120 L. SORIANO
MATERIEL ET METHODES
La dissociation des ebauches embryonnaires a ete faite a
l'aide
de la trypsine
(Trypsine Difco) a
2 %
dans
le
Tyrode sans Ca ni Mg (Moscona, 1952) en ajoutant
encore 0,4 g de hyaluronidase (Zwilling, 1955). Les ebauches sont immergees
pendant 10 a 15 min. dans cette solution a 37° C. La dissociation est ensuite
poursuivie mecaniquement avec des pinces fines. Pour inactiver la trypsine, les
explants sont ensuite deposes dans un melange 1/1 de Tyrode et de serum de
Cheval.
Les ebauches sont cultivees pendant 5 a
12
jours selon la methode de culture
d'organes mise au point par Wolff et Haffen (1952). Le milieu est compose de:
Gelose a 1,5
%
dans le liquide de Gey 7 parties
Extrait embryonnaire 3 parties
Serum de Cheval 2 parties
Les explants sont enveloppes dans la membrane vitelline de l'ceuf de Poule non
incube, selon une technique mise au point par Wolff (1960).
RESULTATS DE LA PREMIERE PARTIE
Developpement in vitro de
Ve'bauche cesophagique
Apres
5
jours de culture les ebauches cesophagiques d'embryon de Souris de
12 jours de gestation, presentent un epithelium epaissi, c'est-a-dire forme de 3
ou 4 couches de cellules (Planche 1, Fig. A). Cet epaississement correspond au
debut de la keratinisation.
Experiences de dissociation et reassociation
La dissociation de l'cesophage preleve a 19 jours de gestation, et la reassociation
des fragments qui ensuite sont cultives pendant 5
jours,
determine la keratinisation
de l'epithelium oesophagique (Planches 1, Fig. B et C).
L'association du mesenchyme de trachee de 19 jours de gestation avec l'epi-
thelium d'cesophage du meme age, determine apres 7 a 12 jours de culture la
keratinisation de l'epithelium oesophagique (Planches
1
et 2, Fig. D, E, F et G).
L'association complexe du mesenchyme de trachee, mesenchyme d'oesophage
et epithelium oesophagique de 19 jours de gestation, determine aussi apres
7
jours
de culture, la keratinisation de l'epithelium oesophagique (Planche 2, Fig. H).
Le meme resultat est obtenu lorsque l'epithelium d'cesophage est cultive entre
deux fragments de trachee comme le montre la Figure I (Planche 2).
DISCUSSION DE LA PREMIERE PARTIE
L'acceleration de la differentiation de l'epithelium oesophagique observee
quand il est cultive avec la methode de Wolff et Haffen
(1952),
permet de supposer
qu'une telle acceleration ne depend pas de la methode de culture utilisee; en