Etude des facteurs deregeneration, des techniques de

ECOLE NATIONALE SUPERIEURE AGRONOMIE
Thèse en vue de l’obtention du diplôme de Doctorat en Sciences Agronomiques
ETUDE DES FACTEURS DE
REGENERATION, DES TECHNIQUES DE
MULTIPLICATION ET DE PRODUCTION
CAS DU KIWI (Actinidia chinensis PL.)
Présentée par Chérifa CHAOUIA
Soutenu le 10 Décembre 2009
Directeur de thèse : M. SNOUSSI S.A. Professeur USDB, Blida Devant le jury composé de : Mme
DOUMANDJI-MITICHE B. Professeur ENSA Présidente M. BELARBI B. M. Conférences ENSA
Examinateur M. BENMOUSSA M. Professeur USDB, Blida Examinateur

Table des matières
REMERCIEMENTS . . 7
LISTE DES ABREVIATIONS . . 8
Résumé . . 9
Abstract . . 10
الملخص . . 11
INTRODUCTION . . 12
SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE . . 14
CHAPITRE 1 : GENERALITES SUR L’ESPECE ACTINIDIA . . 14
1- Répartition de l’a ctinidia chinensis PL. . . 14
2- Botanique et physiologie . . 15
CHAPITRE 2 : TECHNIQUES DE PROPAGATION . . 18
1- Méthode traditionnelle . . 18
2- Micropropagation par bouturage . . 19
3- Bourgeonnement axillaire . . 19
4- Embryogenèse somatique . . 20
5- Culture de méristème . . 21
6- Culture de protoplastes . . 22
7- Sexage chez l’Actinidia . . 23
MATERIEL ET METHODES . . 25
1- Site de prélèvement et lieu de travail . . 25
2- Matériel végétal . . 25
2-1- Graines . . 25
2-2- Matériel végétal prélevé in- situ . . 28
3-Interprétation statistique . . 29
4- Prise des photographies . . 30
CHAPITRE 1 : ORGANOGENESE . . 31
1- Milieu destiné à induire la callogenèse . . 31
2- Milieu destiné à induire la caulogenèse . . 32
3- Milieu d’allongement des pousses feuillées . . 32
4- Milieu d’enracinement . . 33
5- Conditions de culture . . 34
6- Paramètres étudiés . . 34
7- Bourgeonnement axillaire . . 34
7-1- Plantules âgées de 8 semaines . . 35
7-2- Plantules âgées de 16 semaines . . 36
8-Paramètres étudiés . . 36
CHAPITRE 2 : EMBRYOGENESE SOMATIQUE . . 37
1. Techniques utilisées . . 37
2. Désinfection du matériel végétal . . 37
3- Embryogenèse somatique directe : ESD . . 38

3-1- Tigelles et cotylédons . . 38
3-2- Feuilles . . 39
4- Embryogenèse somatique indirecte (ESI) . . 39
4-1- Plantules d’Actinidia : Station de Boufarik. . . 39
4-2- Plantules d’Actinidia : Station de Jourdain (Toulouse) . . 40
5- Techniques histologiques . . 41
CHAPITRE 3 : CULTURE DE MERISTEME . . 42
1- Prélèvement des méristèmes . . 42
2- Evolution du méristème . . 43
2-1- Phase de bourgeonnement . . 43
2-2- Phase de multiplication et d’allongement . . 44
2-3- Phase d’enracinement. . . 44
3- Conditions de culture . . 44
4- Acclimatation des plantules . . 44
CHAPITRE 1 : ORGANOGENESE . . 46
1- CALLOGENESE . . 46
1-1- Matériel végétal issu de vitro-semis . . 46
1-2- Matériel végétal prélevé in- situ . . 49
2- CAULOGENESE . . 53
2-1- Matériel végétal issu de vitro semis . . 53
2-2- Matériel végétal prélevé in-situ . . 55
3- ALLONGEMENT . . 58
3-1- Matériel végétal issu de vitro- semis . . 58
3-2- Matériel végétal prélevé in-situ . . 59
4-RHIZOGENESE . . 60
5- BOURGEONNEMENT AXILLAIRE . . 62
5-1- Phase de multiplication des plantules de 8 semaines . . 62
5-2- Phases de multiplication des plantules âgées de 16 semaines . . 65
CHAPITRE 2 : EMBRYOGENESE SOMATIQUE . . 69
1- Embryogenèse somatique directe . . 69
1-1- Tigelles . . 69
1-2- Cotylédons . . 69
1-3- Feuilles . . 70
2- Embryogenèse somatique indirecte . . 70
2-1- Feuilles issues de plantules âgées de 8 semaines (station de Boufarik)
. . 71
2-2- Feuilles issues de plantules de 16 semaines (station de Boufarik) . . 75
2-3- Feuilles issues de plantules âgées de 8 semaines (station de Jourdain,
Toulouse) . . 76
3- DISCUSSION ET PERSPECTIVES . . 78
3-1- Embryogenèse somatique directe . . 78
3-2- Embryogenèse somatique indirecte . . 79
CHAPITRE 3 : LA CULTURE DU MERISTEME . . 81

