Stage proposé par Marie SAINT-DIZIER et Fabienne CONSTANT AgroParisTech UMR 1198 INRA/ENVA/CNRS Biologie du Développement et Reproduction 7 avenue du Général de Gaulle 94 700 MAISONS-ALFORT Téléphone : 01.44.08.18.52 Mail : [email protected] Site internet : www.agroparistech.fr Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Jean-Paul RENARD Intitulé de l’équipe d’accueil : Relations nutrition-reproduction chez les bovins Prénom et NOM du Responsable de l’équipe : Sylvie CHASTANT-MAILLARD Résumé du thème de recherche de l’équipe L’équipe « Relations nutrition-reproduction chez les bovins » s’intéresse à la fertilité des vaches laitières, notamment de la race Prim’Holstein, qui diminue régulièrement depuis les années 50, en France comme dans d’autres pays. La baisse de fertilité observées chez ces femelles très fortement sélectionnées pour la production de lait a probablement plusieurs origines telles qu’une détection des chaleurs plus difficile et une augmentation de la mortalité embryonnaire. Différents axes de recherche sont ainsi abordés dans l’équipe. Titre du projet de stage : Effets de la progestérone sur les interactions mère-conceptus chez la vache laitière Prénom, NOM, téléphone et adresse e-mail du Responsable du stage: - Marie SAINT-DIZIER ([email protected]) : enseignant-chercheur AgroParisTech, 16 rue Claude Bernard 75005 PARIS, tel : 01.44.08.18.52 - Fabienne CONSTANT ([email protected]) : enseignant-chercheur ENVA, 7 avenue du Général de Gaulle 94700 Maisons-Alfort, tel : 01.43.96.73.69 Projet de stage : Situation du sujet : La mortalité embryonnaire pré-implantatoire est une cause majeure de baisse de la fertilité chez les vaches laitières Prim’Holstein (35% d'échecs des inséminations avant J16). Or les vaches laitières hautes productrices ont un taux plasmatique en progestérone en moyenne 25% plus bas après l’ovulation (dû probablement à un métabolisme stéroïdien augmenté). De plus, un taux plasmatique élevé en progestérone en période post-conceptionnelle (dès J3) a été associé à une augmentation (i) de la taille de l'embryon au moment de l’élongation (dès J13), (ii) de la production trophoblastique en IFN tau (dès J16), (iii) et du taux de gestation chez la vache laitière. Quelques équipes s’intéressent à l’action indirecte de la progestérone sur l'embryon par la modification des sécrétions endométriales. Cependant, les effets de la progestérone sur l'embryon lui-même et sur l’oviducte en début de gestation n’ont pour l’instant pas été explorés. Objectifs du stage et approches expérimentales : 1) explorer l'expression des récepteurs de la progestérone dans l'embryon et l’oviducte bovins par RT-qPCR, immunocytochimie et western-blot ; 2) tester l’hypothèse d’un effet direct de la progestérone sur l’embryon bovin précoce par des cultures in vitro en présence ou en absence de cellules oviductales. Techniques mises en œuvre par le stagiaire : RT-PCR, PCR quantitative en temps réel, immunocytochimie, western-blot, culture d’embryons Publications du responsable de stage au cours des 5 dernières années : Saint-Dizier M, Chopineau M, Dupont J, Daels PF, Combarnous Y (2003) Expression and binding activity of Luteinizing Hormone/Chorionic Gonadotropin receptors in the primary corpus luteum during early pregnancy in the mare. Biol Reprod 69:1743-1749. Saint-Dizier M, Reynaud K, Chastant-Maillard S (2004) Chromatin, microtubules and kinases activities during meiotic resumption in bitch oocytes. Mol Reprod Dev 68:205-212. Saint-Dizier M, Chopineau M, Dupont J, Combarnous Y (2004) Expression of the full-length and alternatively spliced equine LH/CG receptor mRNAs in the primary corpus luteum and foetal gonads during pregnancy. Reproduction 