1
Intérêt de la réfractométrie pour l’évaluation de la qualité immunologique du
colostrum chez la chienne
_________________
THÈSE
pour obtenir le grade de
DOCTEUR VÉTÉRINAIRE
DIPLÔME D’ÉTAT
présentée et soutenue publiquement en 2016
devant l’Université Paul-Sabatier de Toulouse
par
Emma Lavergne
Née, le 24 janvier 1989 à Toulouse (31)
___________
Directeur de thèse : Mme le Professeur Sylvie CHASTANT- MAILLARD
___________
JURY
PRESIDENT :
Mme Bettina COUDERC Professeur à l’Université Paul-Sabatier de TOULOUSE
ASSESSEURS :
Mme Sylvie CHASTANT-MAILLARD Professeur à l’Ecole Nationale Vétérinaire de TOULOUSE
Mme Catherine TRUMEL Professeur à l’Ecole Nationale Vétérinaire de TOULOUSE
MEMBRE INVITE
Mme Hanna MILA Docteur Vétérinaire à l’Ecole Nationale Vétérinaire de TOULOUSE
2
REMERCIEMENTS
Au président de thèse,
A Madame le Professeur Bettina COUDERC
Professeur des Universités,
Qui m’a fait l’honneur d’accepter la présidence de mon jury de thèse,
Hommages respectueux.
Au jury de thèse,
A Madame le Professeur Sylvie CHASTANT-MAILLARD
Professeur à l’Ecole Nationale Vétérinaire de Toulouse
Pathologie de la reproduction,
Qui a accepté de me confier ce travail, et m’a apporté son aide pour sa réalisation
Pour ses conseils, son soutien, sa patience, sa disponibilité et sa gentillesse
Sincères remerciements.
A Madame le Professeur Catherine TRUMEL
Professeur à l’Ecole Nationale Vétérinaire de Toulouse
Biologie médicale,
Qui a très aimablement accepté de faire partie de mon jury de thèse,
Sincères remerciements.
A Madame le Docteur Hanna MILA
Ecole Nationale Vétérinaire de Toulouse
Pathologie de la reproduction,
Pour son aide précieuse, sa patience, sa disponibilité, et sa gentillesse,
Sincères remerciements.
3
« La vocation, c’est avoir pour métier sa passion »
Stendhal
4
SOMMAIRE
LISTE DES FIGURES ………………………………………………………………………….........6
LISTE DES TABLEAUX …………………………………………………………………………......8
INTRODUCTION ……………………………………………………………………………………..9
PARTIE 1 : ETUDE BIBLIOGRAPHIQUE ……………………………………………………………....12
1. LE COLOSTRUM : SOURCE D’IMMUNITE ..................................................................13
a. Formation et composition du colostrum .....................................................................13
i. Les immunoglobulines ............................................................................................13
ii. Composition du colostrum ......................................................................................15
iii. Le rôle du colostrum ...............................................................................................16
b. Le transfert passif ......................................................................................................17
2. Méthodes d’évaluation de la qualité immunologique du colostrum ................................19
a. Méthodes directes .....................................................................................................19
i. Immunodiffusion radiale de Mancini .......................................................................19
ii. Electrophorèse des protéines .................................................................................21
iii. Test ELISA (Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay) .............................................22
b. Méthodes indirectes ...................................................................................................24
i. Activité de la gamma glutamyl transférase (GGT) dans le colostrum ......................24
ii. Poids du colostrum .................................................................................................24
iii. Pèse-colostrum ......................................................................................................25
iiii. Réfractométrie ....................................................................................................33
Principe de la réfractométrie ...................................................................................33
PARTIE 2 : ETUDE EXPERIMENTALE
……….………………………………………………………....39
1. Matériel et méthode .......................................................................................................41
a. Animaux ....................................................................................................................41
b. Prélèvements .............................................................................................................41
c. Dosage des immunoglobulines ..................................................................................42
5
d. Réfractométrie ...........................................................................................................44
e. Outils statistiques .......................................................................................................44
2. Résultats .......................................................................................................................45
a. Description de la population .......................................................................................45
b. Concentrations en immunoglobulines ........................................................................46
i. Dans le colostrum ..................................................................................................46
ii. Dans le sérum ........................................................................................................47
c. Réfractométrie ...........................................................................................................47
d. Facteurs de variations................................................................................................48
i. Sur la concentration colostrale en IgG ....................................................................48
ii. Sur les indices de réfractions .................................................................................53
e. Corrélation entre la réfractométrie et la concentration en IgG ....................................57
3. Discussion .....................................................................................................................59
a. Matériel et méthode ...................................................................................................59
i. Technique utilisée ..................................................................................................59
ii. Spécimens .............................................................................................................59
iii. La population .........................................................................................................60
b. Les résultats ..............................................................................................................61
i. Comparaison avec les données de la littérature chez la chienne et les autres
espèces domestiques. ...................................................................................................61
ii. Conséquences pratiques et perspectives ...............................................................70
CONCLUSION ……………………………………………………………………………………………71
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