ces projets de recherche ont été étudiés par le Conseil
Scientifique cet été et nous avons donc décidé de les soutenir, après contrats
passés à l‟automne.
Ce sont surtout pour l‟instant des travaux de recherche dite fondamentale : elle
permet de décortiquer les mécanismes de la maladie. Cette recherche s‟intensifie ;
c‟est à partir de là que des idées d‟essais de médicaments surgissent. Alors ne nous
décourageons pas et continuons à soutenir tous ces chercheurs !
1. Dominika Sliwa (équipe JM
Camadro - Institut Jacques Monod Paris)
« Effet de la déficience en frataxine
dans la dynamique mitochondriale,
l‟homéostasie du Ca2+ et l‟apoptose »
5. Jean-Louis Mergny (Institut
Européen de Chimie Biologie - Pessac)
« Recherche
de
ligands
des
répétitions de trinucléotides de la
Frataxine stimulant la transcription du
gène »
2. Nadia Soussi-Yanicostas (Hôpital
Pitié-Salpêtrière
–
Paris)
« Modélisation
de
l‟ataxie
de
Friedreich chez le poisson zèbre et
recherche
de
molécules
thérapeutiques in vivo »
6.
Hélène
Puccio,
Marie
Wattenhoffer-Donzé
(IGBMCStrasbourg)
« Aide pour l‟achat d‟un système
optique pour manipuler les cellules
iPS »
3.
Guy
Lenaers (Institut des
Neurosciences
Montpellier)
« Recherche d‟une nouvelle solution
pharmacologique pour le traitement de
l‟Ataxie de Friedreich »
7. Alexandra Henrion-Caude (Hôpital
Necker- Paris)
« Utilisation des miRs dans une
stratégie thérapeutique de l‟ataxie de
Friedreich »
4. Aurélien Bayot (Equipe RustinHôpital Robert Debré - Paris)
« Dissection
des
mécanismes
moléculaires responsables du défaut
de réponse au stress oxydant dans les
cellules déficientes en frataxine »
8. Financement à temps partiel d’un
Kinésithérapeute et d‟un Psychologue
pour une étude dans le cadre de l‟essai
clinique Pioglitazone (Hôpital Robert
Debré - Paris)
63
Association Française Ataxie de Friedreich - Deux ans de recherche - www.afaf.asso.fr
Mitochondrie & métabolisme de la vitamine B6 –
Dominika Sliwa
mai 2010
Etude de la dynamique mitochondriale et du métabolisme de la vitamine B6 dans
les cellules déficientes en frataxine
L‟objectif principal de mon projet de thèse est une meilleure compréhension de la
physiologie et du métabolisme des cellules déficientes en frataxine.
changements dans le fonctionnement
de ces organelles. Par exemple, de
nombreuses études montrent que des
cellules
qui
possèdent
des
mitochondries
fragmentées
sont
beaucoup plus sensibles aux stress qui
induisent la mort cellulaire. Par
ailleurs, de telles dérégulations sont
également impliquées dans plusieurs
maladies neurodégénératives.
Dominika Sliwa
Pendant la première année de ma
thèse, j‟ai pu me concentrer sur
l’étude
de
la
dynamique
mitochondriale, qui n‟avait jamais été
étudiée dans le cadre de l‟ataxie de
Friedreich. Les mitochondries sont
des organelles essentielles à de
nombreuses
fonctions
cellulaires,
telles que la production d‟énergie, la
régulation
de
la
concentration
intracellulaire en fer et en calcium ou
encore les réponses cellulaires aux
stimuli qui induisent la mort cellulaire.
Les
mitochondries
sont
continuellement soumises
à des
mécanismes de fission et fusion in
vivo. Un déséquilibre entre ces deux
processus
induit
de
sérieux
L‟atrophie optique dominante et la
maladie de Charcot-Marie-Tooth de
type 2A sont dues à des mutations sur
les gènes codant des protéines
responsables de la fusion des
mitochondries. Des problèmes de
dynamique
mitochondriale
sont
également observés chez les patients
atteints des maladies de Parkinson,
Alzheimer et Huntington. Cependant,
nos résultats ont montré que dans les
lymphocytes et les fibroblastes
prélevés chez des patients atteints de
l‟ataxie de Friedreich la dynamique
mitochondriale ne semble pas altérée.
Ceci pourrait s‟expliquer par le fait
que les cellules majoritairement
touchées par la déficience en
frataxine sont les neurones. Nous
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allons donc poursuivre ces études sur
des neurones de rat pour déterminer
si la dynamique mitochondriale est
altérée dans ces cellules.
Mitochondrie au microscope
Nous
nous
sommes
intéressés
également au métabolisme de la
vitamine
B6 dans les cellules
déficientes en frataxine. Dans le
modèle
levure
de
l‟ataxie
de
Friedreich, nous avons constaté une
baisse importante de cette vitamine.
Il existe de nombreuses enzymes dont
l‟activité dépend de la forme active de
la
vitamine
B6,
elles
sont
principalement impliquées dans le
métabolisme des amino acides. Nous
avons étudié une de ces enzymes,
l‟aspartate aminotransférase, dans le
modèle levure. Nos résultats montrent
une diminution importante de l‟activité
enzymatique dans les mitochondries
de levures déficientes en frataxine,
alors que l‟isoforme cytosolique a une
activité normale.
Des travaux récents montrent que
l‟aspartate
aminotransférase
est
impliquée dans la sécrétion d‟insuline
(stimulée par le glucose) par les
cellules β du pancréas. Nous allons
donc poursuivre ces études dans les
cellules humaines pour essayer de
comprendre les mécanismes qui
conduisent au développement de
diabète chez les patients atteints de
l‟ataxie de Friedreich.
Institut Jacques Monod - Equipe "Mitochondries, métaux et stress oxydatif" UMR7592 - CNRS et Université Paris Diderot - Bât.Buffon - 15 rue Hélène Brion75205 PARIS CEDEX 13 – Tél: 01 57 27 80 30 - [email protected]
Le défaut de réponse au stress oxydant dans l'AF –
Aurélien Bayot
août 2010
Ces dernières années, de nombreuses découvertes ont permis de préciser les
causes de l‟ataxie de Friedreich (AF) et d‟avancer dans la compréhension des
évènements associés à la baisse d‟expression de la frataxine (protéine mise en
cause dans la maladie).
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Notre équipe (animée par Pierre
Rustin, Hôpital Robert Debré, Paris)
a récemment mis en évidence
l‟altération d‟une voie de signalisation
(c'est-à-dire une voie transmettant
des signaux dans les cellules et leur
permettant de s‟adapter à des
conditions nouvelles) dans les cellules
de patients atteints de l‟AF, qui
pourrait jouer un rôle important dans
la maladie.
Grâce
aux
études
menées
initialement sur des cellules mises en
culture à partir d‟une biopsie de la
peau de malades (ces cellules
s‟appellent fibroblastes), nous savons
depuis plusieurs années que le
manque de frataxine conduit à une
sensibilité accrue au stress oxydant
liée à un défaut de réponse des
systèmes de défense dans les
cellules [1]. En d‟autres termes, dans
les cellules déficientes en frataxine,
certains composés toxiques (les
radicaux libres de l‟oxygène) ne sont
pas
correctement
éliminés
et
pourraient
endommager
progressivement les constituants
cellulaires dans certaines conditions.
Plusieurs données dans différents
modèles sont venues conforter ces
observations [2]. En 2009, notre
équipe a identifié une des voies de
signalisation responsable de ce
dysfonctionnement [3]. Elle met en
jeu la protéine Nrf2, capable
d‟augmenter
les
capacités
de
défense lorsque le niveau cellulaire
de stress oxydant augmente. Dans
les fibroblastes AF, la protéine Nrf2
ne fonctionne pas correctement et
les défenses antioxydantes ne
peuvent plus répondre efficacement.
En l‟absence d‟autres signes dans ces
cellules, il est possible que cette
mauvaise réponse soit la toute
première conséquence d‟un manque
de frataxine. Les conséquences de
cette réponse insuffisante au stress
pourraient
être
bien
plus
importantes dans d‟autres types de
cellules de l‟organisme (neurones par
exemple) dans lesquelles le niveau de
stress oxydant est élevé.
A présent, nous essayons de
comprendre pourquoi et comment la
voie Nrf2 est altérée dans les
fibroblastes AF et dans d‟autres
modèles de cellules déficientes en
frataxine. En particulier, nous
voudrions comprendre le lien entre la
baisse d‟expression de la frataxine
et la perte de fonction de la protéine
Nrf2.
Aurélien Bayot
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L‟étude de différents modèles
(animaux et cellulaires) qui miment
l‟AF a permis aux chercheurs
d‟identifier plusieurs phénomènes
anormaux découlant de la perte de
fonction de la frataxine, mais leur
organisation dans le temps reste à
déterminer : des liens de cause à
effet sont à envisager. C‟est sans
doute en précisant cette question
que nous pourrons mettre le doigt
sur « l‟événement précoce » qui
intervient avant tous les autres et
qui pourrait déterminer de ce fait
l‟évolution de la maladie. Cela
pourrait ouvrir la voie à de nouvelles
thérapies, ciblant l‟étape initiale de
l‟AF.
Les cellules souches pluripotentes induites-
Marie
Wattenhofer-Donzé
Equipe Hélène Puccio – (IGBMC – Strasbourg), octobre 2010
Il est important de modéliser le plus fidèlement possible l‟Ataxie de Friedreich
(AF) pour comprendre quelles sont les voies dérégulées dans les tissus atteints
et quelles sont les stratégies à entreprendre pour y remédier.
(GAA)n de taille pathogénique. Les
cellules iPS, « induced pluripotent
stem cells » ou « cellules souches
pluripotentes induites »
sont des
cellules pluripotentes, c'est-à-dire
capable de devenir différents types
cellulaires tels que les neurones ou
les cellules cardiaques.
Marie Wattenhofer-Donzé
L‟instabilité de l‟expansion (GAA)n, la
mutation responsable de l‟ataxie de
Friedreich (AF), rend difficile la
génération de modèles cellulaires
pertinents. L’obtention de cellules
iPS génétiquement identiques à
celles de patients permet d’obtenir
des modèles cellulaires portant un
Nous avons généré des iPS à partir
de fibroblastes de patients AF
adultes. Les iPS ont été validées sur
des critères morphologiques et sur
leur capacité de se différencier à la
fois in vitro et in vivo. Nous avons
déjà pu différencier les iPS en
neurones
et
nous
allons
prochainement
commencer
leur
différenciation
en
cellules
cardiaques. Ces cellules seront
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étudiées pour comprendre les voies
altérées par un manque de frataxine.
Les cellules iPS ont déjà été
envoyées dans le laboratoire du Prof.
Pandolfo pour étudier des approches
thérapeutiques sur ces modèles
prometteurs, ainsi que dans le
laboratoire du Prof. Festenstein pour
l‟étude des altérations présentes au
niveau de l‟expansion GAA et
responsables de la baisse de
transcription de la frataxine.
Ces cellules seront très utiles pour
identifier des biomarqueurs ainsi
que pour tester des molécules
augmentant le taux de frataxine,
en particulier de part un effet sur
l’expansion GAA.
La culture des iPS est techniquement
similaire à celle des cellules souches
embryonnaires (ES), mais est très
différente d‟une culture cellulaire
classique. Elle nécessite donc un
poste de travail dédié. Nous cultivons
les colonies d‟iPS sur une couche de
cellules nourricières (les feeders) et
nous
effectuons
un
passage
mécanique en coupant les colonies
d‟iPS à l‟aide d‟une aiguille montée sur
une seringue. Pour ce faire, nous
avons besoin d‟observer les colonies
d‟iPS grossies pour pouvoir (1) choisir
les
colonies
avec
une
bonne
morphologie et (2) couper des
morceaux de la bonne taille (carrés
d‟environ 0,2 mm de côté), ceci
s‟effectuant
en
environnement
stérile sous hotte stérile. Suite à
une augmentation de la charge de
travail
sur
ce
projet,
nous
aménageons un nouvel espace de
travail plus étendu et dans un
environnement plus calme. Nous
avons déjà acquis une nouvelle hotte
(11 000 euros) et deux nouveaux
incubateurs (15 000 euros) mais il
nous manque encore un dernier
équipement,
un
système
d‟observation, pour lequel nous
sommes à cours de moyens.
