tetanotop - Doctor Point

NOTICE D’UTILISATION
TETANOTOP OPTIMA
Ref: 5006
INSTRUCTIONS FOR USE
ALL. DIAG
10, rue Ettoré Bugatti – BP 28006
67038 STRASBOURG Cedex 2 - FRANCE
Tél. : [phone] - Fax : [phone]
www.alldiag.com – [email protected]

Liste des Symboles
Attention, voir notice d’utilisation Tests par coffret
Fabricant
Pour diagnostic in vitro uniquement Péremption
Usage unique
Conserver entre 2-30°C
No. de lot
REF Code produit
Index of Symbols
Attention, see instructions for use Tests per kit
Manufacturer
For in vitro
diagnostic use only Use by
Do not reuse
Store between 2-30°C
Lot Number
REF Catalog #
Directive 98/79/CE
Version 4 – Mise à jour le 20/10/2008
ALL. DIAG
10, rue Ettoré Bugatti – BP 28006
67038 STRASBOURG Cedex 2 - FRANCE
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Fabriquant /
Manufacturer

Alldiag 1 Version 4
TETANOTOP OPTIMA
Réf. N° : 5006
Pour diagnostic in vitro uniquement
Conserver à 2-30°C
1. OBJECTIF
TETANOTOP OPTIMA est un test immunochromatographique rapide pour la détermination semi-quantitative des anticorps anti toxine
tétanique dans le sérum ou le sang total humain.
2. INTRODUCTION
Clostridium tetani est une bactérie qui provoque le tétanos chez les humains. Clostridium tetani est une bactérie à Gram positif, spore
anaérobie formant des bâtonnets. La toxine de Clostridium tetani est une toxine qui se fixe sur les membranes cellulaires des nerfs
périphériques et inhibe l’envoi des neurotransmetteurs des synapses des cellules du système nerveux central. La toxine tétanique affecte les
terminaisons nerveuses de tous les neurones périphériques (neurones moteurs, sensoriels et adrénergiques).
Les anticorps anti toxine tétanique peuvent être produits par le système immunitaire chez l’homme et les autres mammifères par injection de
toxine tétanique inactivée chimiquement (ex. toxoïde tétanique) dans le but de stimuler le système immunitaire afin de produire ces anticorps
rendant ainsi le sujet immun à tous les effets de la toxine tétanique. L’immunisation est le meilleur moyen de prévenir les infections à
C.tetani chez les enfants et les adultes. De plus, l’injection directe d’immunoglobulines anti toxine tétanique purifiées (IgG) peut aussi être
administrée pour contrecarrer les effets d’une infection aigue par la toxine tétanique. Il est parfois souhaitable de connaître le niveau
d’anticorps anti toxine tétanique chez un sujet pour évaluer son statut immunitaire afin de déterminer le besoin d’une vaccination
complémentaire qui assurerait une immunité vis à vis de la toxine tétanique.
Dans le cadre de la médecine d’urgence, la connaissance du statut immunitaire chez les sujets à risque (blessures profondes) peut aider au
choix de la meilleure prophylaxie antitétanique.
3. PRINCIPE
Le test utilise une technique immunochromatographique pour la détection des anticorps anti toxine tétanique dans le sérum ou le sang total. Il
fait appel à une combinaison de toxoide tétanique purifiée fixée sur la membrane et d’une toxoide tétanique marquée au latex. Une réaction
entre un échantillon positif et la toxoide marquée au latex va former un complexe qui va migrer le long de la membrane. Un antigène de
capture (toxoide tétanique purifiée) immobilisé au niveau des zones « T » va fixer le complexe marqué entraînant l’apparition d’une bande
test grise. Une bande de contrôle interne mauve au niveau de la zone « C » permet de valider le bon fonctionnement du test.
4. PRECAUTIONS
1. Pour usage in vitro uniquement
2. Les échantillons et réactifs doivent être amenés à température ambiante avant la réalisation du test.
3. Ne pas utiliser les réactifs au-delà de la date de péremption. L’utilisation des réactifs au-delà de la date de péremption peut affecter le
résultat obtenu.
4. Ne jamais pipeter à la bouche les échantillons et réactifs.
5. Suivre les instructions avec précautions.
6. Ouvrir le sachet juste avant la réalisation du test
7. Ne pas manger, boire ou fumer lors de la manipulation des échantillons et du test.
8. Se munir d’une blouse, de gants et de protection oculaire lors de la réalisation du test.
9. Eviter les éclaboussures et formation d’aérosol.
10. L’humidité et la température peuvent affecter le résultat du test.
11. Les réactifs contenus dans cette trousse contiennent de l’azide de sodium utilisé comme conservateur qui peut réagir avec les
canalisations contenant du plomb ou du cuivre et former des métaux d’azide potentiellement explosifs. Nettoyer abondamment avec de
grands volumes d’eau les canalisations pour éviter la formation d’azide dans les canalisations.
12. Les échantillons peuvent être contaminés par des agents infectieux. Considérer le matériel directement en contact avec les échantillons
comme des produits contaminés. Traiter ensuite les différents éléments du test et les échantillons selon la procédure réservée aux
produits contaminés.
5. STABILITE ET CONSERVATION
Les sachets aluminium contenant les cassettes doivent être conservés entre 2°C et 30°C.
Eviter d’exposer la trousse au chaud ou au froid.
NE PAS CONGELER.
Ne pas utiliser au-delà de la date de péremption indiquée sur le coffret.
6. RECUEIL, PREPARATION ET CONSERVATION DE L’ECHANTILLON
Il est recommandé de tester l’échantillon immédiatement après le recueil. Les échantillons peuvent être conservés 3 jours maximum à 2-8°c.
Les échantillons de sérum peuvent être congelés 6 mois à –20°C.

