Sujet Master 2007 Fonctionnement de la plante dans l’Environnement Stagiaire : Rolland Gaëlle Lieu du stage : Université Paris XI, laboratoire ESE et Station Alpine du Lautaret (entre avril et mai, si les conditions météorologiques le permettent) Responsable : Peter Streb (MC, HDR) La fonction ascorbate chez Soldanella alpina pendant le développement des feuilles au cours de l’année et sous différentes conditions expérimentales. Contexte : Les feuilles de S. alpina contiennent une forte concentration en ascorbate par rapport à d’autres plantes alpines ou plantes de plaine (Streb et al. 1997). Néanmoins, la concentration en ascorbate varie au cours de l’année dans les feuilles ; la concentration semble plus forte en été et diminue pendant l’hiver. Les conditions environnementales induisant une synthèse ou une dégradation de l’ascorbate demeurent inconnues. L’ascorbate a un rôle de protection cellulaire contre un stress du type oxydatif, en particulier dans les feuilles quand la lumière absorbée est forte et la température basse. Néanmoins, jusqu’à maintenant, ce rôle particulier de l’ascorbate (et également du glutathion) dans la protection des feuilles aux conditions lumière forte et température froide n’était pas montré chez S. alpina (Streb, non-publie). La concentration en ascorbate chez S. alpina semble beaucoup plus forte que la concentration nécessaire à la protection contre un stress froid. De plus, la majorité de l’ascorbate se trouve dans la vacuole, un compartiment cellulaire qui ne semble pas intervenir dans la protection vis-à-vis du stress oxydatif (Bligny nonpublie). Par contre, les feuilles de S. alpina tolèrent une très forte concentration en méthylviologène, un herbicide qui provoque un stress oxydatif dans le chloroplaste (Streb et al. 1998). On peut imaginer les autres fonctions d’ascorbate dans les feuilles de S. alpina, qui persistent l’hiver sous la neige. L’année suivante, les mêmes feuilles sont capables d’effectuer la photosynthèse après la fonte de la neige pendant quelques semaines. Au début de la saison de végétation, la concentration en ascorbate augmente dans les feuilles vertes « adultes » et diminue dans les feuilles sénescentes. Ainsi, l’ascorbate permet certainement de conserver les feuilles vertes durant l’hiver et de les protéger vis-à-vis d’un stress oxydatif (basse température, forts éclairements) au début de la saison de végétation. L’ascorbate peut être transféré dans les fleurs qui sont déjà formées sous la neige pour la même raison de protection. Au printemps, l’ascorbate peut être également nécessaire pour le forte quenching non photochimique, en gardant le cycle de xanthophylles actif. On peut ainsi penser que l’accumulation d’ascorbate chez S. alpina se fait dans ce compartiment vacuole, afin de permettre ces différentes fonctions de protection au moment de la saison de croissance. Objectifs du stage : Le but du stage est d’étudier la fonction ascorbate dans les feuilles de S. alpina, ainsi que la variation de ce métabolite au cours de l’année et sous plusieurs conditions expérimentales notamment : - Le rôle de la lumière pour accumuler et dégrader l’ascorbate sous température froide et à la température normale. - L’assimilation du carbone reliée à ces conditions. - La résistance vis-à-vis du stress oxydatif (induit par méthylviologène) dans les feuilles avec une concentration en ascorbate modifiée. Méthodes : Mesures de la concentration en ascorbate (enzymatique et par HPLC), fluorescence chlorophyllienne (miniPAM), échange gazeux (LiCOR), transport électronique autour du PSI, méthodes pour mesurer la destruction cellulaire. Streb P., Feierabend J., Bligny R. (1997). Resistance to photoinhibition of photosystem II and catalase and antioxidative protection in high mountain plants.. Plant, Cell and Environment 20: 1030-1040 Streb P., Shang W., Feierabend J., Bligny R. (1998) Divergent strategies of photoprotection in high-mountain plants. Planta 207: 313-324 Streb P., Aubert S., Gout E., Bligny R. (2003a) Reversibility of cold- and light-stress tolerance and accompanying changes of metabolite and antioxidant levels in the two high mountain plant species Soldanella alpina and Ranunculus glacialis. J. Exp. Bot. 54: 405-418 Streb P., Aubert S., Gout E., Bligny R. (2003b) Cold- and light-induced changes of metabolite and antioxidant levels in two high mountain plant species Soldanella alpina and Ranunculus glacialis and a lowland species Pisum sativum. Physiol. Plant. 118: 96-104 Streb P., Aubert S., Bligny R. (2003c) High temperature effects on light sensitivity in the two high mountain plant species Soldanella alpina (L.) and Ranunculus glacialis (L.). Plant Biol. 5, 432-440 Streb P., Josse E.-M., Gallouët E., Baptist F., Kuntz M., Cornic G. (2005) Evidence for alternative electron sinks to photosynthetic carbon assimilation in the high mountain plant species Ranunculus glacialis. Plant, Cell Environment 28, 1123-1135