Besoin : Pour continuer d‟équiper
cette nouvelle pièce de culture, nous
avons besoin d’un microscope relié
à une caméra pour pouvoir observer
les iPS en position de travail d’une
hotte
stérile.
Ce
système
d‟observation sera utilisé uniquement
par les membres de notre équipe
dans le cadre de ce projet et ne peut
donc pas être financé par notre
institut. Nous remercions vivement
l’AFAF pour son aide financière ;
cette acquisition est essentielle
pour la continuation de ce projet
ambitieux et prometteur que nous
avons commencé il y a maintenant
deux ans.
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La fonction auditive dans l'AF –
Fabrice Giraudet
septembre 2010
L‟évaluation de la fonction auditive
dans l‟ataxie de Friedreich (AF) n‟est
pas très courante. Pour preuve, la
plupart des descriptions de la maladie
omettent de mentionner que certains
patients éprouvent des difficultés de
compréhension dans des situations
quotidiennes comme lors d‟un repas de
famille. En fait, il n‟y a pas de notion
de surdité dans l‟AF, mais les troubles
auditifs
ressentis
sont
très
caractéristiques et sont intimement
liés aux troubles énergétiques.
Notre intérêt pour l‟AF remonte à
près de 5 ans, et nous avons reçu le
soutien de l‟AFAF avec une bourse de
recherche (cf. rapport sur le site).
Nos premiers travaux ont permis de
mettre en évidence pour la première
fois la notion de « fatigabilité
neurale »
(des
voies
nerveuses
auditives).
Le trouble auditif retrouvé dans l‟AF
correspond à une nouvelle entité
dénommée : neuropathie auditive. Il
s‟agit d‟un déficit particulier de la
fonction
auditive,
généralement
associé avec une plainte majeure des
patients : trouble de la compréhension
de la parole et plus particulièrement
marqué dans le bruit : « j‟entends,
mais je ne comprends pas ! ». Les
neuropathies
auditives
sont
caractérisées
par
une
fonction
cochléaire intacte et une physiologie
du nerf auditif très dégradée.
Parallèlement, nous nous sommes
rapprochés de Hélène PUCCIO et de
Pierre RUSTIN afin d‟évaluer leurs
modèles murins de la maladie.
Actuellement, les choses sont en
demi-teinte, car certaines souris ne
présentent
aucune
altération
électrophysiologique, et d‟autres n‟ont
pas les mêmes troubles que ceux
observés chez les patients. Il nous
faut comprendre pourquoi !
Les
objectifs
actuels
de
nos
recherches sont de poursuivre la
description des troubles nerveux
auditifs rencontrés chez les patients
par
le
biais
d‟investigations
électrophysiologiques non invasives, et
également de mettre au point de
nouveaux protocoles. Pour cela, depuis
près de quatre ans, nous avons mis en
place une consultation d‟exploration
électrophysiologique
auditive
spécialisée au sein du Service ORL de
Clermont Ferrand.
Nous partageons notre engouement et
notre motivation sur la description des
troubles auditifs rencontrés dans l‟AF
avec l‟équipe bruxelloise du Pr Paul
DELTENRE (CHU Brugman). En tant
que « mini-réseau » européen, nous
avons présenté notre projet au cours
de la réunion du consortium européen
EFACTS. L‟idée est de mettre en place
de nouveaux protocoles d‟évaluation.
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Pour résumer, nous souhaitons par une
approche innovante décrire le plus
précisément les troubles nerveux
auditifs rencontrés dans l‟AF, et ainsi
permettre une meilleure prise en
charge des troubles auditifs. Nous
espérons également que ces nouveaux
outils trouveront leur place dans
l‟évaluation clinique des patients mais
également dans l‟étude de l‟efficacité
de
nouvelles
thérapeutiques.
stratégies
Laboratoire de Biophysique des
Handicaps Sensoriels - Faculté de
Médecine (Pr P. Avan) et Service ORL
CHU Gabriel Montpied (Pr L. Gilain)Clermont Ferrand
Recherche sur les problèmes ORL : participez en répondant au questionnaire de
qualité de vie !
L’objectif de ce questionnaire de qualité de vie est de mieux cerner les
problèmes auditifs que vous rencontrez. Il sera étudié de façon anonyme. Vous
le trouverez sur le site www.afaf.asso.fr ou en me contactant. [email protected]
Une nouvelle molécule bientôt à l’étude aux USA –
RepliGen Corporation
Waltham, Massachussets, USA, mai 2010
RepliGen Corporation (Waltham – Massachussets – USA) a
annoncé qu‟il déposait une inscription d‟un nouveau médicament en
cours de recherche auprès de la FDA (Food and Drug
Administration - Agence de Sécurité alimentaire et sanitaire des
États-Unis) pour une étude de phase 1 (étude de toxicité) sur RG2833, un
inhibiteur sélectif de la dé-acétylase 3 des histones. Il s‟agit d‟une étude en double
aveugle, à dose simple ascendante, de Phase 1, chez près de 40 volontaires en bonne
santé. Et ce, afin d‟évaluer le profil pharmacocinétique ainsi que de sûreté du
RG2833.
NB : lien avec les recherches sur les HDAc – cf. article Myriam Raï - ESPOIR 119
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De nouveaux espoirs avec les inhibiteurs HDAc –
Babel
Family
Traduit par Jean Vivien Maurice, novembre 2010
Aux USA – Pr Joel Gottesfeld - FARA newsletter, été 2010
Le Pr Joël Gottesfeld (Département de Biologie Moléculaire à l‟Institut de
Recherche Scripps, à La Jolla en Californie) centre ses recherches sur
l‟identification d‟inhibiteurs des histones désacétylases (HDAc ) qui annulent la
mise sous silence (non-transcription) du gène pour la frataxine (protéine manquante
dans l‟AF).
modèles
souris.
Nos
molécules
actuelles augmentent effectivement
les quantités d‟ARN messager et de
frataxine dans les cellules des
patients. Néanmoins deux limites : la
pénétration dans le cerveau, et la
stabilité chez les animaux. Nous
travaillons sur de nouveaux dérivés qui
pourraient surmonter ces limites.
Pr. Joël Gottesfeld
Extraits de son interview :
« Les molécules comme les HDAc
annulent la mise au silence des gènes,
et font que les cellules des patients
produisent davantage de frataxine ;
elles peuvent donc s‟avérer avoir des
effets thérapeutiques.
En collaboration avec Myriam Rai et
Massimo Pandolfo à Bruxelles, nous
avons prouvé que les inhibiteurs
HDAC augmentent bien la quantité
de
frataxine
dans
les
tissus
affectés (cerveau et cœur) sur les
Ce travail est une collaboration avec
notre
partenaire
de
l‟industrie
pharmaceutique, Repligen Corporation
– Waltham (Massachussets, USA).
Nous testons ces molécules dans les
cellules des patients et dans de
nouveaux modèles cellulaires pour l‟AF
basés sur des cellules souches
pluripotentes
induites,
qui
sont
dérivées de cellules de la peau des
patients.
Ces
cellules
souches
pluripotentes induites peuvent se
transformer en neurones ou en
cellules du cœur dans le laboratoire,
et pourraient représenter des types
de cellules plus appropriés pour les
tests de nos composés. »
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Dans combien de temps pensez-vous
qu’il
y
aura
des
traitements
effectifs pour l’AF ?
« Je souhaiterais avoir une boule de
cristal ! Cependant, avec toutes ces
équipes travaillant mondialement, j‟ai
confiance pour cette décennie. »
*****
Et en Angleterre - Julie Greenfield - The Ataxian, novembre 2010
étant toléré et sûr chez l‟être humain,
puisqu‟on le trouve dans le commerce
pour une autre prescription.
Professeur Festenstein
Ataxia UK est heureuse d‟annoncer
qu’un essai pilote testant l’effet d’un
inhibiteur de l’HDAC dans l’ataxie
de Friedreich devrait prochainement
débuter. Cofinancement Ataxia UK et
FASI. Le Pr. Festenstein s’explique :
« Le but de ce projet est de s‟assurer
que nous pouvons activer le gène qui
est presque complètement désactivé
dans l‟ataxie de Friedreich. Nous
avions
auparavant
montré
qu‟un
médicament
inhibiteur de l‟HDAc
peut activer ce gène dans des cellules
de patients lors de tests en
laboratoire
et
peut
également
augmenter les niveaux de la protéine
frataxine…. Le médicament que nous
testons a déjà été démontré comme
Dans ce premier essai pilote, un petit
nombre de gens présentant l‟AF se
verront administrer des doses orales
d‟un inhibiteur de l’HDAc . Nous
établirons quels sont les niveaux
„normaux‟ de frataxine chez des
volontaires en bonne santé porteurs
du gène de l‟AF. Nous augmenterons
progressivement les doses jusqu‟à
observer une hausse des niveaux de
frataxine jusqu‟à atteindre la limite de
sûreté ; ceci sur une période de
quelques
jours
pour
chaque
participant. Nous saurons si nous
pouvons augmenter suffisamment les
niveaux de frataxine. Si c‟est un
succès,
d‟autres
essais
seront
nécessaires plus avant afin de tester
si ce médicament a un effet sur la
progression ou la sévérité de la
maladie.
Vous pouvez retrouver l’intégralité de ces deux articles en français ainsi que
les vidéos de l’interview de Ron Bartek (FARA) par Babel Family,(point sur les
essais cliniques dans le monde, lors du congrès EUROATAXIA.) sur le site :
http://www.babelfamily.org/fr
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Le congrès EuroAtaxia –
Marianne Kerdougli, Madeleine
Schmeder
octobre 2010
Organisé cette année en Italie à Cervia par l‟association italienne AISA, il
concernait toutes les formes d‟ataxies. Il a réuni associations et chercheurs ; 11
des 14 associations européennes adhérentes étaient présentes.
AISA est organisée en 16 délégations
régionales fédérées en une association
nationale d‟environ 1000 adhérents. Le
meeting d‟EuroAtaxia a été aussi
l‟occasion d‟un rassemblement national
italien.
Le Pr Massimo Pandolfo (Bruxelles)
fonde beaucoup d‟espoir sur les
inhibiteurs HDAc pour un traitement
futur de l‟AF.
Le projet prévoit une obligation de
retour vers les associations :
organisation
régulière
avec
les
associations (1 par an au moins) afin de
les
informer des avancements et
d‟avoir un retour des malades, ceux-ci
étant, avec leurs praticiens, au centre
du
projet.
Leur
concours
est
nécessaire pour aider à définir des
bio-marqueurs pour la qualité de vie.
Le Dr Schulz (Allemagne) est chargé
des relations avec les associations.
Présentation
ensuite
de
l‟essai
Miconos (essai avec Idebenone – cf.
ESPOIR 121), qui est loin d‟avoir donné
les résultats attendus : peu ou pas de
différence entre les malades qui ont
reçu l‟Idebenone à des doses diverses
et le placebo.
Pr. Massimo Pandolfo
Il a également présenté le projet
européen EFACTS (cf. ESPOIR 121).
Difficultés pour la validation des
essais : nécessité de trouver de
nouveaux marqueurs, bio marqueurs et
marqueurs de qualité de vie. Les
échelles de marqueurs utilisées ne
permettent pas actuellement d‟évaluer
de façon satisfaisante le bénéfice d‟un
traitement.
Prochaine rencontre en mai 2011 à
Strasbourg à l‟occasion de la
conférence scientifique de FARA
(association USA) qui regroupera 200
spécialistes américains + le groupe
EFACTS. Les Conférence de FARA
et
EFACTS
seront
uniquement
consacrés à l’AF. Toutefois, de
nombreux chercheurs sont également
impliqués dans d‟autres ataxies, et il
devrait être possible d‟inviter d‟autres
spécialistes.
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Nouveaux
statuts/règlementation
britannique. Election d‟un conseil
d‟administration de 7 membres : Sue
Millmann (UK), Barbara Flynn (IRL),
Marco Meinders(NL), Peter Reussner
(DE), Cathalijna van Doorne (NL),
Francesco Palau (SP), Madeleine
Schmeder (FR).
Newsletter
à
revoir
avec
la
participation de chaque association.