Alldiag 2 Version 4
7. MATERIEL FOURNI
• 20 sachets aluminium contenant une cassette réactive et un sachet dessicant.
• 20 pipettes de transfert capillaire à usage unique.
• Un flacon de tampon diluant.
• Une notice d’utilisation.
8. MATERIEL NON FOURNI MAIS NECESSAIRE
• Chronomètre avec alarme.
9. PROCEDURE
1. En cas d’utilisation d’échantillons congelés, laisser décongeler et agiter énergiquement puis attendre qu’ils reviennent à
température ambiante pendant au moins 30 minutes avant de réaliser le test.
2. De même, les échantillons conservés à 2-8°C doivent être ramenés à température ambiante pendant au moins 30 minutes avant de
réaliser le test.
3. Ouvrir le sachet aluminium et retirer la cassette TETANOTOP OPTIMA, et la poser sur une surface plane et horizontale. Si possible
identifier la cassette à l’aide d’un marqueur indélébile avec l’identité du patient.
4. Prélèvement, recueil et préparation de l’échantillon
a. Sang total capillaire
1. Désinfecter le doigt. (Fig.1). Piquer la pulpe du doigt avec une lancette à usage unique.
2. Masser le doigt de façon à faire perler une goutte de sang.
3. Prélever cette goutte de sang à l’aide de la pipette de transfert capillaire (Fig.2).
4. Déposer exactement 1 goutte de sang à l’aide de la pipette de transfert capillaire (20µL), dans la zone échantillon de la
cassette (Fig.3).
b. Sérum, sang total veineux recueilli sur EDTA
1. Prélever et recueillir le sérum sur tube sec ou le sang total veineux sur tube EDTA
2. Déposer exactement 1 goutte de sang veineux à l’aide de la pipette de transfert capillaire (20 µL) ou 10µl de sérum à
l’aide d’une pipette de laboratoire, dans la zone échantillon de la cassette.
Attendre l’absorption complète de la goutte de sérum ou de sang dans le puits échantillon. Déposer 3 gouttes de tampon de
dilution au niveau de la zone échantillon de la cassette (Fig.4).
Déclencher le compte à rebours.
Lire le résultat à la cinquième minute.
5. Après la lecture, éliminer la cassette TETANOTOP OPTIMA selon la procédure réservée aux déchets potentiellement infectieux.
Fig.1
Fig.2
Fig. 3
Fig. 4

