PBA Effet de la lumière bleue sur la composition biochimique et la réponse photosynthétique d’Isochrysis affinis galbana J. Marchetti*1, T. Jauffrais1, G. Bougaran 1, S. Lefèbvre2, B. Saint-Jean 1, E. Lukomska1, R. Robert 3, J.P. Cadoret 1 Laboratoire Physiologie et Biotechnologies des Algues, IFREMER, Rue de l’île d’Yeu BP 21105 44311 Nantes cedex 3, France 2 Laboratoire d’Océanographie et Géosciences, UMR CNRS 8187, Station Marine de Wimereux, 28 avenue Foch, 62930 Wimereux, France 3 Laboratoire Physiologie des Invertébrés, UMR100, IFREMER, Station d’Argenton, Presqu’île du vivier 29840 Argenton en Landunvez, France 1 Introduction La plasticité métabolique des microalgues constitue un enjeu majeur pour leur valorisation dans divers domaines d’application et notamment en aquaculture. De nombreuses études ont, en effet, montré que la qualité biochimique des microalgues peut sensiblement influencer les performances des élevages de mollusques marins. Isochrysis affinis galbana, microalgue aquacole cultivée dans la plupart des écloseries françaises, a déjà vu sa croissance et sa composition biochimique modifiées par différents facteurs environnementaux (température, pH, nutriments…) et notamment par la lumière. Cependant, l’influence de la qualité de la lumière demeure inexplorée pour cette espèce. Pourtant, il a été démontré que la modification du spectre lumineux pouvait influer sur la croissance, la composition en stérols, l’activité photosynthétique ou encore le contenu pigmentaire de différentes espèces de diatomées. Nous nous proposons donc dans cette étude d’évaluer les modifications biochimiques et métaboliques engendrées par un spectre lumineux monochromatique bleu. Figure 1 – Cellule d’Isochrysis affinis galbana (x100) Matériels et méthodes 1 – Procédure expérimentale Dans cette étude, des cultures en continu ont été réalisées en photobioréacteurs de 3,5 L soumis à 330 µmol de photons. m-2.s-1 d’une lumière blanche ou bleue (Figure 2). Pour chaque conditions de lumière, deux taux de dilution différents ont été testés : 0,7 et 0,2 j-1. 2 – Cultures et suivis Après acclimatation lumineuse (110 µmol.m-2.s-1), les cellules de T-iso CCAP 927/14 (Figure1) sont inoculées en eau de mer enrichie en milieu de Conway (3mL/L). Pour chaque condition expérimentale, le pH est régulé à 7,2 ± 0,1, par injections automatiques de CO2, et la température à 26 ± 1 °C. Chaque jour, le taux de dilution (D) des cultures est vérifié, et la concentration cellulaire (X) évaluée par spectrophotomètrie (680 et 800 nm) et par comptages en analyse d’images. L’état d’équilibre est ainsi déterminé lorsque la croissance est stable pendant au moins 3 jours. 3 – Mesures et analyses A l’état d ’équilibre, la productivité (P) est calculée selon l’équation: P= X.D La composition biochimique de T-iso est ensuite déterminée : pour les glucides, selon la méthode de Dubois et al. (1956). pour les lipides, par pesée, après extraction selon Folch et al., 1957. et pour les protéines selon un protocole adapté de la méthode de Barbarino et Lourenço (2005). Figure 2 – Dispositif expérimental pour l’évaluation de l’influence de la lumière bleue sur la composition biochimique de T-iso La chlorophylle a est également quantifiée, grâce à la méthode de Lorenzen ( 1967), et les quotas cellulaires de carbone (C) et d’azote (N) grâce à un analyseur CHN (Thermo scientific EAGER 300). L’activité photosynthétique est évaluée à l’aide d’une électrode de Clark (Hansatec DW3 oxylab) par mesure de la production d’oxygène pour des intensités lumineuses comprises entre 0 à 500 µmol.m-2.s-1. puis modélisées comme une fonction de l’intensité lumineuse par un modèle d’Haldane . Résultats D’après les résultats obtenus, il apparaît clairement que la qualité spectrale de la lumière ne modifie pas la productivité de T-iso (Figure 3) mais peut influer sur son métabolisme. En effet, le contenu en chlorophylle a (Figure 4) et en glucides (Figure 5) sont significativement (α=5%) plus faibles en lumière bleue qu’en lumière blanche tandis que son activité photosynthétique est plus élevée (Figure 6; α=5% ). En revanche, le contenu en lipides et le Figure 3 – Productivité de T-iso selon le taux de dilution et le type de lumière Figure 4 – Quantité de chlorophylle a selon le taux de dilution et le type de lumière quota cellulaire en azote restent inchangés quelque soit la qualité de lumière appliquée. Par ailleurs, le taux de dilution, influence aussi bien la productivité de T-iso, significativement plus élevée (α=5%) à fort taux de dilution, que son métabolisme. Ainsi, de forts taux de dilution entraînent une augmentation significative (α=5%) du quota cellulaire en azote et de l’activité photosynthétique (Figure 5 et 6) mais aussi une diminution de la quantité de glucides (Figure 4). En revanche, le contenu en lipides ne montre aucune variation significative avec le taux de dilution. Il est important de noter que des modifications ont également été engendrées pour une Figure 5 – Composition biochimique de T-iso selon le taux de dilution et le type de lumière Figure 6 – Quotas cellulaires en Carbone (QC) et en azote (QN) de T-iso selon le taux de dilution et le type de lumière combinaison donnée de taux de dilution et de type de lumière. Ainsi, le contenu en protéines est significativement plus élevé et le quota de carbone plus faible en lumière bleue mais uniquement pour des forts taux de dilution. De la même manière, le contenu en chlorophylle a ne diminue avec le taux de dilution que pour un spectre lumineux blanc. Conclusion En conclusion, cette étude a montré que des modifications sensibles du métabolisme et de la composition biochimique de T-iso peuvent être induites par l’utilisation d’une source de lumière de spectre bleu, et amplifiées selon le taux de dilution choisi. L’orientation métabolique des microalgues offre ainsi une alternative aux régimes par Figure 7 – Activité photosynthétique de T-iso en fonction de l’intensité lumineuse reçue par les cellules pour les 4 conditions de culture : les données expérimentales (points) et les barres d’erreurs correspondent aux valeurs moyennes et aux écart-types des trois réplicats; les lignes pleines représentent l’application d’un modèle d’Haldane pour chacune des conditions. * E-mail: [email protected] substitution d’espèces, utilisés classiquement dans les études sur la nutrition des mollusques bivalves. 2010 - Colloque algues : filières du futur-