N.Lepouder, Protocole du TP : Extraction de L’ADN, niveau 3ème et seconde, 8 octobre 2009
Principe de l’extraction :
Il s’agit d’extraire et de colorer l’ADN à partir de différents échantillons (Kiwis, bananes,
oignons, pomme, saumon, talc….).
On utilise des produits aux propriétés spécifiques :
- Les grains de sel ont un rôle abrasif : ils permettent de déchirer les tissus.
- Le liquide vaisselle désorganise les membranes.
- L’éthanol réfrigéré et le sodium du sel provoquent la précipitation des molécules
d’ADN.
- Le vert de méthyle est un colorant spécifique de l’ADN : il colore en vert la molécule
d’ADN.
Matériel :
Scalpel
Protocole d’extraction de l’ADN
N.Lepouder, Protocole du TP : Extraction de L’ADN, niveau 3ème et seconde, 8 octobre 2009
Réalisation :
Couper l’échantillon végétal en petits morceaux à l’aide du scalpel et broyer dans un
mixeur avec une cuillère à soupe de gros sel et la même quantité de liquide vaisselle
(pour une banane ou 2 kiwis).
Verser le broyat dans un bécher et ajouter de l’eau distillée. Mélanger en s’aidant de
l’agitateur jusqu’à ce que le mélange ait une consistance liquide.
Placer le filtre dans l’entonnoir et poser sur le deuxième bécher.
Verser le mélange dans le filtre puis recueillir le filtrat dans le tube à essai.
Ajouter au filtrat deux volumes d’éthanol frigéré en versant le long de la paroi du
tube à essai doucement. Un précipité contenant de l’ADN se forme.
Ajouter quelques gouttes de vert de méthyle et observer après quelques minutes.
Remarque : Ne pas oublier de laver la verrerie utilisée à la fin du TP.
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