Stage proposé par Dominique BELLET Professeur des universités, Université Paris Descartes, CNRS Laboratoire de physiopathologie hépatique UMR 8149 CNRS Faculté des Sciences pharmaceutiques et Biologiques de Paris, 4 avenue de l’Observatoire, 75006 Paris Téléphone : 01 43 29 76 08 Fax : 01 43 29 79 12 Mail : [email protected] Directeur du Laboratoire : Pierre BEDOSSA Titre : Rôle du gène INSL4 dans la prolifération, l'invasion et la migration des cellules trophoblastiques Projet de stage : Le gène INSL4, découvert notre laboratoire, appartient à la famille des gènes apparentés à celui de l'insuline. Ce gène code pour des peptides dénommés pro-EPIL et EPIL. L'expression de ce gène serait liée aux capacités invasives des cellules trophoblastiques et des cellules tumorales. Nous avons récemment mis au point une technique qui permet de détecter facilement ces peptides et d’identifier les cellules qui les produisent. Nous voulons étudier l’implication du gène INSL4 et des peptides EPIL sur la croissance, la prolifération et l'invasion des cellules trophoblastiques . Après avoir identifié les cellules trophoblastiques qui expriment les peptides EPIL, nous utiliserons des si RNA pour bloquer l'expression du gène INSL4 et pour déterminer l’impact de ce blocage sur les capacités prolifératives, invasives et migratoires des cellules trophoblastiques. Techniques mises en œuvre par le stagiaire : ELISA, siRNA, transfection, PCR quantitatve, biologie cellulaire (tests de prolifération, tests de migration) Publications du responsable de stage au cours des 5 dernières années : 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Pecking AP, Wartski M, Cluzan RV, Bellet D, Alberini JL 2007 SPECT-CT fusion imaging radionuclide lymphoscintigraphy: potential for limb lymphedema assessment and sentinel node detection in breast cancer. Cancer Treat Res 135:79-84 Dangles-Marie V, Pocard M, Richon S, Weiswald LB, Assayag F, Saulnier P, Judde JG, Janneau JL, Auger N, Validire P, Dutrillaux B, Praz F, Bellet D, Poupon MF 2007 Establishment of human colon cancer cell lines from fresh tumors versus xenografts: comparison of success rate and cell line features. Cancer Res 67:398-407 Ferretti C, Bruni L, Dangles-Marie V, Pecking AP, Bellet D 2006 Molecular circuits shared by placental and cancer cells, and their implications in the proliferative, invasive and migratory capacities of trophoblasts. Hum Reprod Update Brandt B, Kemming D, Packeisen J, Simon R, Helms M, Feldmann U, Matuschek A, Kersting C, Hinrichs B, Bidart JM, Bellet D, Bartkowiak K, Dankbar N, Dittmar T, Sauter G, Boecker W, Buerger H 2005 Expression of early placenta insulin-like growth factor in breast cancer cells provides an autocrine loop that predominantly enhances invasiveness and motility. Endocr Relat Cancer 12:823-837 Bellet D, Dangles-Marie V 2005 [Humanized antibodies as therapeutics]. Med Sci (Paris) 21:1054-1062 Aguirre D, Boya P, Bellet D, Faivre S, Troalen F, Benard J, Saulnier P, HopkinsDonaldson S, Zangemeister-Wittke U, Kroemer G, Raymond E 2004 Bcl-2 and CCND1/CDK4 expression levels predict the cellular effects of mTOR inhibitors in human ovarian carcinoma. Apoptosis 9:797-805 Saulnier P, Vidaud M, Gautier E, Motte N, Bellet D, Escudier B, Wilson D, Yver A 2003 Development and validation of a real-time PCR assay for the detection and quantitation of p53 recombinant adenovirus in clinical samples from patients treated with Ad5CMV-p53 (INGN 201). J Virol Methods 114:55-64 Dangles-Marie V, Richon S, El-Behi M, Echchakir H, Dorothee G, Thiery J, Validire P, Vergnon I, Menez J, Ladjimi M, Chouaib S, Bellet D, Mami-Chouaib F 2003 A threedimensional tumor cell defect in activating autologous CTLs is associated with inefficient antigen presentation correlated with heat shock protein-70 down-regulation. Cancer Res 63:3682-3687