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!Un!patient!est!qualifié!de!séropositif)pour)le)VIH!lorsqu’on!détecte!dans!son!sérum!!la!présence)d'anticorps!
reconnaissant!certaines!protéines!du!virus,!les!antigènes!viraux!(par!exemple!la!protéine!virale!p24).!La!reconnaissance!
est! la! liaison! spécifique! d’un! anticorps! avec! une! petite! région! de! la! protéine! appelée! déterminant! antigénique.! La!
protéine!p24!du!virus!comporte!plusieurs!déterminants!antigéniques,!dont!l’un,!appelé!5.3,!est!utilisé!dans!le!test!de!
séropositivité.!!
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Pour!créer!des!anticorps!en!laboratoire!ou!bien!à!des!fins!expérimentales,!il!est!possible!d’injecter!un!antigène!
à! des! lapins.!Ils! produisent! alors! des! anticorps! spécifiques,! qui! circulent! dans! leur! sérum,! et! les! lapins! sont! alors!
immunisés! contre! cet! antigène.! La! présence! d’anticorps! spécifiques! peut! être! mise! en! évidence! par! la! méthode!
d’Ouchterlony.)
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Principe)de)la)méthode)d’Ouchterlony)
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C’est!une!méthode!d’immunodiffusion!sur!gel!:!les!solutions!déposées!dans!les!puits!creusés!dans!le!gel!
diffusent! de! façon! homogène! dans! toutes! les! directions! autour! du! puits.! Deux! auréoles! de! diffusion!
peuvent!donc! entrer! en! contact! lorsqu’elles!ont! suffisamment!progressé.!Cette!zone! de! contact!reste!
invisible!s’il!n’y!a!pas!de!réaction!entre!les!deux!solutions.!Quand!il!y!a!réaction!entre!les!solutions,!il!se!
forme! un) arc) de) précipitation!visible! à! l’œil! nu.! CeluiRci! est! dû! à! l’interaction! entre! de! nombreux!
anticorps! et! les! antigènes! spécifiques,! entraînant! la! formation! de! complexes! immuns.! Le! temps! de!
réaction!est!de!l’ordre!de!24h*.!
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*! Pour! des! raisons! de! délai,! ce! TP! utilise! des! produits! de! substitution,! qui! simulent! une! immunodiffusion! en! 40! minutes!
seulement.!
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Doc. 2 : Disposition des puits dans la gélose
(l’emplacement du repère sert à l’orientation de la boîte
de Pétri)
Doc. 3 : Aspect d’un arc de précipitation observé
24h après diffusion
Repère sur la
boite
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