Coopération pour le financement
commun des recherches : c‟est déjà le
cas, par ex. entre FASI et Ataxia UK
qui financent en commun 6 projets, ou
du travail de P. Rustin financé par 7
organisations européennes.
Projet de banque de cellules-souches
soutenu par FARA, Ataxia UK et Gofar
(H. Puccio) qui serait mis à la
disposition
des
chercheurs.
Ce fut un moment convivial et important pour les rencontres avec les chercheurs et
les associations européennes.
L’équipe Euroataxia 2010
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Mnesis : la situation en avril 2013 –
Juliette Dieusaert
mars 2013
Dans le cadre de la réforme du médicament, la volonté de l’ANSM (Agence
Nationale de la Sécurité du Médicament) est de mieux réguler l’octroi des ATU
(Autorisation Temporaire d’Utilisation) nominatives. Par conséquent, elle va revoir
les molécules sous ATU nominatives, à fortiori celles de plus de 10 ans ; c‟est le cas
du Mnesis.
Les décisions de l‟ANSM se feront notamment en fonction de deux critères
majeurs : les risques et les bénéfices de cette molécule. Les bénéfices, même
minimes, pourraient en l‟absence de risques, peser sur la balance en cas d‟absence
d‟alternance thérapeutique curative dans une maladie rare considérée comme grave,
situation particulière pointée par l‟ANSM lors de la première réunion avec les
associations de patients.
La molécule IDEBENONE
C‟est une molécule développée pour
traiter les déficits cognitifs liés à des
pathologies
cérébrales
d‟origine
vasculaire ou dégénérative (d‟où le
nom Mnesis) qui a obtenu une
Autorisation de Mise sur le Marché en
Italie dans cette indication en 1993.
En 1999, Pierre Rustin (labo Pr
Munnich) observe
que
l‟idebenone
diminue les conséquences d'un stress
oxydant dans les cellules des
personnes atteintes de maladies
mitochondriales, d‟où l‟idée d‟essais
cliniques dans l‟Ataxie de Friedreich
qui a une composante mitochondriale.
Les laboratoires : Takeda et Santhera
Le fabricant à l‟origine de la molécule
est Takeda dont la gouvernance est au
Japon. L‟idebenone (MNESIS) est
importé d‟Italie et distribué par
Takeda France ou Idis, un distributeur
de médicaments.
En 2005, le groupe Takeda a conclu un
partenariat de développement avec
Santhera
Pharmaceuticals,
un
laboratoire suisse spécialisé dans le
développement de molécules dans les
pathologies rares et neurologiques. Ce
qui explique que Santhera soit le
promoteur
des
derniers
essais
cliniques. Mais la publication officielle
des résultats par Santhera,
qui
permettraient
aux
investigateurs
cliniciens
d‟analyser
toutes
les
données, tarde !
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Les essais cliniques réalisés avec l’Idebenone
Essai en ouvert (1999-2000), Necker
(Pr Munnich) et la Pitié (Dr A Dürr) :
effet positif de l‟idebenone sur la
cardiomyopathie chez les enfants AF.
Promoteur : laboratoires Takeda.
Essai IONA (2008) : essai américain
(Dr D Lynch) de phase 2 avec trois
posologies et double aveugle : bénéfice
thérapeutique chez certains enfants
en
stabilisant
les
fonctions
neurologiques, les mouvements fins et
l‟élocution (publication juillet 2011).
Promoteur : laboratoire Santhera
Essai MICONOS (2008-2010), essai
européen de phase 3 avec 232
patients en double aveugle contre
placebo. Résultats non significatifs sur
les critères principaux (neurologique
et
cardiologique).
Promoteur :
laboratoire Santhera. Publication non
encore disponible deux ans après !
Essai PROTI (2010-2012) : extension
de l‟essai MICONOS ; résultats non
encore publiés.
Utilisé actuellement dans d‟autres
essais : le syndrome de MELAS
(maladie mitochondriale), l‟atrophie
optique
de
Leber
(maladie
mitochondriale), la myopathie de
Duchenne.
Sa prescription
Par ATU nominative depuis plus de
dix ans, sous la responsabilité du
prescripteur. Posologie initiale 5
mg/kg ; actuellement très variable
jusqu‟à 40 mg/kg.
Les risques : aucune observation de
toxicité
n‟a
été
officiellement
rapportée, à faible, moyenne ou forte
doses.
Son efficacité est encore discutée
malgré plusieurs essais faits dans le
monde depuis 1999. Aucun n‟a été
suffisamment concluant sur
les
paramètres étudiés : essentiellement
neurologiques et cardiologiques. Si les
résultats des essais ne sont pas
significativement positifs, il y a des
bénéfices individuels rapportés
qui ne peuvent être occultés (notion
de
sous-groupe
de
patients
répondeurs). En effet, de façon
récurrente,
un
nombre
non
négligeable de patients signale une
amélioration
de
l’élocution,
de
l’exécution des mouvements fins et
de la fatigabilité. Ceci est à prendre
en compte !
740 patients bénéficient actuellement
de cette molécule, soit la moitié des
personnes Friedreich estimées en
France.
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La problématique actuelle
Les ATU pour l’Idebenone ne
pourront plus être délivrées d’ici
quelques
années
sans
preuve
d’efficacité publiée, ou essais en
cours.
(centre de référence des maladies
neurogénétiques).
Certains cliniciens modifient déjà leur
prescription, soit en proposant de
cesser le Mnesis vu le manque de
données, soit en augmentant les doses
(jusqu‟ à 40 mg/kg)… à la demande des
patients
constatant
certaines
améliorations.
Pour l’instant, les cliniciens suivent
le souhait des patients et de leur
famille, après avoir discuté avec les
patients de la poursuite ou de l‟arrêt
du traitement par Idebenone.
Le 16 février 2013, dans ce
contexte, une réunion exceptionnelle,
organisée par l‟AFAF et Pierre Rustin
sur cette problématique, a eu lieu à
l‟hôpital
Robert
Debré.
21
participants : 5 associations (AFAFCSC-ASL-Ouvrir les yeux-AFM), des
neuropédiatres,
neurologues
des
Centres de référence ou compétence
des CHU de la Pitié, de Debré, de
Bordeaux,
de
Necker,
(Angers
excusés), représentant de l‟INSERM,
Alliance Maladies Rares.
L‟objectif principal est de trouver
ensemble
une
solution
pour
pérenniser l’accès à l’idebenone, qui
est la seule molécule, sans risques,
dont beaucoup de malades peuvent
bénéficier actuellement.
Le 20 février 2013, le sujet a de
nouveau été abordé lors de la réunion
du Conseil médical et paramédical du
20 février dirigé par Alexandra Dürr
De ces 2 réunions, se sont dégagés
plusieurs points :
Une lettre commune à Santhera –
Associations/Centres
de
référence/CMPM- va être envoyée à
l‟investigateur principal de l‟essai pour
obtenir la publication officielle des
résultats de l‟étude MICONOS, non
encore obtenue par les investigateurs
et Santhera depuis mai 2010 !
Takeda France cherche une solution
pour que les patients AF puissent
continuer à obtenir du Mnesis en
France en collaboration avec les
professionnels
de
santé,
les
associations de patients et les
autorités.
Les associations CSC et AFAF
souhaitent vivement un travail, voir un
essai sur l’apport de l’idebenone dans
l’élocution et la fatigabilité. L‟analyse
des enregistrements de la voix dans
MICONOS pourrait être un outil
majeur.
Un
livre
blanc
avec
témoignages/idebenone, témoignages
de patients ET soignants (médecins,
77
Association Française Ataxie de Friedreich - Deux ans de recherche - www.afaf.asso.fr
kiné, orthophonistes), est en cours de
réalisation.
Une réunion avec l’ANSM aura lieu
très probablement en mai.
Nous comptons aussi sur le soutien
d’Alliance Maladies Rares dans ce
dossier
emblématique
pour
les
patients touchés par une maladie rare
où il n‟y a
pas d‟alternative
thérapeutique curative.
Le 11 mars 2013, l’ANSM, suite à
un courrier de Pierre Rustin, nous
apporte une 1ère réponse :
« La
problématique
"Idebenone",
comme vous le dites avec acuité,
n'est absolument pas négligée. Nous
nous assurons continuellement que les
patients devant en recevoir, puissent
en bénéficier, par le biais pour
l'instant d'ATU nominatives.
Des solutions plus pérennes, telles
qu'ATU de cohorte et AMM/RTU,
seraient évidemment préférables, au
mieux appuyées sur des essais
cliniques,
certes
pas
forcément
faciles à promouvoir ou financer. Nous
y réfléchissons.
Nous pourrions envisager dans un
premier
temps
un
rendez-vous
téléphonique,
éventuellement
suivi
d'une
rencontre.
Nous
sommes
toujours à l'écoute des propositions
des
professionnels
de
terrain,
cliniciens et/ou chercheurs, dont vous
êtes, ainsi que des associations de
patients. Cordialement »
Dr Florent PERIN-DUREAU (ANSM)
Merci à Pierre Rustin, Alexandra Dürr
et tous
pour leur engagement. A
suivre !
Ps : un document sur l‟état des lieux
du Mnesis dans le monde est en cours.
Production de frataxine, un cercle vicieux à freiner ! –
Alexandra Henrion-Caude
Laboratoire du Pr Arnold Munnich, hôpital Necker, Paris, février 2013
L‟AFAF fournit un soutien essentiel aux équipes qui étudient l‟Ataxie de Friedreich.
C‟est un travail d‟équipes en relais dont les observations forment différentes
pièces d‟un puzzle qui aident à comprendre, connaître et proposer de nouvelles
pistes de prise en charge des patients.
Faisons
un
petit
tour
côté
laboratoire... A l'Inserm U781, que
dirige le Pr Arnold Munnich à Necker,
tout commence souvent par une
intuition, ici celle que les microARNs
pourraient
intervenir
dans
les
78
Association Française Ataxie de Friedreich - Deux ans de recherche - www.afaf.asso.fr
maladies génétiques… Intuition mais
aussi défi. Comment aborder la
question ?
Alexandra Henrion-Caude
Aidée
de
Claude
Mugnier,
bioinformaticien, et de toute l‟équipe
de GenAtlas, je venais tout juste de
développer un outil informatique
permettant de tester une éventuelle
spécificité de régulation des gènes par
les microARNs. Qui dit régulation par
les microARNs dit diminution de la
production du gène régulé. Question
qui en découle : s‟il existe un contrôle
de la production de la frataxine par
les microARNs, est-il le même pour
tous : ceux qui développent la maladie,
ceux qui présentent une évolution
atypique,
et
ceux qui ne
la
développeront pas?
Anne-Sophie Jannot, Elie Hatem et
François Cartault... Les résultats
s‟enchaînent
indiquant
que
les
répétitions sont effectivement liées à
un
contexte
défavorable
de
production de la frataxine chez les
patients : des variations spécifiques
situées dans un segment du gène qui
n‟avait
pas
été
exploré.
Les
scientifiques parlent « d‟haplotype ».
Cette
répartition
inégale
des
variations de ce segment du gène
entre personnes atteintes et non
atteintes est trouvée chez les
patients de Necker, et est confirmée
chez des patients Friedreich de l‟île
de La Réunion. Par la suite, leur travail
montre que ces variations peuvent
aggraver le défaut de production de
frataxine via les microARNs, dont le
microARN miR-124… ce même miR124 dont les taux sont trouvés
anormalement
élevés
chez
les
patients, comme l’indique les travaux
d’une autre équipe… En fait, une
sorte de cycle vicieux qu’il serait
souhaitable
de
freiner.
C‟est
d‟ailleurs ce qui est proposé dans le
brevet déposé par l‟équipe comme dans
la publication de ce travail (Bandiera
et al, PLoS One, 2013).
PS : voir les 1ers travaux d‟Alexandra
Henrion-Caude sur les microARNs
dans Espoir 126
L‟hypothèse de travail est ainsi posée !
Et au travail : Simonetta Bandiera,
79
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Etude phase 2B avec l’EPI sur les fonctions visuelles –
Babelfamily.org
mars 2013
Edison Pharmaceuticals a annoncé aujourd‟hui l‟initiation d‟une étude de phase 2B
appelée « Étude Sécurité et Efficacité de l‟EPI-473 sur les fonctions visuelles des
patients atteints d‟ataxie de Friedreich ».
