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qLe phénotype macroscopique d'un individus est déterminé par le phénotype de
ses différents organes, lui-même déterminé par le phénotype des cellules qui le
composent.
q
qLe phénotype cellulaire repose sur la chimie interne de la cellule, spécifiée par
les enzymes qui catalysent les réactions métaboliques.
q
qLe phénotype moléculaire décrit justement ces enzymes dont l'activité dépend
de leur structure tridimensionnelle, elle-même dépendante de sa structure
primaire.
q
qLa séquence en acides aminés des enzymes (structure primaire) ou des
protéines de structure est déterminée par la séquence nucléotidique du gène
associé, et qui se définit alors par le génotype.
èIl y a bien une relation entre le phénotype et le génotype.
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Ces expériences durent réalisées en 1941 sur Neurospora. Leur hypothèse de
travail était : "À gène donné correspond une enzyme". Ils ont utilisé dans
mutants auxotrophes.
Ils ont utilisé les concepts d'accumulation et de supplémentation. Imaginons
un mutant dont le gène b codant pour la protéine B a été muté :
En observant les effets de la supplémentation sur plusieurs mutants, on peut
déterminer le métabolisme étudié. Seulement dans la réalité, il faut prendre en
compte beaucoup d'autres paramètres :
àPlusieurs gènes peuvent coder pour une même sous-unité d'un même
complexe enzymatique
àUn gène peut coder, non pas pour une protéine, mais pour un ARN qui peut
assurer une fonction enzymatique (ex : ARNr)
àUn gène peut coder pour une protéine qui n'a pas d'activité enzymatique
(ex : protéines de structure)
àUn gène peut coder pour une protéine multifonctionnelle
Gène a Gène b Gène c
A
12B3C4
Accumulation
de 2 Lorsqu'on injecte du 3,
réapparition de 4. C'est
la supplémentation.
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Le test de complémentation ( ou test cis-trans ) permet de déterminer si deux
mutants de même phénotype ont une mutation sur le même gène ( et donc seraient
tous deux en fait les mêmes types de mutants ).
àOn utilise des hétérocaryons, qui sont la fusion de deux types de spores.
lTest cis : vérifier que l'allèle sauvage domine l'allèle mutant :
lTest trans : mise en présence des deux mutants :
Ainsi deux allèles mutants récessifs conduisant au même phénotype peuvent
être différenciés selon que leur mutation soit sur le même gène ou pas.
Noyau de souche
mutante 1 Noyau de souche
sauvage
èSi l'hétérocaryon est prototrophe,
l'allèle sauvage est dominant, on peut
alors effectuer le test trans
àOn effectue un deuxième test sur
l'autre gène aussi
Noyau de souche
mutante 1 Noyau de souche
mutante 2
èSi l'hétérocaryon
est prototrophe, il y a
complémentation.
Noyau de souche
mutante 1 Noyau de souche
mutante 2
èSi l'hétérocaryon est
auxotrophe, il n'y a pas
complémentation, les mutants ont
une mutation sur le même gène.
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