CYTOLOGIE RESUME 1 2 3 4 5 6 Chimie Préparatoire ........................................................................................................... 4 1.1 organisation moléculaire ............................................................................................ 4 1.2 chimie ......................................................................................................................... 4 1.2.1 Atome ..................................................................................................................... 4 1.2.1.1 Organisation de l'atome ................................................................................... 4 1.2.1.2 Valence ............................................................................................................ 4 1.2.2 La molarité ............................................................................................................. 4 1.2.3 Liaisons chimiques................................................................................................. 5 1.2.3.1 liaison covalente .............................................................................................. 5 1.2.3.2 liaison ionique ................................................................................................. 5 1.2.3.3 liaison hydrogène ............................................................................................ 5 1.3 Propriétés physico-chimique en relation avec le maintien du vivant ........................ 5 1.3.1 Importance de l'eau ................................................................................................ 5 1.3.2 la solvatation .......................................................................................................... 5 1.3.3 Acidité / Ph ............................................................................................................ 6 Biochimie ........................................................................................................................... 6 2.1 Molécules organiques ................................................................................................ 6 2.1.1 Les glucides ........................................................................................................... 6 2.1.2 Les lipides .............................................................................................................. 7 2.1.3 Les protéïnes .......................................................................................................... 7 2.1.3.1 structures chimiques ........................................................................................ 7 Thermodynamique ............................................................................................................. 9 3.1.1 conservation de l'énergie ........................................................................................ 9 3.1.2 évolution en physique macroscopique ................................................................... 9 3.1.2.1 Entropie ......................................................................................................... 10 3.1.3 Le concept de l'énergie libre ................................................................................ 10 3.1.3.1 Réactions exergoniques (ou exothermiques) ................................................ 10 3.1.3.2 Réactions endergoniques (endothermiques) ................................................. 10 La cellule .......................................................................................................................... 10 4.1 Technique d'études ................................................................................................... 11 4.1.1 La microscopie (pp: 4-6) ...................................................................................... 11 4.1.1.1 microscopie optique (ou photonique): .......................................................... 11 4.1.1.2 microscopie électronique .............................................................................. 11 4.1.1.3 microscopie à fluorescence ........................................................................... 11 4.1.1.4 préparation des échantillons .......................................................................... 12 4.1.2 Autres techniques ................................................................................................. 12 4.2 Théorie cellulaire (p 6)............................................................................................. 12 4.3 Types de cellules (p 7-8) .......................................................................................... 12 4.3.1 Les cellules procaryotes ....................................................................................... 12 4.3.2 Les cellules eucaryotes ........................................................................................ 12 4.3.2.1 Tailles des différents éléments ...................................................................... 13 4.3.2.2 Exemple de cellules eucaryotes .................................................................... 13 La membrane ................................................................................................................... 14 5.1 définition .................................................................................................................. 14 5.2 Composition chimique ............................................................................................. 14 5.3 Dynamique membranaire ......................................................................................... 15 Métabolisme: énergie de la cellule .................................................................................. 15 6.1 Introduction .............................................................................................................. 15 6.1.1 Termes de base ..................................................................................................... 