L‟essai est une étude contrôlée contre placebo qui durera six mois, suivi d‟une phase
supplémentaire au cours de laquelle tous les patients recevront du EPI-743. Les
patients devront avoir entre 18 et 45 ans, être atteints génétiquement par l‟ataxie
de Friedreich et répondre à certains critères de sévérité de la maladie. Le point
final primaire de cet essai est la fonction visuelle, avec des points finaux
secondaires qui incluent la fonction neurologique et neuromusculaire et les
biomarqueurs de la maladie en question. Plus d‟informations sur les spécificités de
l‟étude se trouvent sur ClinicalTrials.gov.
Cet essai est conduit avec l‟aide de chercheurs du Réseau de Recherche Clinique de
l‟Alliance de Recherche sur l‟ataxie de Friedreich (FARA) et le Registre des
Patients de FARA.
« FARA est enthousiaste à l‟idée du commencement de l‟essai clinique de EPI-743
pour l‟ataxie de Friedreich, et travaille en étroite collaboration avec Edison
Pharmaceuticals et les chercheurs du Réseau de Recherche Clinique pour accélérer
les inscriptions », affirme Ronald Bartek, Président de FARA. « Cet essai symbolise
l‟importance des partenariats public-privé dans le développement de médicaments
et l‟apogée des recherches translationnelles sponsorisées par FARA, initiées à la
fois par FARA et le soutien des Instituts Nationaux pour la Santé (NIH). »
Trois sites pour cet essai clinique ont été sélectionnés aux Etats-Unis: à
l‟Université de Floride du Sud, Tampa, Floride ; à l‟Hôpital des Enfants de
Philadelphie, Pennsylvanie ; et à l‟Université de Californie, Los Angeles, Californie.
Les inscriptions ont été lancées à l‟Université de Floride du Sud
« Vu les découvertes cliniques encourageantes à la date d‟aujourd‟hui concernant
l‟EPI-743 pour les maladies mitochondriales, nous avons hâte de déterminer si ces
résultats pourront être obtenus pour l‟ataxie de Friedreich », affirme Theresa A.
Zesiewicz, MD, chercheuse du Réseau de Recherches Clinique FARA, Professeure
en Neurologie, Directrice du Centre de Recherches sur l‟ataxie à l‟Université de
Floride du Sud et un des principaux chercheurs de l‟essai.
80
Association Française Ataxie de Friedreich - Deux ans de recherche - www.afaf.asso.fr
Traitement de la cardiomyopathie de l’ataxie de
Friedreich par thérapie génique – Pr. Aubourg
juin 2013
nerveux (les neurones des ganglions
postérieurs, de la moelle épinière et
du cervelet).
Professeur Aubourg, à Nouan
Dans les maladies héréditaires dont la
mutation du gène conduit à une perte
de fonction de la protéine encodée par
ce gène (c‟est le cas de l‟ataxie de
Friedreich), l‟apport d‟une copie du
gène normal dans les cellules du ou des
organes concernés par la pathologie
représente
une
approche
thérapeutique
possible
et
potentiellement efficace, si l‟apport
du gène normal est faite avant que ne
surviennent des lésions irréversibles
du ou des organes atteints.
Dans le cas de l‟ataxie de Friedreich,
et pour à la fois en traiter l‟atteinte
cardiaque et l‟atteinte neurologique, il
faut apporter le gène codant pour la
frataxine dans le cœur (dans les
cellules appelées cardiomyocytes), et
dans certaines cellules du système
Le meilleur moyen d‟apporter un gène
thérapeutique dans un organe repose
toujours aujourd‟hui sur l‟utilisation de
virus « modifiés ». On en garde leur
capacité à pénétrer dans des organes
et des cellules (le terme consacré est
« infection »), d‟y introduire du
matériel génétique permettant ainsi
d‟y faire exprimer la protéine ou
l‟enzyme codée par ce gène (ici la
frataxine) ; mais ces virus ont été
modifiés de telle sorte qu‟ils ne
puissent pas se multiplier et devenir
infectieux (se propager à d‟autres
organes que ceux ciblés, infecter
d‟autres individus). Parmi ces « virusmédicaments », d‟importants progrès
ont été faits pour utiliser différents
types (on parle de sérotypes) d‟un
virus qui n‟est à l‟origine d‟aucune
pathologie chez l‟homme : les virus
adeno-associés (AAV pour adenoassociated virus).
Dans un modèle de souris présentant
une atteinte cardiaque très similaire
à celle observée chez les patients
atteints d‟ataxie de Friedreich, mais
plus sévère,
plus précoce et qui
conduit au décès des souris à l‟âge de
12 semaines, Hélène Puccio et son
équipe ont montré qu’une seule
injection d’un vecteur AAV codant
81
Association Française Ataxie de Friedreich - Deux ans de recherche - www.afaf.asso.fr
pour la frataxine permettait non
seulement
de
prévenir
la
cardiomyopathie quand l’injection du
vecteur était faite juste avant le
début des symptômes d’atteinte
cardiaque,
mais
plus
important
encore, de guérir au sens vrai du
terme cette atteinte cardiaque
quand l’injection du vecteur AAV
était faite après le début des
symptômes d’insuffisance cardiaque
chez ces souris.
traitement par thérapie génique. Une
attention toute particulière est
donnée aussi à la qualité de vie
espérée,
attendue
après
ce
traitement puisque dans un premier
temps, on ne traitera que l‟atteinte
cardiaque des patients (voir article qui
suit sur la qualité de vie).
NB : Des études sont en cours pour
traiter
cette
fois-ci
l’atteinte
neurologique dans un autre modèle de
souris d’ataxie de Friedreich.
Ces résultats obtenus chez la souris
sont suffisamment encourageants pour
proposer d’ici deux ans un essai
clinique de thérapie génique chez
des patients atteints d’ataxie de
Friedreich
ET
présentant
une
cardiomyopathie évolutive encore
cependant à un stade précoce. On
sait qu‟au moins 40% des patients
atteints
d‟ataxie
de
Friedreich
décèdent d‟une atteinte cardiaque, et
ce bien avant que leur atteinte
neurologique ne devienne très sévère.
Grâce
à
l‟effort
conjoint
de
cardiologues américains et français
ayant suivi de manière prospective
l‟atteinte cardiaque d‟au moins 200
patients, on va pouvoir définir quel
patient
atteint
d’ataxie
de
Friedreich
est
à
risque
de
développer une atteinte cardiaque
sévère et donc quels patients
pourraient
bénéficier
de
ce
Helène Puccio
Cet essai de thérapie génique
devrait débuter dans 2 ans et
concerner 50 patients (la moitié des
patients étant traités en France,
l’autre moitié aux USA). Cet essai
est conçu de telle sorte que s‟il est
couronné de succès, l‟ensemble des
patients
atteints
d‟ataxie
de
Friedreich dans le monde puisse
bénéficier de ce nouveau traitement.
Le délai de deux ans avant le début de
l‟essai est justifié par un ensemble de
résultats précliniques nécessaires afin
d‟obtenir une autorisation d‟essai
82
Association Française Ataxie de Friedreich - Deux ans de recherche - www.afaf.asso.fr
clinique de l‟ANSM en France et la
FDA aux USA :
1)
s‟assurer que le type de vecteur
AAV utilisé chez la souris soit aussi
efficace chez le singe (l‟animal le plus
proche de l‟homme pour le tester)
pour cibler la frataxine dans le cœur
2)
déterminer chez le cochon
(meilleur modèle animal pour étudier
l‟effet d‟un traitement sur le cœur) la
dose de vecteur qu‟il faudra injecter
pour être efficace chez l‟homme
3)
faire des études de toxicologie
(c‟est à dire injecter 10 fois la dose de
vecteur prévue chez l‟homme) chez le
rat
4)
fabriquer le vecteur AAV selon
de nouveaux procédés qui permettront
de traiter tous les patients avec le
même lot de vecteur ; tous les
patients seront traités avec le même
lot de « vecteur-médicament ».
NB : vous serez tenus au courant de
l’avancée des travaux par l’AFAF.
Qualité de Vie
Important :
participez
au
questionnaire sur la qualité de vie
la maladie, une des atteintes de la
maladie, une de ses composantes.
Lorsque l‟on propose un nouveau
traitement dans une maladie, grave ou
pas, il est très important de réfléchir
avant de proposer ce traitement : quel
bénéfice le patient pourrait en tirer, à
court terme comme à long terme. Et
qui, mieux que le patient lui-même,
peut le dire. Pour chaque maladie,
chaque type de handicap, et suivant
l‟âge, le vécu et le ressenti du patient
n‟est pas forcément le même du tout.
C’est la raison pour laquelle nous
vous demandons de nous dire en
remplissant ce questionnaire très
simple
comment
vous
évaluez
aujourd’hui votre état de santé et
votre propre qualité de vie. (Notions
différentes : par ex., on peut avoir
une très mauvaise santé et ressentir
une qualité de vie correcte).
On parle bien ici de traitement, c‟est à
dire arrêter l‟évolution de la maladie,
en améliorer les symptômes, au moins
certains, pas forcément tous. Pas de
guérison au sens strict du terme, c‟est
à dire la disparition de tout symptôme.
D‟un retour à une vie strictement
normale. Cette question est encore
plus cruciale quand le traitement ne
vise qu‟à traiter un des symptômes de
Ce questionnaire
parties :
comporte
trois
1)
la première partie est un
questionnaire où on vous demande de
mettre une croix en face de la
phrase qui décrit le mieux votre
état de santé aujourd’hui. Ensuite, il
vous est demandé d’attribuer une
note entre 0 et 100 : 0 pour le moins
bon état de santé et 100 pour le
meilleur.
83
Association Française Ataxie de Friedreich - Deux ans de recherche - www.afaf.asso.fr
2)
la
deuxième
partie,
complètement indépendante, est une
échelle graphique (de 0 à 100) où on
vous demande d’évaluer votre qualité
de vie aujourd’hui : 0 pour la moins
bonne, 100 pour une très bonne qualité
de vie.
3)
la troisième partie est une
question simple : « En cas d’atteinte
cardiaque, quel bénéfice attendriezvous d’un traitement efficace sur
cette atteinte cardiaque dans votre
quotidien, sur votre qualité de vie, à
court terme comme à long terme ? ».
Répondez à cette question en cinq
lignes au plus.
Ce questionnaire concerne TOUS
patients
atteints
d’ataxie
Friedreich, quelque soit l’âge
dessus de 12 ans, et la sévérité
sa maladie.
les
de
au
de
Il est important que ce soit les
personnes
AF
qui
s‟expriment,
notamment chez les mineurs, avec
l‟aide de l‟entourage bien sûr si
nécessaire.
Ce questionnaire est totalement anonyme. Les informations contenues dans ce
questionnaire seront gardées confidentiellement. Aucune information personnelle
permettant de vous identifier ne devra être mise sur ce questionnaire, hormis
votre âge.
Les résultats de cette enquête vous seront communiqués.
Ce questionnaire va vous être envoyé personnellement par courrier avec une
enveloppe timbrée pour le retour, adressée au siège de l’AFAF.
L’ensemble des réponses sera envoyé ensuite à l’équipe Aubourg/Puccio.
Important : si vous ne souhaitez pas y répondre, pourrez-vous quand même renvoyer
le courrier, en indiquant pourquoi en quelques mots ?
Merci infiniment pour votre participation
84
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Exposé des chercheurs et médecins à Nouan –
Christiane
Breniaux
juin 2013
Ce samedi 23 mars 2013, la grande salle de conférence du Centre de Rencontre des
Générations de Nouan-Le-Fuzelier est comble. De nombreux patients et leurs
familles se sont déplacés pour entendre nos nombreux chercheurs et médecins.
L‟auditoire est très attentif car l‟espérance est toujours grande.
Nous ne donnons ici que les grandes
lignes de leur exposé, l‟ensemble ayant
duré trois heures… Recherches
détaillées dans les revues ESPOIR.
Alexandra Dürr et Isabelle Husson
Alexandra
Dürr,
Hôpital
Pitié
Salpêtrière, responsable du Conseil
médical et paramédical, a coordonné
les différentes interventions.
