Stage proposé par Nathalie BEAUJEAN CR1, INRA UMR BDR « Biologie du Développement et Reproduction » Domaine de Vilvert 78350 Jouy en Josas Téléphone : 0134652903 Mail : [email protected] Directeur du Laboratoire : Corinne COTINOT Titre : Modifications épigénétiques dans l’embryon de mammifère après la fécondation Projet de stage : situation du sujet, objectif du stage, approches expérimentales Les connaissances actuelles dans le domaine de l’organisation spatiale des noyaux interphasiques de cellules somatiques montrent que l’espace nucléaire est composé de compartiments de structures et de fonctionnalités bien distinctes, et à proximité desquels les gènes se localisent en fonction de leur état transcriptionnel. Notre groupe s’intéresse à cette organisation dans le cadre de l’embryon préimplantatoire (du stade oeuf jusqu'à l'implantation dans l'utérus maternel). Notre étudions ces évènements principalement lors de la mise en route du génome embryonnaire qui a lieu progressivement après la fécondation et dont le « timing » varie en fonction des espèces (bovin, lapin ou souris). L’objectif de ce stage est de comparer la distribution spatio-temporelle de nouvelles marques épigénétiques susceptibles de moduler l’activité transcriptionnelle du génome embryonnaire dans ces différentes espèces modèles; principalement par immunolocalisation 3D dans les noyaux de ces embryons au cours du développement préimplantatoire. Techniques mises en œuvre par le stagiaire : Prélèvement d’embryons, Culture cellulaire, Immuno-marquage, Microscopie à Fluorescence Principales publications du responsable de stage au cours des 5 dernières années : Gao Y, Hyttel P et al. Epigenetic regulation of gene expression in porcine epiblast, hypoblast, trophectoderm and epiblast-derived neural progenitor cells. Epigenetics. 2011 Sep 1;6(9). Reis E Silva AR, Adenot P, et al. Dynamics of DNA methylation levels in maternal and paternal rabbit genomes after fertilization. Epigenetics. 2011 Aug 1;6(8):987-93. Le Bourhis D, Beaujean N et al. Nuclear remodeling in bovine somatic cell nuclear transfer embryos using MG132-treated recipient oocytes. Cell Reprogram. 2010 Dec;12(6):729-38. Andrey P, Kiêu K et al. Statistical analysis of 3D images detects regular spatial distributions of centromeres and chromocenters in animal and plant nuclei. PLoS Comput Biol. 2010 Jul 8;6(7):e1000853. Pichugin A, Le Bourhis D et al. Dynamics of constitutive heterochromatin: two contrasted kinetics of genome restructuring in early cloned bovine embryos. Reproduction. 2010 Jan;139(1):129-37. Maalouf WE, Liu Z et al. Trichostatin A treatment of cloned mouse embryos improves constitutive heterochromatin remodeling as well as developmental potential to term. BMC Dev Biol. 2009 Feb 11;9:11.