15 6.1.2 Autotrophes .......................................................................................................... 15 6.1.3 Hétérotrophe ........................................................................................................ 15 6.2 Energie cellulaire ..................................................................................................... 15 6.2.1 respiration cellulaire............................................................................................. 15 6.2.1.1 Glycolyse....................................................................................................... 15 6.2.1.2 La molécule d'ATP ........................................................................................ 16 6.3 les mitochondries ..................................................................................................... 16 6.3.1 morphologie ......................................................................................................... 17 6.3.1.1 membrane externe ......................................................................................... 17 6.3.1.2 chambre externe ............................................................................................ 17 6.3.1.3 membrane interne .......................................................................................... 17 6.3.1.4 matrice ........................................................................................................... 17 6.3.2 Transformation de l'ADP en ATP ........................................................................ 17 7 le cytosquelette................................................................................................................. 18 7.1 Généralités ............................................................................................................... 18 7.1.1 Définition ............................................................................................................. 18 7.1.2 3 types de filaments ............................................................................................. 18 7.1.2.1 Microfilaments d'actine ................................................................................. 18 7.1.2.2 Microtubules ................................................................................................. 18 7.1.2.3 Filaments intermédiaires ............................................................................... 18 7.2 Les microfilaments d'actine ..................................................................................... 18 7.2.1 La forme G ........................................................................................................... 18 7.2.2 La forme F............................................................................................................ 19 7.2.2.1 Polymérisation de l'actine ............................................................................. 19 7.2.2.2 Fonctions ....................................................................................................... 19 7.2.3 Types d'arrangements des fibres d'actine ............................................................. 19 7.2.3.1 protéines associés à l'actine: exemple ........................................................... 19 7.2.4 Poisons de l'actine ................................................................................................ 19 7.3 Les filaments intermédiaires .................................................................................... 20 7.4 Les microtubules ...................................................................................................... 20 7.4.1 Centrioles, centrosomes et COMT ....................................................................... 20 7.4.2 Fonctions .............................................................................................................. 21 7.4.3 Cils et flagelles ..................................................................................................... 21 8 Noyau / mitose / meiose ................................................................................................... 21 8.1 Noyau cellulaire ....................................................................................................... 21 8.2 Interphase ................................................................................................................. 21 8.2.1 Phase G1 .............................................................................................................. 21 8.2.2 Phase S ................................................................................................................. 22 8.2.3 Phase G2 .............................................................................................................. 22 8.2.4 Les "check-point" du cycle cellulaire .................................................................. 22 8.3 Mitose ...................................................................................................................... 22 8.3.1 Prophase ............................................................................................................... 22 8.3.2 Métaphase ............................................................................................................ 22 8.3.3 Anaphase .............................................................................................................. 23 8.3.4 Télophase ............................................................................................................. 23 8.4 méiose ...................................................................................................................... 23 8.4.1 termes de base ...................................................................................................... 23 8.4.2 Première division (division réductionnelle: sépare les paires de chromosomes homologues) 23 8.4.2.1 Prophase 1 ..................................................................................................... 