 Travaux sur le poisson zèbre - Constantin Yanicostas
Equipe : Nadia Soussi Yanicostas Hôp. R. Debré- Paris
Support de recherche : le poissonzèbre
Objectif : mieux comprendre le rôle
de la frataxine
La frataxine : cette protéine
intervient dans la synthèse des noyaux
fer-soufre, la régulation du fer, la
résistance des cellules au stress
oxydant. Des essais ont été faits en
vue
d‟obtenir
l‟augmentation
et
l‟expression de la frataxine.
Les modèles existant : la levure,
organisme
unicellulaire
les
caenorhabditis elegans : vers de
quelques millimètres, un millier de
cellules - les drosophiles. Mais ces
trois organismes vivants ont une durée
de vie très limitée.
Le poisson-zèbre :


Avantage : il est transparent, ce
qui permet de visualiser ses
organes
C‟est un vertébré : son cerveau est
proche de celui des mammifères,
85
Association Française Ataxie de Friedreich - Deux ans de recherche - www.afaf.asso.fr

ses tissus sont proches de ceux
des souris et de ceux des humains.
Son
inactivation
génique
et
transgénique est aisée.
Les chercheurs Yanicostas, Monnier et Camadro
à l’assemblée générale
Conséquences de la perte de
frataxine sur le poisson zèbre :


la
Perte totale : le poisson n‟est pas
viable.
Perte partielle :
o Croissance des axones des
motoneurones
o Différenciation
des
neurones du cerveau, de
l‟oreille interne.
o Hypotrophie cardiaque
o Pour
l‟instant,
aucune
sensibilité
au
stress
oxydant.
Objectifs de l’étude :
 Caractérisation des phénotypes
induits par la perte de fonction
partielle de la frataxine
 Etude biochimique des protéines à
noyau Fer/Soufre
 Etude de l‟activité des différents
complexes de la chaîne respiratoire
 Etude de la sensibilité au stress
oxydant
 Construction
d‟une
lignée
transgénique Frataxine-GFP
NB : à travers un film nous avons vu la
frataxine
intracardiaque
fluorescente !
 Modèles drosophiles et criblage - Véronique Monnier
Equipe : Hervé Tricoire - Institut
Jean Monod - Paris
Support de recherche : la drosophile
Objectif : criblage sur les modèles
drosophiles
L‟outil utilisé pour ces recherches est
le criblage* pharmacologique chez la
drosophile,
petite
mouche
à
développement rapide : 10 jours, qui
permet
d‟obtenir
des
résultats
rapides.
Le criblage* ("screening" en anglais)
consiste à effectuer un tri parmi des
molécules naturelles connues ou des
substances de synthèse grâce à des
tests permettant d‟identifier celles
qui sont les plus susceptibles d‟avoir
l‟activité recherchée.
Ici le procédé part de l‟inactivation de
la frataxine chez la drosophile,
spécifiquement dans certains tissus ou
types
cellulaires
:
neurones,
86
Association Française Ataxie de Friedreich - Deux ans de recherche - www.afaf.asso.fr
cœur…L‟inactivation de la frataxine
aboutit à la dilatation du cœur.
Le but de la recherche est donc
l‟amélioration de la fonction cardiaque.
14 composés ont été testés : quatre
molécules améliorent la fonction
cardiaque.
Parmi elles, l‟équipe travaille sur une
forme de bleu de méthylène, qui, par
ses
propriétés
antioxydantes,
prévient l‟apparition de la dilatation
cardiaque. Dans le traitement postsymptomatique, on observe que ce
procédé ne fonctionne pas à forte
dose ; la question dosage est donc
cruciale.
 Projet ANR « Combattre l’AF » - Jean-Michel Camadro
ANR : Agence Nationale de Recherche
Equipes : Institut Jacques Monod
(Paris) avec Hervé Tricoire, Pierre
Rustin (R Debré Paris) et Marcel
Hibert (CNRS Strasbourg)
Support
de
recherche :
modèles
pour
cribler
chimiothèques
divers
des
Objectif : définir ce qui est
spécifique au déficit en frataxine.
L‟objectif est de mieux comprendre le
rôle de la frataxine et l‟expression de
son déficit (phénotype)*. Et elle
s‟attache à la construction d‟outils
(thérapie génique), à la synthèse de
l‟hème*, à
l‟évaluation de la
mutagénèse spontanée.
*Une chimiothèque est une banque de
données
de
molécules.
Les
chimiothèques peuvent contenir de
plusieurs dizaines à plusieurs millions
de composés chimiques.
*Phénotype : ensemble des caractères
observables
d'un
individu.
Le
phénotype correspond à la réalisation
du génotype (expression des gènes),
mais aussi des effets du milieu, de
l'environnement.
Le banc des chercheurs
A partir de chimiothèques*, l‟équipe
recherche
des
stratégies
de
développement de molécules afin
d‟obtenir des médicaments.
*Hème : élément constitutif de
l‟hémoglobine, contenant du fer. En se
combinant de façon réversible à
l‟oxygène, il permet son transport des
poumons aux organes…
87
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 Une nouvelle voie -Aurélien Bayot
Support
de
recherche
:
les
fibroblastes des patients (cellules de
la peau), cellules du sang.
Continuer
à
comprendre
mécanismes
de
l‟AF
dont
conséquences de l‟expansion
triplets GAA :


Aurélien Bayot
Equipe : Pierre Rustin
Robert Debré- Paris
–
Hôpital
Objectif : chercher de nouvelles
voies dont l’implication du gène voisin

les
les
des
Perturbation de la mitochondrie
Anomalies du réseau d‟actine dans
les cellules du patient (réseau
fibreux qui maintient la structure
des cellules) : le gène voisin
PIP5K1B
impliqué
dans
l‟organisation du réseau d‟actine
Perturbation du gène voisin
 Les cellules souches induites à la pluripotence - Laetitia Aubry
Equipe : Pr Marc Peschanski – I
Stem - Génopole AFM - Evry
Support de recherche
souches pluripotentes
Objectif :
neuronales
produire
:
cellules
des
cellules
Les cellules souches sont induites à la
pluripotence :
Elles se reproduisent à l‟infini.
Elles
sont
capables
de
se
différencier en tous les types
cellulaires d‟un organisme.
Il existe deux principales sources de
cellules souches :
 Les cellules souches embryonnaires
humaines.


Les fibroblastes obtenus lors de
biopsies de patients.
Par injection de facteurs pour refaire
des cellules souches, on peut
envisager :
 La biologie du développement
 La thérapie cellulaire
 La modélisation pathologique
 La toxicologie prédictive

Donc il s‟agit de produire des cellules
neurales et des neurones issus de
cellules iPS porteuses de la mutation
causale de l‟AF (iPS-AF), et de
rechercher l‟expression de désordres
moléculaires et cellulaires liés à la
pathologie dans ces cellules. L‟objectif
général étant d‟identifier de nouvelles
molécules
pharmacologiques
qui
88
Association Française Ataxie de Friedreich - Deux ans de recherche - www.afaf.asso.fr
puissent atténuer ou normaliser les
effets délétères dus au déficit en
frataxine
maladie.
et
responsables
de
la
 Projet de thérapie génique à visée cardiaque- Pr Patrick Aubourg
Equipes : Pr Aubourg (Hôp. Kremlin
Bicêtre) – Hélène Puccio (IGBMC) Marie Anne Colle (Nantes), Hôp.
cardiologique
Marie
Lannelongue,
David Lynch (USA)
Support de recherches : souris, puis
cochons,
puis
primates,
puis
humains.
Objectif
:
thérapie
génique,
cardiaque dans un 1er temps
cardiaque. Le déroulement futur de
ses travaux prévoit des essais sur le
porc (cœur très proche de l‟homme)
et enfin sur l‟humain. Essai clinique
espéré en 2015.
L‟essai de thérapie génique cardiaque
fait sur les souris pendant deux ans,
en collaboration avec Hélène Puccio, a
donné
des
résultats
très
encourageants
sur
l‟atteinte
Nous vous tiendrons bien sûr au
courant de l‟avancement du projet.
Dans un deuxième temps, viendront les
essais sur le cervelet et la moelle
épinière. Le premier objectif est déjà
la stabilisation de la maladie.
Projet très détaillé dans ce n° et
questionnaire à nous renvoyer – merci.
 Le Consortium européen EFACTS – Myriam Raï
Equipes : coordonnateur Pr Massimo
Pandolfo – hôp Erasme Bruxelles
14 partenaires en Belgique, Autriche,
Allemagne, Italie, Espagne, Angleterre
et France (Dr Alexandra Dürr, Dr
Hélène Puccio).
558 patients européens recrutés qui
doivent faire une visite annuelle.
9 objectifs : voir site d‟E-FACTS :
www.e-facts.eu
Travaux en cours :
 Potentiels auditifs (Bruxelles)
 Echelle électronique CCFS (France)
 IRM fonctionnelle (Allemagne)
 Recherche fondamentale sur le
mécanisme de silence de la
frataxine (Angleterre)
 Biologie structurale
 Développement de biomarqueurs
 Clarification de la pathogénèse
 Criblage
de
gènes
chez
la
drosophile
 Rôle de la vitamine B3
*EFACTS : consortium européen pour
les études translationnelles sur
l‟ataxie de Friedreich
89
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 Incertitudes et projection des jeunes AF et de leur entourage - Maria
Teixeira
Equipe : Dr Isabelle Husson - Hop
Robert Debré
Support : jeunes inclus dans l’essai
ACTFRIE 2 (pioglitazone)
Objectif : meilleure prise en charge
sociale psychologique et médicale
l‟impact social du vécu de l‟incertitude
inhérente aux essais cliniques.
Evaluation de l’impact social de la
gestion de son avenir chez de jeunes
AF.
Les jeunes ataxiques et leur entourage
sont préoccupés par la projection dans
l‟avenir sur différents plans, avec de
nombreuses incertitudes. D‟autre part,
participer à un essai thérapeutique
n‟est pas sans questionnement. Il
existe aussi peu de recherches sur
Husson, Texeira, Raï, Soussi et Aubry
Elle a réalisé des entretiens semidirectifs auprès de 28 jeunes,
participant à un essai thérapeutique :



Comment cette appréhension se
manifeste-t-elle ?
Difficultés vécues
Stratégies mises en place
 L’essai pioglitazone – Dr Isabelle Husson
Equipe : neuro-pédiatrie Hôpital robert Debré. L‟essai arrive à son terme en juin.
Les résultats seront connus début 2014.
 Centres de références et de compétences – Dr Alexandra Dürr
Hôpital Pitié Salpétrière
Objectif : réseaux de soins pour un
meilleur suivi des patients
Il existe actuellement



Des Centres de Référence pour les
maladies neurogénétiques rares
Des Centres de compétence, en lien
avec les C. de Référence
Le service de neuro-pédiatrie à
l‟Hôpital Trousseau


Le Département de génétique
Le Département de neurologie
o Diagnostic et stratégie de
prise en charge
o Définir des protocoles
o Coordonner les travaux de
recherches
o Faire
des
actions
de
formation et d‟information
o Etre
des
interlocuteurs
privilégiés
90
Association Française Ataxie de Friedreich - Deux ans de recherche - www.afaf.asso.fr
La lutte contre l’AF désormais sur un nouveau front –
Pierre Rustin
août 2013
Ces dernières années, nous avons vu se multiplier les essais thérapeutiques utilisant
différentes molécules, visant pour l'essentiel les conséquences du manque en
frataxine (protéine en quantité insuffisante dans la maladie), ouvrant ainsi l‟espoir
d‟identifier des molécules susceptibles de combattre l‟un ou l‟autre aspect de la
maladie.
génétique à l‟origine de la maladie,
plutôt que les conséquences. La chose
est devenue crédible du fait de
l‟amélioration des « outils » soit pour
moduler
l‟expression
du
gène
défectueux, soit pour apporter une
version fonctionnelle du gène.
Pierre Rustin
De nombreux essais (cf. pages
suivantes) sont en cours. Déjà le grand
nombre d‟essais, qu‟ils soient poussés
par des instances publiques ou privées,
est en soi porteur d‟espoir, même s'il
nous faut bien sûr attendre leur
conclusion pour se prononcer quant à
leur efficacité.
