Stage proposé par Marie SAINT-DIZIER et Fabienne CONSTANT
AgroParisTech
UMR 1198 INRA/ENVA/CNRS Biologie du Développement et Reproduction
7 avenue du Général de Gaulle
94 700 MAISONS-ALFORT
Téléphone : 01.44.08.18.52
Site internet : www.agroparistech.fr
Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Jean-Paul RENARD
Intitulé de l’équipe d’accueil : Relations nutrition-reproduction chez les bovins
Prénom et NOM du Responsable de l’équipe : Sylvie CHASTANT-MAILLARD
Résumé du thème de recherche de l’équipe
L’équipe « Relations nutrition-reproduction chez les bovins » s’intéresse à la fertilité des vaches
laitières, notamment de la race Prim’Holstein, qui diminue régulièrement depuis les années 50, en
France comme dans d’autres pays. La baisse de fertilité observées chez ces femelles très fortement
sélectionnées pour la production de lait a probablement plusieurs origines telles qu’une détection des
chaleurs plus difficile et une augmentation de la mortalité embryonnaire. Différents axes de recherche
sont ainsi abordés dans l’équipe.
Titre du projet de stage : Effets de la progestérone sur les interactions mère-conceptus chez
la vache laitière
Prénom, NOM, téléphone et adresse e-mail du Responsable du stage:
- Marie SAINT-DIZIER (stdizier@agroparistech.fr) : enseignant-chercheur AgroParisTech,
16 rue Claude Bernard 75005 PARIS, tel : 01.44.08.18.52
- Fabienne CONSTANT (f[email protected]) : enseignant-chercheur ENVA, 7 avenue
du Général de Gaulle 94700 Maisons-Alfort, tel : 01.43.96.73.69
Projet de stage :
Situation du sujet : La mortalité embryonnaire pré-implantatoire est une cause majeure de baisse de la
fertilité chez les vaches laitières Prim’Holstein (35% d'échecs des inséminations avant J16). Or les
vaches laitières hautes productrices ont un taux plasmatique en progestérone en moyenne 25% plus
bas après l’ovulation ( probablement à un métabolisme stéroïdien augmenté). De plus, un taux
plasmatique élevé en progestérone en période post-conceptionnelle (dès J3) a été associé à une
augmentation (i) de la taille de l'embryon au moment de l’élongation (dès J13), (ii) de la production
trophoblastique en IFN tau (dès J16), (iii) et du taux de gestation chez la vache laitière. Quelques
équipes s’intéressent à l’action indirecte de la progestérone sur l'embryon par la modification des
sécrétions endométriales. Cependant, les effets de la progestérone sur l'embryon lui-même et sur
l’oviducte en début de gestation n’ont pour l’instant pas été explorés.
Objectifs du stage et approches expérimentales : 1) explorer l'expression des récepteurs de la
progestérone dans l'embryon et l’oviducte bovins par RT-qPCR, immunocytochimie et western-blot ; 2)
tester l’hypothèse d’un effet direct de la progestérone sur l’embryon bovin précoce par des cultures in
vitro en présence ou en absence de cellules oviductales.
Techniques mises en œuvre par le stagiaire : RT-PCR, PCR quantitative en temps réel,
immunocytochimie, western-blot, culture d’embryons
Publications du responsable de stage au cours des 5 dernières années :
- Saint-Dizier M, Chopineau M, Dupont J, Daels PF, Combarnous Y (2003) Expression and
binding activity of Luteinizing Hormone/Chorionic Gonadotropin receptors in the primary corpus
luteum during early pregnancy in the mare. Biol Reprod 69:1743-1749.
- Saint-Dizier M, Reynaud K, Chastant-Maillard S (2004) Chromatin, microtubules and kinases
activities during meiotic resumption in bitch oocytes. Mol Reprod Dev 68:205-212.
- Saint-Dizier M, Chopineau M, Dupont J, Combarnous Y (2004) Expression of the full-length
and alternatively spliced equine LH/CG receptor mRNAs in the primary corpus luteum and foetal
gonads during pregnancy. Reproduction 128:219-28.
- Saint-Dizier M, Foulon-Gauze F, Lecomte F, Combarnous Y, Chopineau M (2004) Cloning
and functionnal expression of the recombinant equine LH/CG receptor. J Endocrinol 183:551-559.