23 8.4.2.2 Métaphase 1 .................................................................................................. 24 8.4.2.3 Anaphase 1 .................................................................................................... 24 8.4.2.4 Télophase 1 ................................................................................................... 24 8.4.3 Deuxième division: Division équationnelle (sépare les chromatides- soeurs) .... 24 8.4.3.1 Prophase 2 ..................................................................................................... 24 8.4.3.2 Métaphase 2 .................................................................................................. 24 8.4.3.3 Anaphase 2 .................................................................................................... 24 8.4.3.4 Télophase 2 ................................................................................................... 25 8.5 Conclusion ............................................................................................................... 25 8.5.1 mitose ................................................................................................................... 25 8.5.2 meïose .................................................................................................................. 25 8.5.3 possibilité d'évolution?......................................................................................... 25 9 Le réticulum endoplasmique- Golgi- Lysosomes ............................................................ 25 9.1 Le réticulum endoplasmique .................................................................................... 25 9.1.1 Réticulum endoplasmique Granuleux .................................................................. 26 9.1.1.1 Synthèse des protéines .................................................................................. 26 9.1.1.2 Glycosylation ................................................................................................ 26 9.1.1.3 Détoxification ................................................................................................ 26 9.1.1.4 Accumulation d'ions Ca2+ ............................................................................. 26 9.1.2 Le réticulum Endoplasmique lisse (REL) ............................................................ 27 9.1.2.1 Fonctions ....................................................................................................... 27 9.1.2.2 Synthèse des lipides ...................................................................................... 27 9.1.2.3 Détoxification ................................................................................................ 27 9.2 Appareil de Golgi (AG) ........................................................................................... 27 9.2.1 Fonction ............................................................................................................... 27 9.2.2 les Dyctiosomes ................................................................................................... 27 9.2.2.1 Région "Cis" .................................................................................................. 27 9.2.2.2 Région "médiane" ......................................................................................... 27 9.2.2.3 Région "Trans" .............................................................................................. 28 9.2.3 Glycosylation ....................................................................................................... 28 9.3 Les Lysosomes ......................................................................................................... 28 9.3.1 Formation des lysosomes ..................................................................................... 28 9.3.2 Membrane lysosomale ......................................................................................... 28 10 Trafic cellulaire ................................................................................................................ 28 10.1 transport passif ......................................................................................................... 28 10.2 Transport Actif ......................................................................................................... 29 10.3 Endocytose ............................................................................................................... 29 10.3.1 Pinocytose (action de "boire") ........................................................................... 29 10.3.2 phagocytose (action de "manger") ..................................................................... 29 10.3.3 endocytose par récepteurs interposés ................................................................. 30 10.3.3.1 Exemples ..................................................................................................... 30 10.4 Exocytose ................................................................................................................. 31 1 CHIMIE PREPARATOIRE 1.1 ORGANISATION MOLECULAIRE du plus simple au plus complexe: particule atome molécule protéine cellule 1.2 CHIMIE 1.2.1 combiner nucléaire) ATOME Particule d'un élément chimique qui forme la plus petites quantités susceptible de se élément indivisible sans perte de propriétés physique" (c'est le cas de la fission 1.2.1.1 Organisation de l'atome A. particules + proton [p ] : charge positive masse = 1 neutron [n0] : charge neutre masse = 1 électron [e ] : charge négative masse ~ 0 dans le noyau dans le noyau en périphérie Dans un atome il y a autant de proton que d'électron (pour maintenir une charge neutre). B. Les isotopes c'est une variante du même atome (même nombre de p+ mais nombre différent de n° ex: 12C (carbone 12) p+= 6 n° = 6 p+= 6 n° = 8 14C (carbone 14) les isotopes ont donc la même propriété chimique (autant de charge positive et de charge négative), mais pas le même poids. C. nombre et masse atomique Z (nombre atomique)= nombre de proton = nombre d'électron M (masse atomique)= nombre de proton + nombre de neutron 1.2.1.2 Valence C'est le nombre d'électron qu'un atome peut échanger avec un autre dans le but d'atteindre l'octet. règle de l'octet: la dernière couche d'un atome est stable quand elle possède 8 électrons 1.2.2 LA MOLARITE une mole = 6,023 . 