Mais le nouveau front qui s'ouvre,
c‟est la capacité de pouvoir désormais,
de façon crédible, viser le mécanisme
Notez
que
ces
améliorations
proviennent pour l‟essentiel du travail
des
chercheurs
dans
d‟autres
domaines ! Exemple : les progrès
réalisés dans les vecteurs (ce sont les
structures permettant d‟amener le
bon gène dans les cellules) ont été
obtenus par des chercheurs travaillant
sur les virus, et non pas sur l‟Ataxie de
Friedreich. Les outils informatiques
développés pour identifier les cibles
génétiques et les séquences actives
sur les gènes n‟ont pas été développés
par les chercheurs travaillant sur l‟AF.
Les progrès obtenus ne l‟ont été que
grâce aux nombreux modèles (depuis
les cellules en culture, les mouches, les
poissons, souris, jusqu‟aux chiens) qui
ont permis de développer et de tester
tous ces outils et pas nécessairement
ceux concernant l‟AF. Vraiment la
recherche constitue un tout et ne
91
Association Française Ataxie de Friedreich - Deux ans de recherche - www.afaf.asso.fr
peut avancer que si tous les domaines
progressent.
En tout cas, chapeau à l‟AFAF qui, tout
en maintenant un cap clair autour des
recherches visant l‟Ataxie, a toujours
su, au cours des années, maintenir une
grande ouverture d‟esprit dans les
projets qu‟elle a soutenus, tous
modèles et toutes approches mêlés.
Le congrès SPATAX –
Bien sûr, les travaux sur ce nouveau
front en sont encore à leurs
balbutiements dans leur application à
l‟Ataxie de Friedreich, mais les
progrès rapides obtenus ces toutes
dernières années dans diverses
maladies, y compris chez l‟homme, font
passer ces approches de l‟état de
rêves fous à celui d‟une réalité
accessible dans un avenir, espérons-le,
désormais proche !
Claudie Baleydier
septembre 2013
La conférence internationale sur les
maladies
dégénératives
spinocérébelleuses,
organisée
principalement par Alexandra Durr,
Alexis Brice, Giovanni Stevenin et
HolmGrassner, s‟est tenue à Paris du
11 au 13 Juin. Plus de 200
chercheurs et cliniciens venus de
tous les pays européens et même
d‟autres continents y ont participé.
Les organisateurs ont bénéficié, entre
autres, du soutien des associations de
patients : CSC, AFAF, ASL.
Les recherches, axées principalement
sur les ataxies autres que l‟AF et
paraparésies
spastiques,
furent
partagées dans une ambiance très
chaleureuse accentuant la coopération
internationale. Le groupe EFACTS,
exclusivement axé sur l‟Ataxie de
Friedreich, s‟est réuni en fin de
congrès et communiquera les résultats
de cette rencontre de travail dans son
prochain bulletin.
Annie Sittler, Claudie et Jean Bénard (ASL)
Les anomalies du réseau d’actine dans l’AF –
Aurélien
Bayot
juin 2013
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Association Française Ataxie de Friedreich - Deux ans de recherche - www.afaf.asso.fr
Depuis plusieurs années, dans l'équipe de Pierre Rustin à l'hôpital Robert Debré
(Paris), nous utilisons des cellules de la peau des patients atteints de l'ataxie de
Friedreich (AF) pour mieux comprendre certains aspects de la maladie.
Ces cellules, appelées fibroblastes,
bien qu'ayant une baisse d'expression
importante du gène FXN codant pour
la protéine frataxine, n'expriment pas
de déficit significatif des enzymes à
centre fer-souffre pourtant connu
comme la signature de la déficience en
frataxine. En revanche, ces cellules
"portent"
l'anomalie
génétique
responsable de l'AF, cette expansion
de triplets GAA dans le gène FXN, et
présentent donc un intérêt particulier
pour étudier les effets associés à
cette mutation.
Aurélien Bayot
Depuis 2003, les scientifiques savent
que les fibroblastes de patients
présentent des altérations du réseau
d'actine,
une
sorte d'armature
filamenteuse qui se tisse à l'intérieur
des cellules et qui permet de
maintenir leur structure et d'assurer
leurs
mouvements
et
leurs
déplacements. Dans les cellules de
patients, ce réseau est moins dense et
se retrouve fragilisé.
Fin 2012, nous avons pu identifier
précisément les mécanismes à l'origine
de cette fragilisation du réseau
d'actine. Nous avons observé que le
gène PIP5K1B, situé à côté du gène
FXN et donc au voisinage de
l'expansion de triplets GAA, est moins
bien exprimé dans les fibroblastes et
dans les cellules du sang des patients,
tout comme le gène FXN (bien qu'à un
niveau moindre), et cela rend compte
de la fragilisation du réseau.
En 2009, ces anomalies ont également
été observées chez les patients dans
certaines
régions
du
cerveau,
renforçant l'idée qu'il s'agit d'un
phénomène caractéristique de la
maladie.
Toutefois,
jusqu'à
récemment, ces altérations étaient
considérées comme une conséquence
indirecte de la baisse en frataxine,
sans que leur cause ne soit réellement
élucidée.
En effet, ce gène PIP5K1B permet de
fabriquer une protéine
appelée
PIP5K1B, décrite depuis plusieurs
années comme jouant un rôle clé dans
l'organisation et la dynamique de ce
réseau d'actine. Dans la majorité des
cas, nous avons observé que le niveau
d'extinction du gène PIP5K1B corrèle
avec la taille des expansions GAA :
autrement dit, plus les expansions
93
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sont grandes, et plus le gène PIP5K1B
est éteint ; ce qui suggère que les
expansions GAA sont directement
impliquées
dans
un
phénomène
d'extinction de gène à distance.
Ce type d'effet à distance est bien
connu dans différents types de
maladies génétiques impliquant des
mutations diverses, et notamment
dans le cas de maladies à expansions
de triplets. Enfin, nos expériences ont
montré que lorsqu'on réexprime le
gène
voisin
PIP5K1B
dans
les
fibroblastes de patients, le réseau
d'actine se trouve corrigé, tandis que
l'extinction «artificielle» du gène
PIP5K1B
dans
des
fibroblastes
d'individus sains reproduit l'altération
du réseau d'actine.
Evidemment,
ces
résultats
ne
remettent pas en cause le rôle de la
frataxine dans l'ataxie de Friedreich
ni
les
nombreuses
approches
thérapeutiques en cours. Néanmoins,
nos recherches ouvrent la voie à de
nouveaux mécanismes indépendants de
la frataxine et dont l'impact dans la
maladie reste à définir. A présent,
nous
essayons
justement
de
comprendre le rôle de cette nouvelle
voie dans l'AF et la façon dont
l'effet de la mutation se propage le
long de l'ADN jusqu'au gène voisin
PIP5K1B
Deux essais avec l’Interféron gamma –
FARA et Ataxie UK
septembre 2013
1- Aux USA : Essai pilote de phase
II avec l’interféron gamma-1b
(Actimmune™) pour le traitement de
l’ataxie de Friedreich – Dr David
Lynch, hôpital pour enfants de
Philadelphie- Août 2013
L‟hôpital pour enfants de Philadelphie
recrute aux USA des enfants atteints
d‟AF pour un essai clinique de phase
II, à doses progressives, essai ouvert
pour étudier la sécurité et les effets
de l‟IFN (interféron gamma-1b,
Actimmune™). Elle inclura des enfants
entre 5 et 17 ans et sera financée par
FARA. (Source FARA)
2- En Italie : essai clinique de
phase II pour tester la sécurité et
l’efficacité du traitement avec
l’interféron gamma chez les malades
de l’AF. Dr Roberto Testi, Université
de Rome, Tor Vergata, Italie septembre 2013
Résumé : nous avons récemment
observé que l’interféron gamma, une
cytokine naturelle présente dans
notre corps, élève les niveaux de
frataxine dans les cellules dérivées
de patients AF.
De plus, ce traitement améliore les
performances neurologiques de souris
modifiées pour reproduire la maladie.
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L‟interféron gamma est un médicament
disponible dans le commerce et
reconnu pour le traitement d‟autres
maladies.
C‟est pourquoi nous avons prévu de
tester si, comme cela est observé
dans les souris AF, l‟interféron gamma
élève la frataxine chez les malades
AF. Nous impliquerons un petit groupe
de malades AF qui recevront des
injections sous-cutanées d‟interféron
gamma.
Dr. Robert Testi
Des
résultats
positifs
nous
encourageront à lancer des essais
cliniques à plus grande échelle dans le
but de vérifier l‟efficacité de
l‟interféron gamma dans la prévention
de la progression de la maladie.
(Source : Ataxia UK)
EFACTS : de nouveaux outils pour l’Ataxie de
Friedreich – Myriam Raï
Communiqué de CORDIS EUROPA, janvier 2013
NB : Myriam Raï fait partie de l‟équipe du Pr Pandolfo à l‟hôpital Erasme de
Bruxelles ; elle est venue à Nouan nous faire part de leurs travaux.
1ers résultats du programme FP7HEALTH
financé
par
l'Union
Européenne, et coordonné par le Pr
Massimo Pandolfo, neurologe à l‟hôpital
Erasme à Bruxelles.
Efacts : European Friedreich's ataxia
consortium for translational studies.
14 équipes de chercheurs européens
ont uni leurs forces pour exploiter les
connaissances liées aux troubles
neurologiques
de
l'ataxie
de
Friedreich. Des informations sur la
pathogénie et les facteurs de
causalité de la maladie, ainsi que de
nouveaux outils pour l'étude de la
maladie permettront de contribuer à
l'élaboration
de
nouveaux
traitements.
Malgré la découverte du fait que le
gène de la frataxine est responsable
de l‟ataxie de Friedreich, peu de
progrès ont été réalisés sur le plan
des traitements.
95
Association Française Ataxie de Friedreich - Deux ans de recherche - www.afaf.asso.fr
fer-soufre (formé par les protéines
ISCU, NFS1 et SD11) qui agit comme
une protéine chaperonne pour le fer.
L'accumulation de fer est associée à
divers troubles neurodégénératifs, y
compris les maladies de Parkinson et
d'Alzheimer.
L'altération de la fonction de la
frataxine entraîne des changements
dans l'homéostasie du fer et
l'activation inappropriée des protéines
de liaison au fer. Cela aboutit à la
suppression
de
la
biogenèse
mitochondriale.
Myriam Raï
Mise en place d‟une base de données
européenne
des
dossiers
des
patients (600) qui comporte des
données démographiques et familiales,
y compris les antécédents médicaux,
des données sur les activités
quotidiennes,
des
examens
fonctionnels
et
une
évaluation
cardiologique.
Un
référentiel
d'échantillons
biologiques a été créé pour stocker les
échantillons en vue de procéder
ultérieurement
à
des
analyses
génotype-phénotype et de réaliser des
études sur les biomarqueurs, les gènes
modificateurs
et
l'épigénétique.
L'échographie du cœur des patients
atteints de l'ataxie de Friedreich
indique des anomalies morphologiques
et fonctionnelles du ventricule gauche.
Une nouvelle perspective concernant
le rôle de la frataxine indique son
association avec un complexe de
L'étude des mécanismes responsables
de la répression du gène de la
frataxine a conduit à la découverte
d'histones épigénétiques* et de
mutations de l'ADN, qui pourraient
servir de cibles à l'avenir pour une
intervention thérapeutique. À cette
fin,
les
partenaires
étudient
actuellement l'effet des inhibiteurs
d'histone déacétylase – des composés
qui
ouvrent
la
chromatine
et
permettent l'expression des gènes –
pour inverser la répression du gène de
la frataxine.
Le consortium Efacts a reconnu la
nécessité d'améliorer les modèles
animaux et cellulaires pour l'ataxie
de Friedreich et produit des souris
transgéniques
porteuses
des
répétitions GAA observées chez
l'homologue humain de la frataxine.
Les modèles cellulaires générés par
des souris ou des cellules souches
pluripotentes
induites
par
des
patients sont utilisés pour étudier les
96
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altérations
morphologiques
des
neurones,
notamment
les
mitochondries en dégénérescence et
les dépôts de fer des mitochondries.
Outre les niveaux réduits de
frataxine, ces cellules présentent un
phénotype
électro-physiologique
anormal.
