Modulation de l`expression de gènes reliés à la virulence et au

Modulation de l’expression de gènes reliés à la
virulence et au stress chez Porphyromonas gingivalis
par les polyphénols du thé vert
Mémoire
Jade Fournier Larente
Maîtrise en microbiologie
Maître ès science (M.Sc.)
Québec, Canada
 Jade Fournier Larente, 2014

II

III
RÉSUMÉ
Dans ce projet, la capacité des polyphénols du thé vert à moduler l’expression de
certains gènes chez Porphyromonas gingivalis, le principal agent étiologique de la
parodontite chronique, a été évaluée. Une analyse par PCR quantitative a démontré qu’à
des concentrations sous-inhibitrices, l’extrait de thé vert ainsi que l’épigallocatéchine-3-
gallate (EGCG) réduisent à différents degrés le niveau d’expression de gènes codant pour
d’importants facteurs de virulence chez P. gingivalis. Ces facteurs participent notamment à
la colonisation, l’acquisition des nutriments et la destruction tissulaire. De plus, les deux
composés ont augmenté le niveau d’expression du gène codant pour la protéine de
résistance au stress HtrA chez P. gingivalis. Les résultats de cette étude suggèrent que le
thé vert et l’EGCG pourraient contribuer à réduire la virulence de P. gingivalis, supportant
ainsi une potentielle utilisation pour la prévention et le traitement de la parodontite.

IV

V
TABLE DES MATIÈRES
RÉSUMÉ .............................................................................................................................. III
TABLE DES MATIÈRES ..................................................................................................... V
LISTE DES FIGURES ....................................................................................................... VII
LISTE DES TABLEAUX ................................................................................................... IX
LISTE DES ABRÉVIATIONS ........................................................................................... XI
REMERCIEMENTS ........................................................................................................... XV
1 INTRODUCTION ............................................................................................................ 1
1.1 Structure du parodonte ............................................................................................... 1
1.2 Maladies parodontales ............................................................................................... 2
1.2.1 Généralités .......................................................................................................... 2
1.2.1.1 Gingivite ...................................................................................................... 2
1.2.1.2 Parodontite ................................................................................................... 2
1.3 Étiologie des maladies parodontales .......................................................................... 5
1.3.1 Composante bactérienne ..................................................................................... 5
1.3.1.1 Parodontopathogènes ................................................................................... 5
1.3.1.2 Porphyromonas gingivalis ........................................................................... 6
1.3.1.2.1 Facteurs de virulence ............................................................................ 7
1.3.1.2.2 Mécanismes de réponse aux stress ...................................................... 10
1.3.2 Composante inflammatoire ............................................................................... 11
1.4 Polyphénols .............................................................................................................. 12
1.4.1 Généralités ........................................................................................................ 12
1.4.2 Classification .................................................................................................... 12
1.4.3 Thé .................................................................................................................... 14
1.4.4 Thé vert ............................................................................................................. 15
1.4.4.1 Composition ............................................................................................... 16
1.4.4.2 Effets bénéfiques sur la santé générale ...................................................... 17
1.4.4.3 Effets bénéfiques sur la santé buccale ....................................................... 17
1.4.4.3.1 Halitose ............................................................................................... 17
1.4.4.3.2 Carie dentaire ...................................................................................... 18
1.4.4.3.3 Parodontite .......................................................................................... 19
2 PROBLÉMATIQUE ....................................................................................................... 21
2.1 Hypothèse de recherche ........................................................................................... 21
2.2 Objectifs ................................................................................................................... 21
3 MATÉRIEL ET MÉTHODES ........................................................................................ 23
3.1 Composantes à l’étude ............................................................................................. 23
3.2 Souche bactérienne et conditions de croissance ...................................................... 23
3.3 Détermination des concentrations minimales inhibitrices ....................................... 24
3.4 Traitements de Porphyromonas gingivalis .............................................................. 24
3.4.1 Évaluation de l’expression de gènes ................................................................. 25
3.4.1.1 Extraction de l’ARN .................................................................................. 25