1023 atomes ou molécule dans 1 litre de solvant A. Poids moléculaire M= poids relatif à l'atome d'H ou 1/12 12C = 1 D(alton) 1 D * 6,023.1023 = 1 g => si M = 180 D pM= 180g B. Molarité mesure de concentration. 1 molaire= 1 mole/litre de solution 1.2.3 LIAISONS CHIMIQUES liaisons chimiques = échange d'e- 1.2.3.1 liaison covalente mise en commun d'e- pour arriver à l'octet 1.2.3.2 liaison ionique attraction et perte définitive d'au moins un e- d'un "élément positif" (cation) en faveur d'un "élément négatif" (anion) stabilité de la molécule assurée par interaction entre charges opposées => partage inégal de e- entre 2 atomes 1.2.3.3 liaison hydrogène liaison faible et temporaire atome déjà lié attiré par un atome très électronégatifs délocalisation de charge 1.3 PROPRIETES PHYSICO-CHIMIQUE EN RELATION AVEC LE MAINTIEN DU VIVANT réaction chimique du vivant nécessite forcément milieu acqueux + + molécule polaire - 1.3.1 IMPORTANCE DE L'EAU échange et transport de molécule intervient dans l'ensemble des réactions du métabolisme régulation de la pression osmotique chaleur spécifique inertie thermique grande chaleur de vaporisation => température interne constante à forte température (transpiration) 1.3.2 LA SOLVATATION Capacité des molécules polaires à venir interagir avec d'autres atomes ou molécules. = Cl – = Na+ = H2O = couronne de solvatation 1.3.3 ACIDITE / PH dissociation de l'eau: H2O H+ + OHH+ est un proton très réactif OH- est un hydroxyle très réactif [H+] * [OH-] = 10-14 Dans le cas d'un acide fort (sinon, il existe d'autres formules): pH = -log [H+] si acide : pH < 7 ([H+] > [OH-]) si neutre: pH = 7 ([H+] = [OH-]) si basique: pH > 7 ([H+] < [OH-]) 2 BIOCHIMIE 2.1 MOLECULES ORGANIQUES ce sont des molécules composés essentiellement de Carbone et d'Hydrogène. il en existe 3 types principaux: les hydrocarbures (qui sont fabriqués naturellement à partir de vivant) les glucides les lipides et les protéines Ces 3 derniers sont produits par le vivant pour édifier leur structures et s'adapter au changement du milieu. Elles peuvent être synthétiser en laboratoire. 2.1.1 LES GLUCIDES corps ternaire (3 types d'atomes: C; H; O) produite surtout par photosynthèse molécules essentiellement énergique (amidon chez les plantes, glycogène chez l'animal) oxydé lors de la respirations cellulaires 3 sortes: o les monosaccharides (monomère) o les disaccharides (2 monomères) o les polysaccharides (polymères) 2.1.2 LES LIPIDES molécule hydrophobe réserve énergétique (chaîne carbonée oxydable) constituante de la membrane avec les protéines dépourvue de liaisons polaires plusieurs type de lipides: e.a. phospholipides, cholestérol, glycolipides,… 2.1.3 LES PROTEÏNES corps quaternaires (C; H; O; N) servent pour les structures servent d'enzyme il existe 3 types de protéines membranaires: o les intrinsèques protéine membrane o les périphériques ou extrinsèques o les ancrées dans les lipides acide gras milieu extérieur rendent compte de la spécificité et diversité membranaires échanges cellules milieu extérieur o réceptionneur de signaux o identité de la cellule 2.1.3.1 structures chimiques A. acides aminés constituant des protéines différenciés par le radical (20 sortes différentes) fonction carboxylique COOH (acide) fonction amine NH2 (base) atome H B. lien peptidique + acide aminé 1 acide aminé 2 ---------------------------------------------------------------------------------- + H2O dipeptide la Nature et la fonction d'une protéine seront déterminées par le nombre et le type d'AAs. c'est l'ensemble des interactions ("ponts hydrogène", "ponts disulfures", AA polaires, hydrophobes,…) qui donneront à la protéine sa forme particulière. C. niveau d'organisation dans la structure des protéines structure primaire: succession des AAs dans une chaîne simple structure secondaire: disposition de la chaîne d'AAs qui se tord en créant des ponts hydrogène o 2 types de structure secondaires tridimensionnelles: hélice (chaîne d'AAs qui s'enroule en spirale) feuillet plissé (ruban) o Ces structures sont hydrophobe : permet aux hélices de traverser la membrane. structure tertiaire: reploiement en fonction des liens disulfures (à partir de groupe sulfhydryls [-SH]) structures quaternaire: association de plusieurs chaînes polypeptidiques Certaines molécules sont propres à une cellules, ce sont essentiellement les protéines et glycoprotéines disposées à la surface de la membrane. 3 THERMODYNAMIQUE 2 principes de Carnot: 3.1.1 CONSERVATION DE L'ENERGIE premier principe de Carnot: l'énergie totale de l'univers est constante. Donc: ni création, ni destruction d'énergie; mais changement de forme 3.1.2 EVOLUTION EN PHYSIQUE MACROSCOPIQUE second principe: dans un système ouvert toute transformation d'énergie tend spontanément vers le désordre (entropie) 3.1.2.1 Entropie définition: tendance d'un système évoluant spontanément vers un état de plus basse énergie: le désordre. Les structures ordonnées ont tendance à augmenter leur entropie L'entropie d'un système isolé ne peut que croître ou rester stationnaire. 