Alldiag 3 Version 4
10. CONTROLE DE QUALITE
Un contrôle de procédure interne est intégré au test (bande de contrôle « C »). Cela permet de contrôler que la procédure a été suivie
correctement. L’absence de bruit de fond sur la membrane sert de contrôle négatif de procédure interne : Si un bruit de fond important
(coloration rosée trop importante dans la fenêtre résultat) apparaît et empêche une bonne lecture, le résultat doit être considéré comme non
significatif. Il est recommandé d’utiliser des contrôles positifs et négatifs pour vérifier les performances du test pour tout nouveau lot et toute
nouvelle livraison et pour chaque nouvel utilisateur. Déposer 1 goutte (environ 20 µL) à partir du flacon du contrôle positif, ou une goutte
d’un échantillon négatif connu prélevé à l’aide de la pipette de transfert capillaire dans la zone échantillon de la cassette. Placer 3 gouttes de
diluant dans la zone échantillon de la cassette. Un contrôle positif est disponible sur simple appel auprès de la société ALLDIAG.
11. RESULTATS
La lecture visuelle du résultat doit être effectuée à la 5ème minute de migration.
RESULTAT POSITIF :
Présence d’une ligne « Test » colorée en gris et présence d’une ligne « Contrôle » colorée en rose, quelle qu’en soient leurs intensités : Le
test est positif.
Dans le cas d’un test positif, le taux d’anticorps antitétanique dans l’échantillon est supérieur à 0,1 UI/mL
NEGATIF :
Présence d’une seule bande « Contrôle » de couleur rose. Le test est négatif.
Dans le cas d’un résultat négatif, le taux d’anticorps antitétanique dans l’échantillon est inférieur à 0,1 UI/mL.
RESULTAT NON SIGNIFICATIF :
Si aucune bande « contrôle » de couleur rose n’apparait quelque soit la présence ou non d’une ligne Test, le test devra être considéré comme
non valide. Il est nécessaire de recommencer un test.
Test Positif (+)
Test Négatif (-)
Test invalide
12. LIMITES DU TEST
TETANOTOP OPTIMA est destiné à une détermination semi-quantitative du taux d’anticorps IgG anti toxine tétanique sur sérum ou sang total.
L’absence de bande Test (Grise) après la cinquième minute peut témoigner d’un taux d’anticorps anti-toxine tétanique résiduel et non
protecteur.
Le choix de la prophylaxie antitétanique doit également reposer sur des critères cliniques (profondeur et souillure de la plaie).
13. VALEURS ATTENDUES
Selon les recommandations de l’OMS, un taux d’anticorps supérieur à 0,1 UI/mL de sang est considéré comme protecteur vis-à-vis du
TETANOS.
L’absence de bande correspond à une absence de protection rencontrée chez un sujet non vacciné ou non à jour de sa vaccination.
Remarques : En aucun cas, il ne doit y avoir de comparaison entre l’intensité de la ligne et le taux d’anticorps antitétanique dans
l’échantillon.
14. PERFORMANCES
Seuil de détection
L’étude du seuil de détection de TETANOTOP OPTIMA a été réalisée sur plusieurs échantillons dont les titres en IgG anti toxine tétanique ont
été déterminés par ELISA (réactif Virotech ELISA IgG anti toxine tétanique).
Le seuil de détection des anticorps anti toxine tétanique ont été déterminés à la fois sur sang total et sur sérum. Cette étude a permis de
définir le seuil de détection de TETANOTOP OPTIMA à 0,1 UI/ml.
Précision
Intra-essais
L’étude de précision intra-essais a été réalisée sur 10 réplicas de 5 échantillons de sérums et de préparation de sang, dont le taux en anticorps
antitétanique a été déterminé par une méthode ELISA. Aucune discordance entre les résultats obtenus et les résultats attendus n’a été notée.