Nom : Habert
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Stage proposé par Rémi DUMOLLARD UMR7009, Laboratoire de Biologie du Developpement Station Zoologique de Villefranche sur Mer 06230 Villefranche sur Mer Téléphone : 04 93 76 3777 Mail : [email protected] Site internet : http://www.biodev.obs-vlfr.fr/ Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Evelyn Houliston Intitulé de l ‘équipe d’accueil : Equipe Fertilization and Cell Cycle Prénom et NOM du Responsable de l’équipe : Alex McDougall Résumé du thème de recherche de l’équipe (une dizaine de lignes maximum) Notre équipe étudie le cycle cellulaire méiotique et mitotique dans les œufs et embryons d’ascidie. Nous essayons de comprendre notamment comment l’œuf pondu est bloqué en métaphase de meiose I et comment l’entrée du spermatozoide stimule la reprise de la meiose et l’entrée dans des cycles cellulaires mitotiques rapides (ne contenant pas de phase G1 et G2). De plus la transition metaphaseanaphase de meiose I est plus particulièrement étudiée car c’est lors de cette transition que la majeure partie des aneuploidies est créée. Enfin nous voulons comprendre comment l’oscillateur de cycle cellulaire présent dans l’œuf est modifié dans les différents lignages de l’embryon (génération de domaines mitotiques). Et comment la modification de l’oscillateur du cycle dans chaque domaine mitotique permet un pattern de clivage invariant, responsable de la morphogenèse d’un têtard nageant ne contenant qu’un nombre limité de cellules. Etude du rôle de la phosphatase cdc25 dans la régulation de la synthese d’ADN dans l’embryon d’ascidie Prénom, NOM, téléphone et adresse e-mail du Responsable du stage: Remi DUMOLLARD (mail :[email protected]) Projet de stage : Dans l’embryon d’ascidie, la spécification des lignages cellulaires est réalisée dans un contexte de clivages invariants durant lesquels le timing de division cellulaire et l’orientation des plans de clivages sont précisément définis pour chaque cellule de l’embryon. Ainsi la durée du cycle cellulaire doit être rallongée au cours du développement pour permettre la morphogenèse stéréotypée de l’embryon. Cdc25 est la phosphatase activant les cyclin dependant kinases (cdk) qui régule l’entrée en phase S et l’entrée en phase M. L’embryon d’ascidie ne possède qu’un seul isoforme de cdc25 qui récapitule l’action des 3 cdc25 mammifères. Il est cependant encore inconnu comment cdc25 participe à la régulation du cycle cellulaire dans les embryons d’ascidie. Nous avons découvert que cdc25 (ainsi que la cycline E) se retrouve en interphase sur les foci de réplication d’ADN (ou « replication factories ») et sur les centrosomes. Ces résultats suggèrent que cdc25 pourrait réguler à la fois la durée du cycle cellulaire et l’orientation des fuseaux mitotiques. Lors de ce projet l’étudiant devra confirmer le rôle majeur de cdc25 dans la régulation du cycle cellulaire et établir comment cdc25 régule le pattern de division dans l’embryon précoce. Techniques mises en œuvre par le stagiaire : Clonage de gènes d’intérêt à partir d’une banque de cDNAs. Synthèse in vitro d’ARNm cappés codant pour des GFPs (Venus, YFP, GFP, RFP). Imagerie de fluorescence conventionnelle, confocale et biphotons et imagerie de déconvolution. Fécondation et culture d’embryons marins. Micro injection d’œufs et embryons d’ascidie. Remarque : l’hébergement est sur le site de la station marine et est pris en charge par notre laboratoire (cf http://www.obs-vlfr.fr/promo_oem/promo2008/htm_oemtv/tv_Vlfrspirit07.htm) Publications du Responsable de stage au cours des 5 dernières années : Dumollard R, Duchen M. and Sardet C. (2006). Calcium signals and mitochondria at fertilisation. Sem. Cell. Dev. Biol. 17(2):314-23. Dumollard R, Duchen M. and Carroll J. (2007a). The role of mitochondrial function in the oocyte and embryo. Curr. Top. Dev. Biol. 2007;77:21-49 Dumollard R, Ward Z, Carroll J.and Duchen M. (2007b). Regulation of redox metabolism in the mouse oocyte and early embryo. Development 134(3):455-65 Dumollard R, Campbell K, Halet G, Carroll J, and Swann K. (2008). Regulation of cytosolic and mitochondrial ATP levels in mouse eggs and zygotes. Developmental Biology.;316(2):431-40. Dumollard R, Duchen M., Carroll J and Swann K. (2009). Mitochondrial function and redox state in mammalian embryos. Sem. Cell. Dev. Biol. (in press). Autres informations Etudiants actuellement en thèse ou en M2 dans l’équipe d’accueil. Pour chaque étudiant indiquez le nom du responsable de thèse, l’année du début de la thèse et l’Ecole Doctorale de rattachement Aucun Etudiants ayant préparé ou soutenu leur thèse ou leur M2 dans l’équipe d’accueil au cours des cinq dernières années. Pour chaque étudiant indiquez le nom du responsable de l’étudiant, l’année du début de la thèse et de fin de la thèse, l’Ecole Doctorale de rattachement et le devenir de l’étudiant. Aucun Cette proposition de stage s’adresse-t-elle spécifiquement à un étudiant scientifique, médecin ou vétérinaire ou bien est-il ouvert à tous les profils ? Ouvert à tous les profils Ce sujet peut-il donner lieu à une thèse ? Bien sur