3.1.3 LE CONCEPT DE L'ENERGIE LIBRE Définition : capacité à produire un travail, de mouvoir une masse contre une force qui s'y oppose Un processus spontanée est un changement qui se fait sans l'utilisation d'énergie externe et conduit à un état plus stable. L'énergie libre est une mesure d'instabilité d'un système = portion de l'énergie potentielle qui est disponible pour faire un travail. Le changement d'énergie d'un système est marqué par un G G= H – T.S G= énergie libre H= enthalpie (énergie emmagasinée à l'intérieur d'une molécule au cours de sa formation) S= entropie T= 298°K 3.1.3.1 G <0 réaction spontanée mais peut nécessiter de l'énergie d'activation dégage de l'énergie R P + énergie H < 0 et Hproduit < Hréactif exemple: rupture de l'ATP 3.1.3.2 Réactions exergoniques (ou exothermiques) Réactions endergoniques (endothermiques) réaction non spontanée, nécessite de l'énergie en permanence absorbe de l'énergie R + énergie P H > 0 et HP > HR exemple: transformation de l'ADP en ATP 4 LA CELLULE 4.1 TECHNIQUE D'ETUDES 4.1.1 LA MICROSCOPIE (PP: 4-6) Création par Hook: il observe des cellules et leur compartiments au même moment, Leeuwenhoeck : observe des organismes unicellulaires résolution= capacité à distinguer deux points proches comme distinct ( différent de l'agrandissement) la résolution dépend de la longueur d'onde du rayonnement utilisé. 4.1.1.1 agrandissement: +/- 2000X résolution limitée à la lumière visible: +/- 2µm permet étude de la cellule (pas celle des organites) 4.1.1.2 microscopie optique (ou photonique): microscopie électronique agrandissement : 100.000 X (et plus) résolution augmentée grâce à l'utilisation des e- au lieu des photons: 0.2nm permet étude des organites, des molécules d'ADN…. A. A transmission – Identique au microscope photonique, faisceau d’ électrons au travers d’un spécimen – Électrons passe au travers de l’échantillon et frappe un écran fluorescent – Excellente résolution (0.2nm) 4.1.1.3 B. A balayage – Électrons diffractés – Résolution moins bonne (10nm) – Images en relief microscopie à fluorescence utilisation particulière du microscope photonique lumière monochromatique (utilise une fréquence donnée) permet l'étude spécifique d'une protéine (donc détails structurels) préparation difficile 4.1.1.4 A. B. préparation des échantillons fixation des structures but: empêcher la dégradation des structures moyen: formol, acétone, Azote liquide inclusion but: permettre des coupes fines. (grâce au microtome) étape 1: déshydratation: alcool ou toluol étape 2: rigidification: paraffine C. coloration but: permettre l'observation (la cellule étant peu ou prou transparente) but: marquage différentiel grâce aux affinités hématoxyline – éosine, bleu de toludine, substances fluorescentes, sels de métaux lourds. D. 4.1.2 coupe fine ou ultrafine but: permettre l'observation (il faut que la lumière traverse) microtome (appareil à rasoirs) AUTRES TECHNIQUES utilisation d'autres techniques pour détailler (et découvrir parfois), des éléments particulier. (((pensez à les décrire ici pour éviter de surcharger le cours))) 4.2 THEORIE CELLULAIRE (P 6) en 1839: M. Schleider et T. Schwann : la cellule est la plus petite entité vivante tout être vivant est composé de cellules toutes cellules provient d'une autre cellule 4.3 TYPES DE CELLULES (P 7-8) 4.3.1 LES CELLULES 4.3.2 PROCARYOTES monères (unicellulaire) pas de noyau pas d'organites présence de membranes plasmiques (en polysaccharide) LES CELLULES EUCARYOTES plantes, animaux présence d'un noyau distinct présence d'organites présence d'une membrane phospho- lipidique Les organismes pluricellulaires sont des organisations de cellules spécialisées (ce qui permet une séparation des tâches. 4.3.2.1 Tailles des différents éléments cellule noyau mitochondries ribosomes microtubules microfilaments membranes Protéines filamenteuses (collagène) Protéines globulaires (myoglobine) Double hélice d’ADN 4.3.2.2 5-50 µm 5 µm 1-4 µm 15-20 nm 24 nm 8 nm 5-10 nm 100 nm 3-4 nm 2 nm Exemple de cellules eucaryotes A. La cellule végétale trois particularités: paroi cellulaire (cellules rigides) vacuoles (régulation de la turgescence) chloroplastes (comprend la chlorophylle, permet la photosynthèse) B. a. b. c. La cellule animale cellules nerveuses présence d'un prolongement: l'axone conduit l'information par dépolarisation communication par "neurotransmetteur" à travers les synapses fonction: transmission de l'information cellules musculaires différenciation grâce à deux protéines: myosine et l'actine fonction: contraction cellules de la peau cellules aplaties formant des couches de grandes surface fonction: protection mécanique et recouvrement d. cellules sanguines différents types de cellules globules rouges (cellules anucléés: sans noyau) transport de l'oxygène leucocytes ou globules blancs défense face aux infections e. C. Cellules intestinales cellules épithéliale organisation polarisée fonction: absorption sélective des nutriments Les virus parasite des cellules eu_ et procaryotes ne peut survivre seul (aucune "machinerie" de production de protéine) ne peut se dupliquer seule (aucune "machinerie" de duplication de l'ADN) Ce n'est donc pas au stricto sensu vivant. MAIS son génome contient les informations à même de satisfaire aux préceptes du vivants 5 LA MEMBRANE 5.1 DEFINITION enveloppe d'environ 8nm d'épaisseur rôle important dans les échanges dans les mécanismes de reconnaissance transmission de certaines informations 5.2 COMPOSITION CHIMIQUE composé principalement de phospholipides et de protéine c'est une mosaïque fluide car les phospholipides et protéines peuvent se déplacer les phospholipides constituent la majorité de la membrane. Ils sont répartis en une double couche. tête hydrophile queue hydrophobe le cholestérol (uniquement dans les cellules animales) modifient la fluidité en s'insérant entre les lipides Propriétés de la membrane: laisse passer les molécules hydrophobes les molécules hydrophiles traversent grâces aux protéines transmembranaires 5.3 DYNAMIQUE MEMBRANAIRE d'autres types d'échanges existent sans "traversée membranaire directe". Ce sont les processus d'endocytose et d'exocytose (cfr 10 : trafic cellulaire) 6 METABOLISME: ENERGIE DE LA CELLULE 6.1 INTRODUCTION 6.1.1 TERMES DE BASE Métabolisme : ensemble des réactions chimique au sein d'un être vivant enzyme: accélérateur de la vitesse de réaction catabolisme: dégradation de molécules (réaction exothermique : énergie réactif > énergie produits) anabolisme: construction de molécules (réaction endothermique: énergie réactifs < énergie produits) 6.1.2 