Vincent Galy Nom et adresse du Laboratoire ou de l’Unité

Stage proposé par
Vincent Galy
Nom et adresse du Laboratoire ou de l’Unité :
UMR7622 - Laboratoire de Biologie du Développement, Institut de Biologie Paris Seine, UPMC, Paris
Téléphone : 0144273494
Mail : [email protected]
Site internet : http://dev-nematode.snv.jussieu.fr/Home.html
Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Sylvie Schneider-Maunoury
Equipe d’accueil : C. elegans Hérédité et Développement
Prénom et NOM du Responsable de l’équipe : Vincent Galy
Résumé du thème de recherche de l’équipe
La fécondation de l'ovocyte par un spermatozoïde est une étape clé de la reproduction sexuée qui
provoque des transformations radicales et rapides dans l'oeuf. La contribution génétique et
épigénétique n'est pas la même pour les deux gamètes puisque le génome des mitochondries n'est
transmis que par l'ovocyte. Cette transmission uniparentale maternelle est une caractéristique
conservée chez de nombreuses espèces expliquant la transmission par la mère de certaines maladies
mitochondriales chez l'Homme. Les mécanismes responsables de l'exclusion ou de la dégradation
dans l'oeuf des mitochondries paternelles et leurs génomes sont toujours mal compris. C'est en
utilisant le nématode C. elegans que nous sommes parvenus à identifier le mécanisme principal de
cette dégradation : l'autophagie. Notre objectif est maintenant de comprendre :
- Comment sont ciblées les mitochondries paternelles?
- Quels sont les mécanismes embryonnaires garants de l’hérédité maternelle et de l’homoplasmie du
génome mitochondrial?
Titre du projet de stage : Etude de la transmission du génome mitochondrial
Prénom, NOM, téléphone et adresse e-mail du Responsable du stage:
Vincent Galy, 0144273494, [email protected]
Projet de stage :
Le stage proposé pour un Master 2 aura pour objectif d’analyser la distribution et la
transmission du génome mitochondrial entre les blastomères au cours des divisions cellulaires de
l’embryon précoce de C. elegans et de quantifier expérimentalement le nombre de molécules d’ADN
mitochondrial transmises à la descendance par l’intermédiaire des cellules germinales primordiales
(PGCs). Vous utiliserez des techniques d’imagerie sur l’embryon vivant, qui constituent une des
spécialités de l’équipe et qui possède son propre microscope confocal à tête rotative. Vous mettrez
également en œuvre une approche par QPCR sur des blastomères dissociés et triés par FACS. En
complément, vous tenterez d’identifier les mécanismes qui contrôlent cette quantité. Dans ce but,
vous testerez l’impact sur la quantité d’ADN mitochondrial dans les PGCs de la déplétion, par RNAi,
de protéines candidates connues comme agissant dans la dégradation des mitochondries. Avec cette
étude, réalisée dans un système biologique métazoaire au développement simple et stéréotypé, nous
devrions clarifier un des aspects responsable de la transmission uniparentale maternelle et clonale du
génome mitochondrial.
Approches et techniques mises en œuvre :
RNAi, imagerie du vivant, analyse quantitative d’images de microscopie, Q-PCR, FACS
Publications du Responsable de stage au cours des 5 dernières années :
• « Sperm-inherited organelle clearance in C. elegans relies on LC3-dependent autophagosome
targeting to the pericentrosomal area. » Djeddi A, Al Rawi S, Deuve JL, Perrois C, Liu Y-Y, Russeau M,
Sachse M, Galy V. Development 2015 ; 142, 1705-1716.
• « Modern Tools to Study Nuclear Pore Complexes and Nucleocytoplasmic Transport in
Caenorhabditis Elegans.» Askjaer P, Galy V, Meister P. Methods in Cell Biol 2014;122:277-310.
• « A generic classification-based method for segmentation of nuclei in 3D images of early embryos.»
Gul-Mohammed J, Arganda-Carreras I, Andrey P, Galy V, Boudier T. BMC Bioinformatics 2014 Jan
14;15(1)9.
• « Guidelines for the use and interpretation of assays for monitoring autophagy.» Klionsky DJ, Galy V
et al. Autophagy 2012 Apr;8(4):445-544. Review.
• « Allophagy: A macroautophagic process degrading spermatozoid-inherited organelles.» Al Rawi S,
Louvet-Vallée S, Djeddi A, Sachse M, Culetto E, Hajjar C, Boyd L, Legouis, Galy V. Autophagy 2012
Mar 1;8(3). Punctum.
• « A quantitative method for measuring photoxicity of a live cell imaging microscope.»
Tinevez JY, Dragavon J, Baba-Aissa L, Roux P, Perret P, Canivet A, Galy V and Shorte S. Methods
in enzymology. Methods Enzymol. 2012;506:291-309.
• « Postfertilization autophagy of sperm organelles prevents paternal mitochondrial DNA
transmission » Al Rawi S, Louvet-Vallée S, Djeddi A, Sachse M, Culetto E, Hajjar C, Boyd L, Legouis,
Galy V. Science. 2011 Oct 27.
Autres informations:
Etudiants actuellement en thèse ou en M2 dans l’équipe d’accueil.
• Sara Al Rawi, Dir. V. Galy, 2012, CDV
Etudiants ayant préparé ou soutenu leur thèse ou leur M2 dans l’équipe d’accueil au cours des
six dernières années.
• Eve Corot-Morel, Resp V. Galy, thèse 2009-2013, CDV
• Laure Etourneau, Resp S. Louvet, M2, 2012, UPMC
Cette proposition de stage s’adresse-t-elle spécifiquement à un étudiant scientifique, médecin
ou vétérinaire ou bien est-il ouvert à tous les profils ?
Tous les profils
Ce sujet peut-il donner lieu à une thèse ?
Oui