Stage proposé par Nom et adresse du Laboratoire ou de l’Unité : Téléphone : Mail : Site internet : Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Intitulé de l ‘équipe d’accueil : Cell cycle in Eggs and Embryos Prénom et NOM du Responsable de l’équipe : Résumé du thème de recherche de l’équipe (une dizaine de lignes maximum) Titre du projet de stage : Asymmetric cell division Prénom, NOM, téléphone et adresse e-mail du Responsable du stage: Alex McDougall, 04 93 76 3777, [email protected]. Projet de stage : (une vingtaine de lignes maximum) La forme de l' embryon est généré à partir de l'information codée dans l'ADN qui modifie le comportement des cellules . Comment ce comportement cellulaire est influencé par l'information génétique est une question majeure en biologie du développement . Pour répondre à cette question, nous étudions un relativement simple embryon de marine chordés (le ascidie) qui commence à gastrulate avec un petit nombre de cellules (112) plutôt que plusieurs milliers de cellules que chez les vertébrés . Nous étudions trois comportements cellulaires qui contrôlent ensemble comment le gastrula embryon prend forme . Ce sont clivage inegal / division cellulaire asymétrique (ACD) , la division cellulaire orientée et la durée du cycle cellulaire . Parce qu'il n'y a que 112 cellules , nous étudions ces comportements cellulaires au niveau d'une seule cellule . Actuellement, nous avons une compréhension moléculaire partielle de la façon dont chacun de ces trois comportements cellulaires est contrôlée . Par exemple, au cours de l' ACD le cellule se divise dans une orientation prédéfinie. Ceci est provoqué par un sous-domaine cortical qui attire l'un des pôles du fuseau mitotique . L'un des exemples les plus clairs d'une structure corticale qui influence l'orientation de la division cellulaire se trouve dans les embryons d'ascidies . Au cours du développement embryonnaire dans les ascidies trois ACD successives à partir de le stade 8 cellule génèrent deux petite cellules germinales au stade 64 cellule. La structure corticale dans les ascidies est appelé le CAB (centrosome attracting body). Le CAB est visible tout au long du cycle cellulaire par microscopie DIC. Grâce à un programme de GFP screening , nous avons identifié plus d'une douzaine de protéines qui sont localisées au corticale CAB. Nous avons confirmé l'identité des protéines connues pour être impliquées dans de l'ACD , mais nous avons aussi découvert de nouvelles protéines qui offrent un nouvel éclairage sur la façon dont ACD peut être orchestré dans les cellules . Techniques mises en œuvre par le stagiaire : Culture des embryons Biologie moleculaire Imagerie Publications du Responsable de stage au cours des 5 dernières années : 1. Prodon, F., Chenevert, J., Hébras, C., Dumollard, R., Faure, E., Gonzalez-Garcia,F., Nishida, H., Sardet, C and McDougall, A. (2010). Dual mechanism controls asymmetric spindle position in ascidian germ cell precursors. Development, 137, 211-221. 2. Dumollard ,R., Levasseur ,M., Hebras, C., Huitorel, P., Carroll, M., Chambon, J-P. and McDougall,. A. (2011). Mos limits the number of meiotic divisions in urochordate eggs. Development, 138. 885895. 3. Sardet,C., McDougall, A., Yasuo,H., Chenevert, J., Pruliere, G., Dumollard, R., Hudson, C., Hebras, C., Nguyen, N. and Paix, A. (2011). Embryological Methods in Ascidians: the Villefranchesur-Mer Protocols.: Methods in Molecular Biology,. 770, 365-400. 4. McDougall, A., Chenevert, J., Lee, K. W., Hebras, C. and Dumollard, R. (2011). Cell Cycle in Ascidian Eggs and Embryos. Results Probl Cell Differ.53:153-69. 5. McDougall, A., Chenevert, J. and Dumollard, R. (2012). Cell Cycle Control in Oocytes and during Embryonic Cleavage Cycles in Ascidians. Int Rev Cell Mol Biol. 297. 235-264. 6. Hebras, C. and McDougall, A. (2012). Urochordate ascidians possess a single isoform of Aurora kinase that localizes to the midbody via TPX2 in eggs and cleavage stage embryos. PLOS One. 7 (9), e45431. 7. Chambon, J.P., Touati, S. A., Berneau, S., Cladière, D., Hebras, C., Groeme, R., McDougall, A. and Wassmann, K (2013). The PP2A Inhibitor I2PP2A is Essential for Sister Chromatid Segregation in Oocyte Meiosis II. Current Biology 23 (6), 485. 8. Negishi, T., McDougall, A. and Yasuo, H. (2013). Practical tips for imaging ascidian embryos. Dev. Growth and Diff. 55, 446-53. 9. Levasseur, M., Dumollard, R., Chambon, J-P., Hebras, C., Sinclair, M., Whitaker, M. and McDougall, A. (2013). Release from meiotic arrest in ascidian eggs requires the activity of two phosphatases but not CaMKII. Development 140:4583-4593. 10. Dumollard, R., Hebras, C., Besnardeau, L. and McDougall A. (2013). Beta-catenin patterns the cell cycle during maternal-to-zygotic transition in urochordate embryos. Dev Biol. 384: 331-342. 11. McDougall, A., Lee, K.W. and Dumollard, R. (2014). Microinjection and 4D fluorescence imaging in the eggs and embryos of the ascidian Phallusia mammillata. Methods in Molecular Biology. 1128:175-85 Autres informations: L’hébergement sera offert par le laboratoire Etudiants actuellement en thèse ou en M2 dans l’équipe d’accueil. Pour chaque étudiant indiquez le nom du responsable de thèse, l’année du début de la thèse et l’Ecole Doctorale de rattachement Etudiants ayant préparé ou soutenu leur thèse ou leur M2 dans l’équipe d’accueil au cours des six dernières années. Pour chaque étudiant indiquez le nom du responsable de l’étudiant, l’année du début de la thèse et de fin de la thèse, l’Ecole Doctorale de rattachement et le devenir de l’étudiant. Cette proposition de stage s’adresse-t-elle spécifiquement à un étudiant scientifique, médecin ou vétérinaire ou bien est-il ouvert à tous les profils ? Etudiant scientifique Ce sujet peut-il donner lieu à une thèse ? Oui