AUTOTROPHES Ce sont les bactéries photosynthétiques et les plantes supérieures. Ils utilisent comme source de C, le CO2 de l'air. besoin d'eau et d'énergie (dans notre biosphère, il s'agit de l'énergie lumineuse du soleil) 6 CO2 + 6 H2O + énergie lumineuse (hv) C6H12O6 + 6 O2 6.1.3 HETEROTROPHE Ce sont les micro-organisme et animaux supérieurs Ils utilisent comme source de carbone (et d'énergie) les molécules de types glucides. ils catabolisent donc les molécules organiques des autotrophes ou d'autres hétérotrophes et en récupère l'énergie… 6.2 ENERGIE CELLULAIRE 6.2.1 RESPIRATION CELLULAIRE 2 phases oxydation des glucides ou glycolise(réaction exothermique) L'énergie produite n'est pas directement utilisable par la cellule. Elle doit être convertie en Adénosine Tri Phosphate (ATP) production des molécules d'ATP (réaction endothermique) 6.2.1.1 A. Glycolyse glycolyse anaérobie absence d'oxygène milieu extra-mitochondriale (dans le cytosol) série de réactions biochimiques (isomérisation, phosphorylation, oxydation et rupture de la molécule) passage de glucose (C6H12O6) en acide pyruvique (CH3-CO-COOH) production de 2 ATP/molécule de glucose dégradation incomplète du glucose se passe avec des levures dans des milieux sucrés sans oxygène B. Glycolyse aérobie dégradation complète du glucose au sein du cycle de Krebs (se passe dans la mitochondrie) production de 38 molécules d'ATP première phase dans le cytoplasme= glycolyse anaérobie (2ATP) deuxième phase dans les mitochondries (36ATP) produits finaux: H2O et CO2 6.2.1.2 La molécule d'ATP nucléotide (une base, un sucre, un groupement phosphate) base= Adénine Sucre= Ribose phosphate= 3 phosphates le groupement phosphate est riche en énergie et instable. en général: transfert du groupement phosphate de l'ATP vers autre molécule: Cette phosphorylation des molécules par l'ATP est à la base de la plupart du travail cellulaire. Dans toute la cellule: hydrolyse de l'ATP ATP Adénosine Di-Phosphate (ADP) + Pi + énergie dans la mitochondrie: phosphorylation oxydative de l'ADP ADP + Pi + énergie ATP 6.3 LES MITOCHONDRIES spécifique des eucaryotes aérobies (aussi bien animal que végétal) But: transformation l'énergie libérée par le catabolisme des glucides en ATP par phosphorylation de l'ADP. Spécificité: capacité de se reproduire lui-même. Durée de demi-vie: 5-10jours 6.3.1 MORPHOLOGIE taille: 0,5 à 1 m de diamètre. longueur maximale: 10 6.3.1.1 lisse bicouche lipidique (60% protéines / 40% lipides) constituée de porines pour le transport 6.3.1.2 matrice occupe la chambre interne contient molécules d'ADN; enzymes pour le cycle de Krebs, ribosomes, ARN 6.3.2 membrane interne plissée (augmentation de la surface=> stockage max d'enzymes –les oxysomes-) 2 faces: une interne vers la matrice mitochondriale, une externe vers la chambre externe 80% protéines/20% lipides peu perméables aux ions nombre de crêtes proportionnel à l'activité de la cellule forme des crêtes variables selon fonctions et activité de la cellule 6.3.1.4 chambre externe entre la membrane externe et la membrane interne communique avec les lumières des crêtes 6.3.1.3 membrane externe TRANSFORMATION DE L'ADP EN ATP protéines, glucides, lipides alimentent le cycle de Krebs en pyruvate protéines et lipides dégradés et passent par la formation de acétylCoA (acétyl coenzyme A) au cours du cycle: formation de cofacteurs réduits (NADPH) qui transportent e- à haute énergie Au niveau de la membrane interne: enzymes se servent de cette énergie pour concentrer H+ dans espace inter-membranaire dissipation du gradient d'ion H+ à travers molécule (F1/F0 ATPase) transforme ADP en ATP 7 LE CYTOSQUELETTE 7.1 GENERALITES 7.1.1 DEFINITION Le cytosquelette est un réseau complexe de polymères protéiques filamenteux qui structure le cytoplasme des cellules eucaryotes permettant à celles-ci d'adopter une grande variété de changements morphologiques. 7.1.2 3 TYPES DE FILAMENTS 7.1.2.1 taille: 7 à 9 nm de diamètre architecture de la cellule en lui conférant une forme particulière dynamique de polymérisation préside à divers mouvements cellulaires 7.1.2.2 Microtubules taille: 25 nm de diamètre constitué de dimères de Tubuline α et β. dynamique des ≠ transports mouvement intracellulaire des organites et certaines vésicules (avec d'autres protéines) séparation des chromosomes lors de la mitose et de la méiose par dynamique de polymérisation. 7.1.2.3 Microfilaments d'actine Filaments intermédiaires monomère de base différent et spécifique selon le type de cellule absent des cellules eucaryotes végétales 7.2 LES MICROFILAMENTS D'ACTINE polymère d'actine 2 formes d'actine o forme G (globulaire / monomère) o forme F (filaments / polymère) Existe dans toutes les cellules eucaryotes (5% dans les non-musculaires/ jusqu'à 20% dans les musculaires) 7.2.1 LA FORME G poids moléculaire: 42Kda caractérisé par une petite fente qui permet à l'ATP de s'y positionner. Stabilisé sous la forme polymérisée quand occupée par l'ATP 7.2.2 LA FORME F polymérisation de l'actine forme d'un filament torsadé 7.2.2.1 présence d'une polarité sur les microfilaments d'actine état permanent d'"assemblement - désassemblement" extrémité "-" tend à perdre des molécules d'actine G (dépolymérisation) extrémité "+" tend à associer des molécules d'actine G (polymérisation) 7.2.2.2 TYPES D'ARRANGEMENTS DES FIBRES D'ACTINE faisceau parallèle serré: // entre eux faisceau semblable à un gel: aléatoirement faisceau contractile: // 7.2.3.1 Fonctions soutien de la cellule architecture formation des microvillosités résistance mécanique (fibres de tension ou "stress fibers") motilité cellulaire (de la cellule ou des organites) (avec la myosine) 7.2.3 Polymérisation de l'actine protéines associés à l'actine: exemple β-thymosine : régulation de la concentration d'actine au moment de la polymérisation fibrine: assemblage des microfilament (cfr microvillosité) myosine: moteur moléculaire filamine: organisation de l'actine en réseau lâche de grande maille A. cas particulier: la myosine protéine filamenteuse de