TP N° 01. Observation microscopique d’une algue verte 1. But du TP Observation microscopique d’une algue verte (Cladophora sp.) Règne : Plantae Embranchement : Chlorophyta Classe : Ulvophyceae Famille : Cladophoraceae Genre : Cladophora Espèce Cladophora sp. 2. Matériels et réactifs Microscopes ; Loupes binoculaires ; Pinces ; Pipettes pasteur ; Colorants (bleu de méthylène et eau iodée) ; Lames et lamelles ; Papier Wattman ou filtre ; Verres de montre ; Scalpel. 3. Protocole 1. Choisir l’objectif avec lequel on désire travailler (x10 et x40 -grossissement-) ; 2. Régler l’oculaire en fonction de sa vue, de manière à voir une image nette. Faire ce réglage en fixant avec l’oculaire un élément au loin ou près de soi 3. Placer la préparation (sans coloration, coloration avec le bleu de méthylène , coloration par l’eau iodée) sur le plateau porte-objet ; 4. Abaisser l’objectif le plus près possible de la préparation sans la toucher afin d’éviter de casser la lame couvre objet et la préparation. Ce déplacement se fait grâce à la molette de mise au point ; 5. Tout en regardant à travers l’oculaire remonter l’objectif jusqu’à une position pour laquelle on voit nettement l’image de la préparation. Ce réglage se fait via la molette de mise au point ; 6. L’observation des différents détails peut avoir lieu. 7. Dans la schématisation des observations microscopiques, l’étudiant doit : - Respecter la taille des cellules, des organites, etc. ; - Préciser l’objectif (x10, x40, etc.) ; - Mettre la légende correctement ; - Mettre le titre exact ; - Préciser la nature de l’observation (sans coloration, coloré, etc.) ; - Le schéma et légendes doivent être faits au crayon, des feuilles blanches (format A4). On prélève un échantillon d'algue, le plus fin possible, pour avoir peu de couches de cellules. On utilise un colorant pour mieux observer certaines structures : Les colorants pour préparation microscopique Colorants Le bleu de méthylène Lugol (eau iodée) Organites - noyaux - grains d’amidon (plaste)