Maladie d’Aujeszky
Rapports annuels des Laboratoires de référence et des Centres collaborateurs de l’OIE, 2010 3
Partie II : Activités spécifiques découlant du mandat des
Laboratoires de référence
(
Unité virologie-immunologie porcine : M.F. Le Potier, F. Pol
Unité génétique virale et biosécurité : A. Jestin, D. Dory)
3. Normalisation et harmonisation internationales des méthodes de diagnostic, ou de la production
et de l’évaluation de vaccins
Le laboratoire a participé avec succès à un essai inter-laboratoires d’aptitude (EILA) organisé par le laboratoire
national de référence belge (CODA-CERVA). Cet EILA concerne les techniques sérologiques ELISA gE et gB.
Il a organisé fin 2010 un EILA pour la PCR temps réel. 26 laboratoires ont participé, dont 4 laboratoires européens
(Autriche, Belgique, Pays-Bas, Royaume-Uni). Cet EILA est en cours d’exploitation.
4. Préparation et fourniture des réactifs de référence internationaux pour les tests de diagnostic et
les vaccins
36 ml de sérums internationaux (ADV gIG, ADV gIQ et ADV I définis dans la décision CE/2008/185) ont été
fournis gracieusement (Belgique, Espagne, Irlande, Pologne).
5. Recherche et développement de nouvelles méthodes de diagnostic et de contrôle des maladies
- Deux kits commerciaux de détection du génome du virus de la MA ont été validés en suivant les
recommandations de l’OIE. Les deux kits ont été développés par LSI (TaqVetTM, Laboratoire Service
International, Lissieux, France) et par Adiagène (ADIAVET® PRV REALTIME, Saint-Brieuc, France).
- Etude de l’intégration de l’ADN plasmidique dans l’ADN génomique porcin après l’injection d’un vaccin à ADN
contre le virus de la maladie d’Aujeszky ;
Notre unité travaille depuis plusieurs années sur la vaccination à ADN contre le virus de la maladie d’Aujeszky
chez le porc. Après avoir étudié l’efficacité vaccinale, nous nous sommes intéressés à la bioscécurité de ce type de
vaccin, et l’étude de l’intégration de l’ADN plasmidique dans le génome de l’hôte représente un enjeu majeur. La
technique de recherche des évènements d’intégration de l’ADN plasmidique dans l’ADN génomique porcin a été
mise au point in vitro. Puis une étude in vivo a été réalisée. Pour cela des plasmides vides ou codant la
glycoprotéine B du virus de la maladie d’Aujeszky ont été injectés en intramusculaire à des porcs de 8 semaines
d’âge. Six semaines après l’injection, les points d’injection ont été prélevés et analysés. Plusieurs évènements
d’intégration ont été caractérisés. Il n’y a aucun point commun entre les séquences des sites d’intégration, ce qui
laisse supposer que l’intégration se fait suivant un processus non spécifique d’une séquence donnée. Il s’agit
d’événements rares ayant une fréquence inférieure au taux naturel de mutation de l’ADN.
- Poursuite de la caractérisation du trafic intracellulaire de la glycoprotéine B du virus de la maladie d’Aujeszky ;
Nous avions montré par le passé que la glycoprotéine B du virus de la maladie d’Aujeszky était capable de
transporter des antigènes étrangers et d’induire la production d’une réponse immunitaire contre cet antigène chez
le porc (Dory D et al, Antiviral Research 2009). Nous avions alors émis l’hypothèse que le trafic intra et extra-
cellulaire de cette glycoprotéine pouvait être responsable de cette propriété. Nous avons alors entrepris l’étude du
trafic de la gB, en nous intéressant dans un premier temps à l’influence de certains sites fonctionnels de cette
glycoprotéine sur ce trafic. L’année 2010 a été consacrée à la mise au point des outils permettant cette étude.
6. Recueil, analyse et diffusion des données épizootiologiques significatives pour le contrôle
zoosanitaire au niveau international
En Septembre 2010, un foyer de MA a été déclaré dans le département des Pyrénées Atlantiques. Le foyer
primaire, ayant pour origine la faune sauvage (premier cas dans un élevage plein air) était en lien avec 15 foyers