structure hétérogène par rapport à l'actine associé à l'actine : permet la contraction musculaire jusqu'à 35% dans les cellules musculaire 7.2.4 POISONS DE L'ACTINE 2 toxines: cytochalasine: se lie à l'extrémité "+" empêchant la polymérisation. La protéine continue cependant à se dépolymériser jusqu'à disparaître phalloïdine: se lie le long du filament et le stabilise (blocage de la dynamique). Techniquement: associée à un marqueur fluorescent permet de rendre l'actine visible 7.3 LES FILAMENTS INTERMEDIAIRES tailles intermédiaires entre l'actine et les microtubules. forment la "Lamina propria" dans le nucléoplasme pour faire le soutien de la membrane nucléaire insoluble et stable fonction de cohésion des autres systèmes de microfilaments et microtubules assurent le maintient de la forme cellulaire interaction entre cellules 7.4 LES MICROTUBULES diamètre: 25nm long polymères rigides hétérodimère de tubuline α et β microtubule: forme de tube creux 7.4.1 CENTRIOLES, CENTROSOMES ET COMT Centriole = 9 triplets de microtubules Centrosome= 2 centrioles à 90° + protéines qui structurent COMT: (ou Centre Organisateur des MicroTubules) = protéines autres + tubuline γ. Les tubulines α et β s'y accroche par l'extrémité "-" et se forme par l'extrémité "+" 7.4.2 transport au sein de la cellule mouvement par polymérisation/ dépolymérisation déplacement des vésicules et particule (en association avec Kinésine et dynéine). structure des cils et flagelle 7.4.3 FONCTIONS CILS ET FLAGELLES structure identique. cils (court) ≠ flagelle (long) association en cylindre de 9 doublets de micro-tubules. 8 NOYAU / MITOSE / MEIOSE 8.1 NOYAU CELLULAIRE entouré par une membrane présence de pores membranaire (passage bidirectionnel de messagers et facteurs protéiques. dépositaire de l'information codée sous forme de gènes. Nucléole: lieu de synthèse de l'ARNm et de l'ARNr (cfr chapitre sur les ribosomes) 8.2 INTERPHASE périodes comprises entre fin d'une division et début de la suivante ADN sous forme de chromatine 3 phases: G1, S (synthèse de l'ADN), G2 (synthèses des protéines nécessaires pour la mitose) 8.2.1 PHASE G1 période de la fin de la mitose à la synthèse de l'ADN absente durant les premières divisions qui suivent la fécondation. durant dvlpt embryonnaire: spécialisation des cellules la cellule "décide" si poursuite ou non du cycle. (si non: passage en G0, c'est le cas des neurones) 2n chromosomes, constant durant toute la phase G1 expression différentielle de certains gênes -> production de certaines protéines -> phénotype cellulaire. 8.2.2 PHASE S duplication du matériel génomique réplication de l'entièreté de l'ADN par l'ADN-polymérase enroulage autour des histones synthèse ARNm des histones uniquement histone protéine basique => attirance électrostatique avec ADN 8.2.3 PHASE G2 Uniquement synthèse des protéines nécessaires à la mitose 8.2.4 LES "CHECK-POINT" DU CYCLE CELLULAIRE dû à une protéine: la cycline o synthétisé à taux variable au cours du cycle (d'où son nom) o libérés en cascade, elle conduit la cellule vers une division Check-point = point de non-retour o 1 en fin de mitose: décide d'aller vers G0 ou G1 o 1 en G1: précède la mise en route de la réplication o 1 en G2: pré-mitose 8.3 MITOSE passe d'1 cellule à 2N chromosomes 2 cellules à 2n chromosomes 8.3.1 PROPHASE ADN couplé aux histones 3 enroulements o 1er: hétérochomatine autour de nucléosome; o 2ème chromonéma; o 3ème chromatide (1 chromosome= 2 chromatides) Désagrégation de la membrane nucléaire Duplication centriole, formation du fuseau achromatique 8.3.2 METAPHASE chromosomes sur la plaque équatoriale centromères fixés aux fibres (1 chromosome/fibre) 8.3.3 ANAPHASE clivage du centromère migration des chromosome par dépolymérisation du microtubule 8.3.4 TELOPHASE reformation de la membrane nucléaire autour des chromatise décondensation des chromosomes étranglement de la cellules partage du cytoplasme et des organites 8.4 MEIOSE 1 cellule 2n chromosomes (diploïde) 4 cellules 1n chromosomes (haploïde) 8.4.1 TERMES DE BASE chromonéma: résultat du 2ème enroulement de l'ADN chromatide: résultat du 3ème enroulement de l'ADN chomosome: 2 chromatides reliées par un centromère bivalent: 2 chromosomes homologues tétrade: bivalent chromatide-sœur: 2 chromatides d'un même chromosome 8.4.2 PREMIERE DIVISION (DIVISION REDUCTIONNELLE: SEPARE LES PAIRES DE CHROMOSOMES HOMOLOGUES) 8.4.2.1 Prophase 1 Stade leptotène: ADN se condense grâce aux histones => chromonéma Stade zygotène: spiralisation jusqu'en chromosome et se placent par pair Stade pachytène: chaque pair forme 1 bivalent Stade diplotène: les chromatides des tétrades se croisent et se soude: lieu des "chiasmas" stade diacinèse: tétrades se défont: échange, aux chiasma de segment de chromatide (crossing-over) 8.4.2.2 Métaphase 1 placement sur la plaque équatoriale placement sur les microtubules du fuseau achromatique 8.4.2.3 Anaphase 1 Les chromosomes migrent vers les pôles. division réductionnelle 8.4.2.4 Télophase 1 division de la cellule en 2 cellules fille peu de décondensation pas de reformation du noyau 8.4.3 DEUXIEME DIVISION: DIVISION EQUATIONNELLE (SEPARE LES CHROMATIDES- SOEURS) 8.4.3.1 Prophase 2 très courte formation du fuseau achromatique 8.4.3.2 Métaphase 2 fixation des chromosomes par le centromère sur les fibres du fuseau 8.4.3.3 Anaphase 2 clivage des centromère séparation des chromatides 8.4.3.4 Télophase 2 étranglement des cellules filles formation des 4 cellules à n chromosomes 8.5 CONCLUSION 8.5.1 = division d'une cellule mère en 2 cellules filles avec même patrimoine génétique se produit chez toutes les cellules eucaryotes croissance des pluricellulaires reproduction des unicellulaire 8.5.2 MEÏOSE division d'une cellule diploïde en 4 haploïdes uniquement dans un cycle de reproduction sexuée 8.5.3 MITOSE POSSIBILITE D'EVOLUTION? chez les unicellulaires: mutation spontanée et pression sélective chez les pluricellulaires: capacité de réarrangement avec les crossing-over => plus grande capacité d'adaptation (car + de