Collectivement, le consortium du
projet Efacts a réalisé d'importants
progrès concernant la biologie de
l'ataxie de Friedreich, en combinant
des
données
expérimentales
et
Stage à l’école d’ADN –
l'analyse des informations sur les
patients. Les résultats de l'étude
présentent un fort potentiel pour être
traduits
en
interventions
thérapeutiques.
* L'épigénétique concerne toutes les
modifications ou facteurs qui ne sont
pas codés par la séquence d'ADN, mais
qui régulent l'activité des gènes en
facilitant ou en empêchant leur
expression. Elle est fondamentale car
elle permet une lecture différente
d'un même code génétique.
Annie Reymond
septembre 2013
Partant du principe qu'une personne combat plus efficacement sa maladie quand elle
la connaît mieux, l’association « Tous Chercheurs » propose des stages pratiques
de biologie aux membres d'associations de malades (maladies génétiques rares,
maladies auto-immunes, maladies inflammatoires, ...).
Lors de la 1ère réunion Grand Sud, nous
avions évoqué l‟existence de ces
stages, et nombreux nous ont demandé
d‟en organiser un. Ainsi six adhérents
de l’AFAF et six de CSC se sont
réunis en juin à l’Institut de
Neurobiologie de la Méditerranée de
Marseille Luminy.
Le stage s‟est déroulé sur trois jours
avec un savant dosage :
 Explications théoriques consacrées
à l‟acquisition des notions de base
en biologie : qu‟est-ce qu‟une
cellule, l‟ADN – ARN – un exon – le
cervelet etc.
 Ateliers pratiques avec réalisation
de mini empreintes génétiques,
observation d‟un cerveau de souris
ayant des problèmes cérébelleux …
 Discussion avec de nombreux
intervenants,
chercheurs
et
neurologues spécialisés dans les
ataxies
 Visite
d‟un
laboratoire
avec
explications sur l‟expérience en
cours.
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Association Française Ataxie de Friedreich - Deux ans de recherche - www.afaf.asso.fr
« novices » en facilitant une meilleure
compréhension des travaux de nos
chercheurs et des comptes-rendus
scientifiques.
Ce stage est gratuit, sauf le transport
et l‟hébergement. A nos associations
de permettre la poursuite de ces
stages en suscitant de nouvelles
candidatures.
Annie, concentrée
Ce stage permet de mieux comprendre
la lenteur, mais aussi les méthodes et
l‟importance de la recherche. Il
permet
aussi
d‟améliorer
la
communication entre chercheurs et
Tous les participants ont été
enchantés ! Ce furent trois jours très
riches et très denses dirigés
magistralement par Marion Mathieu,
riche d‟un vocabulaire que je maitrisais
mal. Je comprends mieux Pierre Rustin
quand il parle de saut d‟exon, et vais
pouvoir me replonger dans les articles
médicaux…
Congrès Eurordis à Dubrovnick –
Claudie Baleydier
septembre 2013
EURORDIS
est
une alliance non gouvernementale
d‟associations de malades, pilotée par
les patients eux-mêmes. Elle fédère
590
associations
de
patients
atteints de maladies rares dans 54
pays
couvrant
plus
de
4000
maladies.
EURORDIS a donc rassemblé en juin
2013 les associations de maladies
rares autour de plusieurs thèmes : les
plans nationaux maladies rares, les
centres experts, les registres, l‟accès
aux médicaments, mais aussi la mise en
place de services sociaux destinés à
améliorer la vie quotidienne.
Sue, Claudie et Barbara
Ce congrès permit aussi de renforcer
le réseau européen des ataxies avec
Sue Milman d’Ataxia UK, l’association
anglaise (à gauche), et Barbara Flynn
de l’association irlandaise (à droite),
photographiées ici en compagnie de
Claudie Baleydier, pour l‟AFAF.
98
Association Française Ataxie de Friedreich - Deux ans de recherche - www.afaf.asso.fr
Nos vœux pour 2014 –
Hélène Puccio, Patrick Aubourg, Françoise
Pousset
janvier 2014
Pour cette nouvelle année, nous
voulons vous dire combien votre force
incroyable, votre détermination pour
combattre chaque jour votre maladie,
celle de vos enfants est au fond de
nos cœurs pour trouver un traitement
qui puisse au moins arrêter votre
maladie.
Notre objectif est de continuer à
faire tous les développements encore
nécessaires pour débuter un essai
clinique dans un délai court, en 20152016. Il y a encore beaucoup de
travail à faire pour mener vers la
clinique les résultats du laboratoire,
mais avec l'effort de plusieurs équipes
efficaces, nous avançons chaque jour.
En parallèle, nous nous attaquons à
traiter la moelle épinière et le
cervelet de souris présentant une
forme
neurologique
d‟ataxie
de
Friedreich.
Hélène Puccio (IGBMC)
Les années 2012-2013 ont été une
étape
importante
pour
le
développement
potentiel
d'un traitement
de
l‟atteinte
cardiaque de la maladie de Friedreich
par une approche de thérapie génique.
Chez un modèle de souris présentant
une forme très rapidement évolutive
de cardiomyopathie de Friedreich,
nous avons pu montré qu‟un traitement
par thérapie génique permettait de
guérir au sens vrai du terme ces souris
quand elles étaient déjà bien malades
du cœur.
Que
ces
mots
d‟espoir
vous
accompagnent chaque jour en 2014.
Comme le disent souvent les patients
américains atteints de maladie de
Friedreich: « We will beat it : nous
aurons sa peau !".
Très bonne année à toutes et à tous.
PS : Vous pourrez leur poser vos
questions lors de la rencontre annuelle
ou nous les envoyer pour leur
transmettre.
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Patrick Aubourg (Bicêtre)
Françoise Pousset (la Salpêtrière)
Les recherches subventionnées début 2014 –
Juliette
Dieusaert
décembre 2013
Subventions 2013-2014 (40 000 euros)
1. Sandrine Ollagnon de Choudens (CEA, Grenoble)
« Mieux comprendre le rôle de la frataxine dans les stades précoces de
l’assemblage des noyaux FeS dans la mitochondrie chez les mammifères », en
collaboration avec Juan Fontecilla-Camps (Institut de Biologie Structurale Ebel
Grenoble) et l'équipe d'Hélène Puccio (IGBMC d'Illkirch). 20 000 euros - article
ESPOIR 134 janvier 2014.
2. Amélie Hu (Lab. Pr Pandolfo - Bruxelles)
« Caractérisation des neurones issus des cellules souches pluripotentes
induites, de patients atteints de l'Ataxie de Friedreich ». 20 000 euros article ESPOIR 134 janvier 2014.
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Subventions 2011-2013 (221 910 euros) - travaux en cours
3. Claude Mignard (CHU la Réunion)
« Capacité physique et tolérance à l’exercice chez des patients atteints d’une
Ataxie de Friedreich tardive ». 11 000 euros - début mars 2014.
4. Patrick Aubourg (Hop. Bicêtre - Paris)
« Projet de traitement de la cardiomyopathie de l’AF par thérapie génique »
avec H. Puccio, collaboration Fr. Pousset, cardiologue à la Pitié. En attente - article
ESPOIR 132 juillet 2013.
5. Morgane Perdomini (laboratoire d'H. Puccio - IGBMC - Illkirch)
« Développement d’une approche de thérapie génique pour l’ataxie de Friedreich
utilisant les virus adénoassociés dans les modèles murins ». 25 000 euros article ESPOIR 129 octobre 2012.
6. Diaz Nido (Madrid)
« Etude de sécrétome de cellules neurales de patients afin d'identifier
nouvelles cibles thérapeutiques et biomarqueurs de l'AF. Rôle des cellules
gliales dans la survie des neurones ? ». 25 000 euros - article ESPOIR 129
octobre 2012.
7. Alejandro Vaquero (Barcelone)
« Lien entre les « sirtuines » et la frataxine pour lutter contre le stress
oxydatif ». 15 000 euros - article ESPOIR 130 janvier 2013.
8. Jean-Michel Camadro et Hervé Tricoire (Inst. Monod - Paris)
« Modèles biologiques complémentaires, la drosophile et la levure ». 12 500
euros à chaque équipe (renouvellement) – article ESPOIR 128 juillet 2012.
9. Laetitia Aubry (Equipe Genethon cellules souches - Pr Pechanski)
« Cellules souches à partir de cellules induites à la pluripotence ». 25 000 euros
– article ESPOIR 127 avril 2012.
10.
Pr Jacques Tremblay (Université de Laval - Québec)
101
Association Française Ataxie de Friedreich - Deux ans de recherche - www.afaf.asso.fr
« Développement d’un traitement pour l’Ataxie de Friedreich basé sur
l’administration de protéines TALEs induisant l’expression de frataxine ».
25 000 euros - articles ESPOIR 127 avril 2012 et ESPOIR 134 janvier 2014.
11.
Nadia Soussi-Yanicostas (Hôpital Robert Debré – Paris)
Renouvellement pour « Modélisation de l’ataxie de Friedreich chez le poisson
zèbre et recherche de molécules thérapeutiques in vivo ». 24 000 euros articles ESPOIR 126 janvier 2012 et ESPOIR 128 juillet 2012.
12.
Marie-Anne Colle (Ecole Nationale Vétérinaire de Nantes)
« Transfert de gène intrathécal à l’aide d’un vecteur AAV10 pour le traitement
de l’ataxie de Friedreich chez le chez le primate non humain ». 29 910 euros article ESPOIR 126 janvier 2012.
13.
Pierre Rustin (Hôpital Robert Debré – Paris)
« Sur les souris harlequins, mieux comprendre le mode d’action de la
pioglitazone, tester son effet thérapeutique ». 20 000 euros - article ESPOIR
126 janvier 2012.
Rappel subventions 2010-2011
Travaux Henrion-Caude (Hôpital Necker – article ESPOIR 131 avril 2013), Bayot
(Hôpital Debré – article ESPOIR 130 janvier 2013), Sliwa (Jussieu – article ESPOIR
127 avril 2012) terminés.
14.
Jean Louis Mergny (Institut chimie biologie Pessac)
« Recherche de ligands des répétitions de trinucléotides de la Frataxine ».
12 000 euros – article ESPOIR 127 avril 2012 - attente de résultats.
15.
Isabelle Husson (Hôpital Robert Debré - Paris)
« Complément du financement de l'essai Actfrie, surtout sur les plans suivis
kiné et psychologue ». 20 000 euros - publications en cours de parution. Résultats
de l'étude avril 2014.
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Les protéines TALE : nos premiers résultats au
Québec – Pr. Jacques Tremblay
août 2013
Plusieurs chercheurs poursuivent des travaux visant à augmenter la production
de frataxine dans les cellules des patients Friedreich.
L’équipe
du
Pr.
Tremblay
a
récemment produit des protéines
appelées TALE qui s'attachent
spécifiquement à une séquence de
nucléotides dans le génome (appelée
le
promoteur)
qui
contrôle
l'expression de frataxine.
De plus cette protéine TALE a été
fusionnée avec une partie d'une autre
protéine appelée VP64. La protéine
fusionnée TALE-VP64 non seulement
s'attache au promoteur de la
frataxine, mais augmente aussi par 2
à 3 fois la production de frataxine.
présentement sur une modification de
la protéine TALE-VP64 pour qu'elle
puisse pénétrer dans les cellules.
Et ce groupe travaille aussi sur la
possibilité d'introduire dans les
cellules des patients le gène codant
pour la TALE-VP64 à l'aide d'un virus
associé à l'Adénovirus modifié.
Une
telle
augmentation
de
la
production de frataxine devrait
permettre de réduire et peut-être
même prévenir complètement les
symptômes de l'Ataxie de Friedreich
chez un grand nombre de patients.
Pr. Jacques Tremblay
Le Pr Tremblay poursuit ses travaux
de recherche pour augmenter encore
d'avantage l'expression de frataxine.
Ce groupe de recherche travaille
Département
de
Médecine
Moléculaire, Université Laval et
Centre de Recherche du CHU de
Québec – Canada
103
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Les travaux au CEA de Grenoble –
Sandrine Ollagnier de
Choudens
octobre 2013
« Mieux comprendre le rôle de la frataxine dans les stades précoces de
l’assemblage des noyaux FeS dans la mitochondrie chez les mammifères ».