128:219-28. Saint-Dizier M, Foulon-Gauze F, Lecomte F, Combarnous Y, Chopineau M (2004) Cloning and functionnal expression of the recombinant equine LH/CG receptor. J Endocrinol 183:551-559. Reynaud K, Saint-Dizier M, Chastant-Maillard S (2004) In vitro maturation and fertilization of canines oocytes. In: Methods in Molecular Biology, 253:255-272. Ed. H. Schatten, Humana Press. Reynaud K, Fontbonne A, Marseloo N, Viaris C, Saint-Dizier M, Chastant-Maillard S (2006) In vivo canine oocyte maturation, fertilization and early embryogenesis : a review. Theriogenology 66:1685-93. Epub 2006 Feb 20. Saint-Dizier M, Malandain E, Thoumire S, Remy B, Chastant-Maillard S (2007) Expression of Follicle Stimulating Hormone and Luteinizing Hormone receptors during follicular growth in the domestic cat ovary Mol Reprod Dev 2007 Jan 11 (Epub ahead of print). Saint-Dizier M, Jaffré N, Reynaud K, Remy B, Thoumire S and Chastant-Maillard S (2008) Expression of Follicle Stimulating Hormone and Luteinising Hormone binding sites in the bitch ovary during the follicular phase. Reproduction (soumis pour publication). Chavatte-Palmer P, Laigre P, Juillien C, Heyman Y, Constant F, Guillomot M, LeBourhis D, Renard JP. Ultrasound measurements of bovine somatic clones at day 50 and 64 of pregnancy. 2004 ; Reproduction Fertility and Development, 16 : 138-139. Chavatte-Palmer P, Guillomot M, Ellis S, Roiz J, Servely JL, Constant F, Laigre P, Heyman Y, Hue I. Placental expression of major histocompatibility complex class I in bovine somatic clones. 2007 ; Cloning and Stem Cells, 9. Constant F, Guillomot M, Heyman Y, Vignon X, Laigre P, Servely JL, Renard JP, Chavatte-Palmer P. Large offspring or large placenta syndrome? Morphometric analysis of late gestation bovine placentomes from somatic nuclear transfer pregnancies complicated by hydrallantois. 2006 ; Biology of Reproduction, 75 (1) : 122-130. Heyman Y, Chavatte-Palmer P, Melo de Sousa N, Constant F, Guillomot M, Vignon X, Beckers JF. Pregnancy associated glycoprotein (PAG) profiles during the peri-implantation period in recipients carrying bovine somatic clones: preliminary results. 2005 ; Reproduction Fertility and Development, 17 : 168-169. Mialot JP, Constant F, Dezaux P, Grimard B, Deletang F, Ponter AA. Estrus synchronization in beef cows: comparison between GnRH+PGF2+GnRH and PRID+PGF2+eCG. 2003 ; Theriogenology, 60 : 319-330. Autres informations Etudiants actuellement en thèse ou en M2 dans l’équipe d’accueil. Pour chaque étudiant indiquez le nom du responsable de thèse, l’année du début de la thèse et l’Ecole Doctorale de rattachement Nom de l’étudiant Responsable M2 ou Début Fin Ecole Devenir de l’étudiant de stage thèse Doctorale Marcel A. Ponter M2 2008 2009 ABIES okouyiMfoumouwotari Dorothée Ledoux B. Grimard thèse 2006 2010 ABIES Vibuntita A. Ponter thèse 2007 2010 University of CHANKITISAKUL Bangkok Etudiants ayant préparé ou soutenu leur thèse, leur DEA ou leur M2 dans l’équipe d’accueil au cours des cinq dernières années. Pour chaque étudiant indiquez le nom du responsable de l’étudiant, l’année du début de la thèse et de fin de la thèse, l’Ecole Doctorale de rattachement et le devenir de l’étudiant. Nom de Responsable M2 ou Début Fin Ecole Devenir de l’étudiant l’étudiant de stage thèse Doctorale Nina Jaffré Marie SaintM2 2005 2006 ABIES CDD au Centre International de Dizier Recherche Médicale de Franceville (Gabon) Sandrine B. Grimard thèse 2008 ABIES IR INRA Nouzilly Freret Cette proposition de stage s’adresse-t-elle spécifiquement à un étudiant scientifique, médecin ou vétérinaire ou bien est-il ouvert à tous les profils ? Tous les profils Ce sujet peut-il donner lieu à une thèse ? Oui sous réserve de l’obtention d’une bourse