combinaisons) 9 LE RETICULUM ENDOPLASMIQUE- GOLGILYSOSOMES 9.1 LE RETICULUM ENDOPLASMIQUE système de cavité dans le cytoplasme série de parois, de tubule et de canaux. une portion avec ribosome : le Réticulum Granuleux (REG) une autre sans : le Réticulum Lisse (REL) 9.1.1 RETICULUM ENDOPLASMIQUE GRANULEUX appelé aussi : "rugueux" ou REG comportent des ribosomes en surface d'où: synthèse des protéines (uniquement les sécrétoires) participe aux réactions de détoxification transfert des sucres sur les protéines (avec enzyme) "réservoir" d'ions Ca2+, qui est un second messager cellulaire 9.1.1.1 Synthèse des protéines un peptide est reconnu par une Particule de Reconnaissance du Signal (SRP) ce complexe est fixé sur les récepteur reconnaissant le SRP libère alors le peptide signal. Début de la traduction (voir les ribosomes) lors de la synthèse de polypeptide par ribosome attaché au réticulum: la protéine entre dans le réticulum perd sa configuration native subit des modifications "post-traductionnelle" (genre glycosylation) une fois la protéine parachevée: le réticulum bourgeonne forme une vésicule à destination de l'appareil de Golgi. 9.1.1.2 mécanisme enzymatique but: ajout de motifs saccharidiques à des protéines (d'où: changement de solubilité, stabilité et charge des protéines) 9.1.1.3 Détoxification transformation et catabolisme de certains substrats hydrophobes en composé hydrophile (permet leur excrétion) 9.1.1.4 Glycosylation Accumulation d'ions Ca2+ présence d'une pompe calcique stocke le Ca2+ sous une forme liée à une protéine 9.1.2 LE RETICULUM ENDOPLASMIQUE LISSE (REL) 9.1.2.1 synthèse des lipides et hormones stéroïdes Accumulation d'ions Ca2+ Détoxyfication 9.1.2.2 Synthèse des lipides partagé avec Golgi Formation de lipide pour la membrane cellulaire intégré à des vésicules qui fusionnent avec la membrane. 9.1.2.3 Fonctions Détoxification Elimination des toxines du corps REL très développé dans les cellules du foie, des intestins, des reins, des poumons et de la peau 9.2 APPAREIL DE GOLGI (AG) Ensemble de cavités circonscrites unitaires (saccules) JAMAIS de ribosome 9.2.1 FONCTION Glycosylation des protéines tri des protéines 9.2.2 LES DYCTIOSOMES empilement de saccules aplaties + grandes vacuoles en périphérie 9.2.2.1 CGN (Cis Golgi Network) face au REG vésicules du REG fusionne avec la protéine se mature en traversant les saccules processus de maturation post-traductionnelle 9.2.2.2 Région "Cis" Région "médiane" entre région "cis" et "trans" Nombre de saccules variable (en fonction de l'activité cellulaire) maturation post-traductionnelle transport entre "Cis" et "Trans" 9.2.2.3 réseau tubulo-vésiculaire (TGN: Trans Golgi Network) "Tri" par destination précise Adressage sélectif (réponse à un stimulus) ou Adressage non-sélectif (façon continue) protéines G interviennent dans la fusion des vésicules et leur transport protéine G agit comme un switch ON-OFF 9.2.3 Région "Trans" GLYCOSYLATION achèvement de la glycosylation débutées dans le REG 9.3 LES LYSOSOMES organites dont les protéines sont des enzymes protéolytiques fonction de digestion intracellulaire pH acide (4,5 – 5,5) pompe à proton dans la membrane (pour maintenir le pH acide) élimination des déchets cellulaires hydrolyse de grosses molécules (passage de protéines en AAs, par ex.) 9.3.1 Hydrolase venant du REG glycolysés (= lysosomes primaires) bourgeonnement du TGN vésicules recouvertes de clathrine 9.3.2 FORMATION DES LYSOSOMES MEMBRANE LYSOSOMALE pompes à proton (H+) traversée libre des petites molécules + liposolubles perméabilité sélective protection contre les enzymes du lysosomes: protéases présence de pores grâce aux porines (permet la sortie des aa's vers le cytosol) 10 TRAFIC CELLULAIRE 10.1 TRANSPORT PASSIF membrane semi perméable loi de diffusion +concentré molécules - concentré osmose +concentré - concentré eau 10.2 TRANSPORT ACTIF permet un déséquilibre de concentration se fait grâce à des protéines transmembranaire qui jouent un rôle de ségrégation (pompe H+, pompe NA+/K+,…) dépense d'énergie (donc consommation ATP), donc appelé transport ACTIF 10.3 ENDOCYTOSE phénomène qui est impliqué quand une cellule absorbe une molécule voire une particule de taille conséquente 10.3.1 entrée non spécifique petites gouttelettes avec composé dissous invagination de la membrane ( rôle de l'actine) création de vacuoles de pinocytose 10.3.2 PINOCYTOSE (ACTION DE "BOIRE") PHAGOCYTOSE (ACTION DE "MANGER") incorporation de grosses particules ou de débris cellulaire déformation de la membrane formation à partir de la membrane de pseudopodes ( rôle de l'actine) création de vacuole de phagocytose ou de phagosomes 10.3.3 ENDOCYTOSE PAR RECEPTEURS INTERPOSES spécifique endocytose des complexe "ligand- récepteur" localisation des récepteurs dans les puits recouverts de clathrine. une fois la vésicule formée: perte de la clathrine. vésicule fusionne avec des compartiment membranaire: les endosomes. communication cellule/environnement par l'intermédiaire de récepteurs membranaires permet de contrôler divers fonctions (apport de nutriment, réponses aux hormones, capture d'antigène,…) 10.3.3.1 Exemples Absorption du cholestérol par des récepteurs LDL: o Vésicule tapissée de clathrine o Fusion avec des endosomes o Découplage récepteur/ligand par acidification o libération du cholestérol dans la cellule o recyclage des récepteurs transferrine (protéine chargée de fer) o intermédiaire d'un récepteur spécifique présent dans le plasma o transferrine livre le fer dans le compartiment lysosomial o récepteur à la transferrine recyclé à la surface de la membrane plasmique 10.4 EXOCYTOSE excrétion de produits o vésicules se déplace dans le cytoplasme vers la périphérie o fusion avec la membrane o déversement dans le compartiment extracellulaire deux type d'exocytose: exocytose constitutive: sécrétion en continue exocytose régulée: déclenchée par des stimuli extérieurs. Régulée au niveau de la fusion des vésicule avec la membrane. Fournit des protéines libérés de manière exo ou endocrine.