Sandrine Ollagnier de Choudens (Laboratoire de Chimie et Biologie des Métaux du
CEA à Grenoble), en collaboration avec Juan Fontecilla-Camps (Institut de Biologie
Structurale J.P. Ebel Grenoble) et l'équipe d'Hélène Puccio à l'IGBMC d'Illkirch.
Les protéines à noyau fer-soufre
(FeS)
sont
des
composantes
essentielles de la cellule, impliquées
dans
de
nombreux
processus
physiologiques, importants pour la
synthèse et la stabilité du génome
nucléaire, la traduction des protéines,
le métabolisme mitochondrial et la
respiration cellulaire.
Durant cette dernière décennie, la
biogenèse des protéines FeS a été
largement étudiée par des approches
génétiques et biochimiques chez la
bactérie et la levure, et plus
récemment chez les plantes et les
mammifères. Ceci a permis de
démontrer que c‟est un processus
complexe impliquant de nombreuses
protéines, fortement conservées de la
bactérie à l'homme.
Le processus de maturation des
protéines
FeS,
c‟est-à-dire
la
formation et l‟incorporation du noyau
FeS au sein des protéines, est un
processus cellulaire essentiel. Chez
l'homme, des mutations dans plusieurs
composants de cette machinerie de
synthèse sont associées à des
troubles importants tels que les
maladies neurodégénératives dont
l’ataxie de Friedreich, la myopathie
et
certaines
formes
d'anémie,
soulignant l'importance de cette voie
pour la fonction cellulaire normale.
Sandrine Ollagnier de Choudens
Chez les organismes eucaryotes
(Levure, Mammifères), les premières
étapes de la biosynthèse des FeS se
produisent dans la mitochondrie, par
un
complexe
multiprotéique,
permettant l'assemblage de façon
contrôlée et d‟un noyau FeS sur une
protéine d'échafaudage à partir de
soufre et fer ferreux.
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Le soufre est apporté par l‟acide
aminé L-cystéine via une activité
enzymatique portée par une cystéine
désulfurase. Les sources de fer et
d'électrons n'ont pas encore été
clairement identifiées, bien que les
données expérimentales suggèrent que
la frataxine et la ferrédoxine soient
impliquées, respectivement.
Nous avons récemment démontré que
la frataxine contrôle l'entrée de fer
à travers l'activation de la cystéine
désulfurase, et qu'elle est essentielle
pour assembler et protéger le noyau
FeS au sein de la protéine
échafaudage dans la phase initiale de
la biogenèse.
Ces
résultats
fournissent
des
informations consolidées sur le rôle de
la frataxine pour la biosynthèse des
noyaux FeS, et ouvre de nouvelles
voies
pour
mieux
élucider
le
mécanisme moléculaire impliqué dans la
synthèse du noyau FeS sur la protéine
échafaudage dite « scaffold ». Une
fois pré-assemblé au sein de la
scaffold, le noyau Fe-S, exposé et
labile, est transféré aux protéines
mitochondriales
cibles
(aconitase,
sous-unités du complex I, …) à l'aide
de plusieurs protéines et facteurs
accessoires. Les protéines impliquées
et ce mécanisme de transfert sont
encore mal caractérisées et les
interactions
qui
les
animent
partiellement connues.
Nos objectifs dans le projet déposé à
l‟AFAF sont d'obtenir de nouvelles
connaissances sur la machinerie
d’assemblage
mitochondriale
des
noyaux FeS chez les mammifères, en
particulier sur les premières étapes
de l'assemblage du noyau FeS
faisant intervenir la frataxine, la
frataxine étant la protéine déficiente
dans l‟ataxie de Friedreich.
Ce projet de recherche fondamentale
abordera ces questions par une
approche multidisciplinaire, combinant
des données structurales avec la
biochimie et la biophysique. La
combinaison de ces approches pour
comprendre la fonction de la
frataxine
et
les
mécanismes
moléculaires
impliqués
est
indispensable pour éclaircir les étapes
liées à ce processus biologique
essentiel et pour comprendre l‟ataxie
de Friedreich.
Actuellement,
les
stratégies
thérapeutiques tentent de réduire les
effets néfastes qui découlent de
l‟absence de frataxine fonctionnelle.
Une
meilleure
connaissance
du
fonctionnement de cette protéine est
primordiale pour la conception de
traitements
plus
efficaces
qui
s‟attaquent directement à la cause de
ce trouble, par exemple en créant des
molécules capables de mimer les
propriétés
biologiques
de
la
frataxine.
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Les travaux de l’équipe du Pr. Pandolfo à Bruxelles –
Amélie Hu
octobre 2013
« Caractérisation des neurones
induites, de patients AF »
issus
des
cellules
souches
pluripotentes
Service du Pr Pandolfo - Laboratoire de Neurologie Expérimentale - Université
Libre de Bruxelles
Amélie Hu
Rappel :
L‟ataxie
de
Friedriech
(FRDA) est provoquée par des taux
d'expression réduits d'une petite
protéine mitochondriale, la frataxine
et la plupart des patients FRDA ont
une mutation homozygote constituée
par l'expansion de répétitions de
trinucléotides GAA dans le premier
intron du gène de la frataxine (FXN).
La limitation actuelle de bons modèles
cellulaires et animaux créée de ce fait
une priorité dans la recherche sur la
FRDA.
Le projet de recherche vise à créer
un nouveau modèle de l'ataxie de
Friedreich en utilisant une nouvelle
technologie : les cellules souches
pluripotentes induites (iPSC). Cette
technologie permet de générer des
types cellulaires spécifiques du
patient et de la maladie concernée.
Les iPSC sont pluripotentes et
capables
de
s'auto-renouveler
indéfiniment in vitro. Ce laboratoire
ainsi que les collaborateurs ont obtenu
plusieurs lignées d‟iPSC issues de
patients FRDA, et de personnes
contrôles.
Dans des expériences préliminaires,
nous avons réussi à les différencier en
neurones fonctionnellement actifs.
Pour ce projet, nous utiliserons les
lignées d‟iPSC existantes et nous
étudierons
divers
paramètres
morphologiques,
biochimiques
et
neurophysiologiques
qui
sont
susceptibles d'être modifiés dans les
neurones FRDA. De plus, nous
développerons des protocoles de
différenciation
neuronale
afin
d‟obtenir des cultures des neurones
spécifiquement atteints dans la FRDA.
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Nous avons défini
spécifiques suivants :
les
objectifs
1. Comparer les iPSC issues des
patients FRDA et de personnes
contrôles tout le long de la
différenciation en cellules neurales.
Pour cette étape spécifique, nous
allons évaluer la mort cellulaire,
analyser la morphologie ainsi que
l‟ultrastructure des cellules à chaque
étape de la différenciation.
2.
Développer
et
valider
les
protocoles
de
différenciation
permettant d‟une part, de générer à
partir des iPSC, les neurones
cérébelleux, incluant les cellules de
Purkinje, les cellules granulaires et les
noyaux cérébelleux profonds et
d‟autre part, générer les neurones
sensoriels primaires.
3.
Etudier
les
propriétés
électrophysiologiques des neurones
dérivés des iPSC issues de patients
FRDA et personnes contrôles sous des
conditions de base ou sous stress et
fournir ainsi une preuve directe de la
fonctionnalité des neurones.
4. Etudier la capacité des neurones
dérivés des iPSC issus de patients
FRDA et de personnes contrôles, à
gérer le fer et le stress oxydatif.
Ce projet est basé sur l’hypothèse
que les neurones dérivés des iPSC
issues
des
patients
FRDA
récapitulent
les
caractéristiques
génétiques,
épigénétiques
et
biochimiques des neurones atteints
par la pathologie, ce qui permet
d'étudier le processus pathogène et la
base de la vulnérabilité spécifique des
neurones. En outre, les neurones
dérivés des iPSC seront un modèle
test idéal pour les thérapeutiques des
fonctions neurologiques de la FRDA.
Un essai de phase 1 avec VP_20629 –
Ron Bartek
octobre 2013
Il s‟agit d‟un essai de phase 1
(contrôle de la toxicité) avec un
composé VP20629 (référencé sous le
terme OX1). Ce composé cible le
fonctionnement de la mitochondrie et
le stress oxydatif. OX1 est un
composé produit naturellement, une
petite molécule destinée à prévenir le
stress oxydatif
grâce à la
combinaison d‟un fixateur de radicaux
hydroxyles et d‟un chélateur de métal.
Ron Bartek
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Les radicaux hydroxyles (OH) sont les
plus toxiques lors d‟un stress oxydant.
Leur cibles sont la plupart des
molécules organiques et inorganiques
des cellules, en particulier, l‟ADN, les
protéines, les lipides, etc.
Cette étude est sponsorisée par le
laboratoire Viropharma. Elle enrôle
des ataxiques Friedreich de 18 à 45
ans, dans plusieurs sites aux Etats
Unis dont l‟hôpital d‟enfants de
Philadelphie.
Le
recrutement
a
commencé en Juillet 2013.
Essais à Londres avec l’HDCA –
Pr. Festeintein
octobre 2013
L‟essai avec un inhibiteur d‟histone
déacethylase à Londres progresse et
la première étape (toxicité) est
actuellement terminée.
HDAC une fois par semaine pendant 5
semaines.
L‟analyse de ces résultats de la
première étape a nécessité quelques
changements pour le protocole de
l‟étape numéro 2.
Cette étape est actuellement en
cours ;
environ
20
personnes
recevront des doses croissantes
d‟inhibiteurs HDAC pendant quelques
jours afin de déterminer la dose la
plus sûre et la plus efficace. L‟essai
sera ensuite prolongé pendant 2 mois
pour tester l‟efficacité à plus long
terme.
Pr. Festeintein
L‟équipe de l‟Imperial College, dirigée
par le Professeur Festenstein en
collaboration avec le Dr Paola Giunti
du Centre Londonien de l‟Ataxie de
Friedreich, a inscrit 10 patients
souffrant d‟Ataxie de Friedreich. Les
participants ont reçu l‟inhibiteur de
Si les résultats de cet essai pilote
s‟avèrent
positifs,
l‟équipe
du
Professeur Festenstein espère que
cela amènera à de plus larges essais
cliniques contrôlés par placebo.
Source : Sabine Zollinger et MarieRose Dufey ACHAF (Suisse)
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La vitamine B3 : apport potentiel dans l’AF –
Pr.
Festeintein
octobre 2013
De nouvelles recherches du Collège Impérial de Londres, menées par le Pr
Festentein, suggèrent que la Vitamine B3, présente dans certains aliments, pourrait
augmenter les niveaux de frataxine. Un essai clinique est envisagé. Les
recherches sont financées par le Collège Impérial de Londres, Ataxia UK et le
Consortium européen EFACTS. A suivre …
Généthon bioprod –
AFM
Evry, le 27 juin 2013
Généthon devient le 1er établissement
pharmaceutique à but non lucratif. Il a
obtenu le statut d’établissement
pharmaceutique accordé par l‟Agence
Nationale de Sécurité du Médicament
(ANSM). Son centre de production,
Généthon BioProd, est ainsi autorisé à
produire
des
médicaments
de
thérapie innovante. Une première
pour un laboratoire créé par une
association de malades et financé
grâce à la générosité publique, et une
nouvelle étape dans l’émergence de
traitements
innovants
pour
les
maladies rares.
Avec
Généthon
BioProd,
le
laboratoire
de
l’AFM-Téléthon
dispose de la plus grande capacité
de production de médicaments de
thérapie
génique
au
monde.
Généthon, Prix Galien France 2012,
renforce ainsi sa position de leader
mondial
dans
le
domaine
des
biothérapies pour les maladies rares.
Avec ses 5000 m², Généthon BioProd
est en capacité de produire plus de 20
lots de vecteurs-médicaments de type
lentivirus ou AAV pour les phases
d‟essais cliniques chez l‟homme comme
pour la mise à disposition des malades.
Déjà promoteur de deux essais
cliniques internationaux pour des
déficits immunitaires, Généthon peut
ainsi poursuivre le développement de
ses projets cliniques pour des
maladies rares de la vision, des
muscles, du sang, du foie, du cerveau…
Objectif principal : mettre à la
disposition
des
patients
des
traitements pour des maladies rares
sans solution thérapeutique.
Son coût de fonctionnement annuel
(environ 10 millions d‟euros) est
intégralement financé par l‟AFMTéléthon grâce aux dons du Téléthon.
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