1- Evolution du méristème . . 81
1-1- Phase de bourgeonnement et comportement de l’Actinidia . . 81
1-2-Phase de multiplication et d’allongement . . 84
1-3- Phase d’enracinement des pousses feuillées . . 85
CONCLUSION GENERALE ET PERSPECTIVES . . 88
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES . . 90
ANNEXES . . 99
Annexe 1 : VARIETES FEMELLES D’ACTINIDIA . . 99
Annexe 2 : VARIETES MÂLES D’ACTINIDIA . . 102
Annexe 3 : METHODOLOGIES UTILISEES POUR L’OBTENTION DE
L’EMBRYOGENESE SOMATIQUE DIRECTE CHEZ DIFFERENTES ESPECES . . 102
Annexe 4 : METHODOLOGIES UTILISEES POUR L’OBTENTION DE
L’EMBRYOGENESE SOMATIQUE INDIRECTE CHEZ DIFFERENTES ESPECES . . 105
Annexe 5 :COMPOSITION DU MILIEU DE CULTURE UTILISES . . 108
Annexe 6: ESSAIS DE MULTIPLICATION PAR BOURGEONNEMENT AXILLAIRE AVEC
EXPLANTS ISSUS DE PLANTULES DE 8 SEMAINES . . 111
Annexe 7: ESSAIS DE MULTIPLICATION PAR BOURGEONNEMENT AXILLAIRE AVEC
EXPLANTS ISSUS DE PLANTULES DE 16 SEMAINES . . 111
Annexe 8 : TRAITEMENTS D’INDUCTION D’EMBRYOGENESE SOMATIQUE DE
PLANTULES AGEES DE 8 SEMAINES (BOUFARIK) . . 112
Annexe 9 : TRAITEMENTS D’INDUCTION D’EMBRYOGENESE SOMATIQUE DE
PLANTULES AGEES DE 16 SEMAINES (BOUFARIK) . . 113
Annexe 10 : DEVELOPPEMENT ET DE MATURATION DES EMBRYONS SOMATIQUES
DE PLANTULES AGEES DE 8 SEMAINES (BOUFARIK) . . 113
Annexe 11: DEVELOPPEMENT ET DE MATURATION DES EMBRYONS SOMATIQUES
DE PLANTULES AGEES DE 16 SEMAINES (BOUFARIK) . . 114
Annexe 12 : TRAITEMENTS D’INDUCTION DE CALLOGENESE ET D’EMBRYOGENESE
SOMATIQUE DE PLANTULES AGEES DE 8 SEMAINES (TOULOUSE) . . 115
Annexe 13 : DEVELOPPEMENT ET MATURATION DES EMBRYONS SOMATIQUES DE
PLANTULES AGEES DE 8 SEMAINES (TOULOUSE) . . 115
Annexe 14 : ANALYSE DE LA VARIANCE : TAUX DE LA CALLOGENESE (VITRO-
SEMIS) . . 116
Annexe 15 : VARIATION DU TAUX DE LA CALLOGENESE EN FONCTION DES
DIFFERENTS MILIEUX ET TYPE D’EXPLANTS (VITRO- SEMIS) . . 116
Annexe 16 : ANALYSE DE LA VARIANCE : POIDS FRAIS DES CALS (VITRO- SEMIS)
. . 117
Annexe 17 : VARIATION DU POIDS FRAIS DES CALS (mg), EN FONCTION DES
DIFFERENTS MILIEUX ET TYPES D’EXPLANTS (VITRO- SEMIS) . . 117
Annexe 18 : ANALYSE DE LA VARIANCE : POURCENTAGE DE CALLOGENESE (IN
SITU) . . 118
Annexe 19 : VARIATION DU TAUX DE LA CALLOGENESE EN FONCTION DES
DIFFERENTS MILIEUX ET TYPES D’EXPLANTS (IN SITU) . . 118
Annexe 20 : ANALYSE DE LA VARIANCE : POIDS FRAIS DES CALS (mg) (IN SITU) . . 118
Annexe 21 : VARIATION DU POIDS FRAIS DES CALS (mg), EN FONCTION DES
DIFFERENTS MILIEUX ET TYPES D’EXPLANTS (IN SITU) . . 119
Annexe 22 : ANALYSE DE LA VARIANCE : TAUX DE POUSSES FEUILLEES
DEVELOPPEES (VITRO- SEMIS) . . 119