Le gonocoque est plus rarement isolé au niveau de la gorge, de lésions cutanées, du
liquide articulaire, du sang.
Examen microscopique
Faire un étalement mince du pus sur une lame de microscope.
Effectuer une coloration de Gram (voir Développement et Santé, n° 127, 1997, p. 8)
Examiner la lame pour rechercher la présence :
- de pus qui se présente sous forme d'un amas de leucocytes altérés, à noyau
rose vif et cytoplasme altéré,
- de gonocoques qui sont des cocci à gram négatif (rose clair), en forme de
grains de café, disposés par paires pouvant être
o intracellulaires : à l'intérieur du cytoplasme des leucocytes. (1)
o extracellulaires : amas entre les leucocytes, provenant de l'éclatement
de ces derniers. (2) (voir schéma).
Cet examen permet de faire le diagnostic des urétrites aiguës de l'homme. Un
étalement de pus montrant après coloration des diplocoques à gram négatif en
majorité intraleucocytaires est très caractéristique et constitue un très fort élément de
présomption. La confirmation par culture est cependant recommandée.
Dans toutes les autres formes de gonococcie, en particulier 1'urétrite chronique de
l'homme et l'infection génitale de la femme, les germes sont rares et l'examen
microscopique est peu révélateur. La culture du gonocoque est alors le seul moyen
de diagnostic bactériologique.
Culture
La culture du gonocoque est délicate et nécessite l'ensemencement immédiat du
prélèvement sur un milieu enrichi avec du sang cuit ou des vitamines et rendu
sélectif par addition d'antibiotiques.
La culture est incubée à 37°C en atmosphère enrichie avec 5 à 10% de gaz
carbonique. Les colonies apparaissent en 24 à 48 heures, petites, grisâtres, à bords
irréguliers. À partir de ces colonies, le diagnostic de Neisseria gonorrhoeae est
fortement orienté par la mise en évidence de cocci à gram négatif en grains de café,
possédant une oxydase. Il faut cependant savoir que parmi les différentes espèces
de Neisseria, trois peuvent se développer sur les milieux sélectifs Neisseria
gonorrhoeae, Neisseria meningitidis (agent de la méningite cérébrospinale),
Neisseria lactamica (non pathogène). Le diagnostic définitif ne peut se faire que par
l'étude biochimique de la souche isolée.
Si la culture ne peut être réalisée sur place, le prélèvement doit être ensemencé
dans un milieu de transport (milieu de Stuart par exemple) permettant son
acheminement jusqu'à un laboratoire.