Nom : Habert

Stage proposé par Rémi DUMOLLARD
UMR7009, Laboratoire de Biologie du Developpement
Station Zoologique de Villefranche sur Mer
06230 Villefranche sur Mer
Téléphone : 04 93 76 3777
Mail : rem[email protected]
Site internet : http://www.biodev.obs-vlfr.fr/
Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Evelyn Houliston
Intitulé de l ‘équipe d’accueil : Equipe Fertilization and Cell Cycle
Prénom et NOM du Responsable de l’équipe : Alex McDougall
Résumé du thème de recherche de l’équipe (une dizaine de lignes maximum)
Notre équipe étudie le cycle cellulaire méiotique et mitotique dans les œufs et embryons d’ascidie.
Nous essayons de comprendre notamment comment l’œuf pondu est bloqué en métaphase de meiose
I et comment l’entrée du spermatozoide stimule la reprise de la meiose et l’entrée dans des cycles
cellulaires mitotiques rapides (ne contenant pas de phase G1 et G2). De plus la transition metaphase-
anaphase de meiose I est plus particulièrement étudiée car c’est lors de cette transition que la majeure
partie des aneuploidies est créée.
Enfin nous voulons comprendre comment l’oscillateur de cycle cellulaire présent dans l’œuf est modifié
dans les différents lignages de l’embryon (génération de domaines mitotiques). Et comment la
modification de l’oscillateur du cycle dans chaque domaine mitotique permet un pattern de clivage
invariant, responsable de la morphogenèse d’un têtard nageant ne contenant qu’un nombre limité de
cellules.
Etude du rôle de la phosphatase cdc25 dans la régulation de la synthese d’ADN dans
l’embryon d’ascidie
Prénom, NOM, téléphone et adresse e-mail du Responsable du stage:
Remi DUMOLLARD (mail :[email protected]r)
Projet de stage :
Dans l’embryon d’ascidie, la spécification des lignages cellulaires est réalisée dans un contexte de
clivages invariants durant lesquels le timing de division cellulaire et l’orientation des plans de clivages
sont précisément définis pour chaque cellule de l’embryon. Ainsi la durée du cycle cellulaire doit être
rallongée au cours du développement pour permettre la morphogenèse stéréotypée de l’embryon.
Cdc25 est la phosphatase activant les cyclin dependant kinases (cdk) qui régule l’entrée en phase S et
l’entrée en phase M. L’embryon d’ascidie ne possède qu’un seul isoforme de cdc25 qui récapitule
l’action des 3 cdc25 mammifères. Il est cependant encore inconnu comment cdc25 participe à la
régulation du cycle cellulaire dans les embryons d’ascidie. Nous avons découvert que cdc25 (ainsi que
la cycline E) se retrouve en interphase sur les foci de réplication d’ADN (ou « replication factories ») et
sur les centrosomes. Ces résultats suggèrent que cdc25 pourrait réguler à la fois la durée du cycle
cellulaire et l’orientation des fuseaux mitotiques. Lors de ce projet l’étudiant devra confirmer le rôle
majeur de cdc25 dans la régulation du cycle cellulaire et établir comment cdc25 régule le pattern de
division dans l’embryon précoce.
Techniques mises en œuvre par le stagiaire :
Clonage de gènes d’intérêt à partir d’une banque de cDNAs.
Synthèse in vitro d’ARNm cappés codant pour des GFPs (Venus, YFP, GFP, RFP).
Imagerie de fluorescence conventionnelle, confocale et biphotons et imagerie de déconvolution.
Fécondation et culture d’embryons marins.
Micro injection d’œufs et embryons d’ascidie.

Remarque : l’hébergement est sur le site de la station marine et est pris en charge par notre
laboratoire
(cf http://www.obs-vlfr.fr/promo_oem/promo2008/htm_oemtv/tv_Vlfrspirit07.htm)
Publications du Responsable de stage au cours des 5 dernières années :
Dumollard R, Duchen M. and Sardet C. (2006). Calcium signals and mitochondria at fertilisation.
Sem. Cell. Dev. Biol. 17(2):314-23.
Dumollard R, Duchen M. and Carroll J. (2007a). The role of mitochondrial function in the oocyte and
embryo. Curr. Top. Dev. Biol. 2007;77:21-49
Dumollard R, Ward Z, Carroll J.and Duchen M. (2007b). Regulation of redox metabolism in the
mouse oocyte and early embryo. Development 134(3):455-65
Dumollard R, Campbell K, Halet G, Carroll J, and Swann K. (2008). Regulation of cytosolic and
mitochondrial ATP levels in mouse eggs and zygotes. Developmental Biology.;316(2):431-40.
Dumollard R, Duchen M., Carroll J and Swann K. (2009). Mitochondrial function and redox state in
mammalian embryos. Sem. Cell. Dev. Biol. (in press).
Autres informations
Etudiants actuellement en thèse ou en M2 dans l’équipe d’accueil. Pour chaque étudiant indiquez
le nom du responsable de thèse, l’année du début de la thèse et l’Ecole Doctorale de rattachement
Aucun
Etudiants ayant préparé ou soutenu leur thèse ou leur M2 dans l’équipe d’accueil au cours des
cinq dernières années. Pour chaque étudiant indiquez le nom du responsable de l’étudiant, l’année
du début de la thèse et de fin de la thèse, l’Ecole Doctorale de rattachement et le devenir de l’étudiant.
Aucun
Cette proposition de stage s’adresse-t-elle spécifiquement à un étudiant scientifique, médecin
ou vétérinaire ou bien est-il ouvert à tous les profils ?
Ouvert à tous les profils
Ce sujet peut-il donner lieu à une thèse ?
Bien sur