- Reynaud K, Saint-Dizier M, Chastant-Maillard S (2004) In vitro maturation and fertilization of
canines oocytes. In: Methods in Molecular Biology, 253:255-272. Ed. H. Schatten, Humana Press.
- Reynaud K, Fontbonne A, Marseloo N, Viaris C, Saint-Dizier M, Chastant-Maillard S (2006) In
vivo canine oocyte maturation, fertilization and early embryogenesis : a review. Theriogenology
66:1685-93. Epub 2006 Feb 20.
- Saint-Dizier M, Malandain E, Thoumire S, Remy B, Chastant-Maillard S (2007) Expression of
Follicle Stimulating Hormone and Luteinizing Hormone receptors during follicular growth in the
domestic cat ovary Mol Reprod Dev 2007 Jan 11 (Epub ahead of print).
- Saint-Dizier M, Jaffré N, Reynaud K, Remy B, Thoumire S and Chastant-Maillard S (2008)
Expression of Follicle Stimulating Hormone and Luteinising Hormone binding sites in the bitch ovary
during the follicular phase. Reproduction (soumis pour publication).
Chavatte-Palmer P, Laigre P, Juillien C, Heyman Y, Constant F, Guillomot M, LeBourhis D, Renard
JP. Ultrasound measurements of bovine somatic clones at day 50 and 64 of pregnancy. 2004 ;
Reproduction Fertility and Development, 16 : 138-139.
Chavatte-Palmer P, Guillomot M, Ellis S, Roiz J, Servely JL, Constant F, Laigre P, Heyman Y, Hue I.
Placental expression of major histocompatibility complex class I in bovine somatic clones. 2007 ;
Cloning and Stem Cells, 9.
Constant F, Guillomot M, Heyman Y, Vignon X, Laigre P, Servely JL, Renard JP, Chavatte-Palmer P.
Large offspring or large placenta syndrome? Morphometric analysis of late gestation bovine
placentomes from somatic nuclear transfer pregnancies complicated by hydrallantois. 2006 ;
Biology of Reproduction, 75 (1) : 122-130.
Heyman Y, Chavatte-Palmer P, Melo de Sousa N, Constant F, Guillomot M, Vignon X, Beckers JF.
Pregnancy associated glycoprotein (PAG) profiles during the peri-implantation period in
recipients carrying bovine somatic clones: preliminary results. 2005 ; Reproduction Fertility and
Development, 17 : 168-169.
Mialot JP, Constant F, Dezaux P, Grimard B, Deletang F, Ponter AA. Estrus synchronization in beef
cows: comparison between GnRH+PGF2+GnRH and PRID+PGF2+eCG. 2003 ;
Theriogenology, 60 : 319-330.
Autres informations
Etudiants actuellement en thèse ou en M2 dans l’équipe d’accueil. Pour chaque étudiant indiquez
le nom du responsable de thèse, l’année du début de la thèse et l’Ecole Doctorale de rattachement
Nom de l’étudiant
Responsable
de stage
M2 ou
thèse
Début
Fin
Ecole
Doctorale
Devenir de l’étudiant
Marcel
okouyiMfoumouwotari
A. Ponter
M2
2008
2009
ABIES
Dorothée Ledoux
B. Grimard
thèse
2006
2010
ABIES
Vibuntita
CHANKITISAKUL
A. Ponter
thèse
2007
2010
University of
Bangkok
Etudiants ayant préparé ou soutenu leur thèse, leur DEA ou leur M2 dans l’équipe d’accueil au
cours des cinq dernières années. Pour chaque étudiant indiquez le nom du responsable de
l’étudiant, l’année du début de la thèse et de fin de la thèse, l’Ecole Doctorale de rattachement et le
devenir de l’étudiant.
Responsable
de stage
M2 ou
thèse
Début
Fin
Ecole
Doctorale
Devenir de l’étudiant
Marie Saint-
Dizier
M2
2005
2006
ABIES
CDD au Centre International de
Recherche Médicale de
Franceville (Gabon)
B. Grimard
thèse
2008
ABIES
IR INRA Nouzilly
Cette proposition de stage s’adresse-t-elle spécifiquement à un étudiant scientifique, médecin
ou vétérinaire ou bien est-il ouvert à tous les profils ?
Tous les profils
Ce sujet peut-il donner lieu à une thèse ?
Oui sous réserve de l’obtention d’une bourse
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