Contrôle de la Croissance Microbienne Méthodes Terminologie

6/28/2016
1
Contrôle de la Croissance
Microbienne
Les Désinfectants et Antiseptiques
1
Méthodes
•Trois approches pour le contrôle de la
croissance microbienne
–Chimique
•Désinfectants et antiseptiques
–Physique
•Chaleur
•Ultraviolets
•Irradiations
–L'élimination mécanique
•Nettoyage
•Filtration 2
Terminologie
•Nettoyage
–L'élimination des souillures adhérentes visibles (le
sang, les protéines et les débris), de la poussière
ou des autres corps étrangers par un processus
manuel ou chimique
• N’implique pas la présence ou l’absence de
microorganismes
–Propreté  Stérilité
3

6/28/2016
2
Désinfection
• L’utilisation d’agents chimiques ou physiques
pour tuer ou inhiber la croissance des
microorganismes
–Désinfectants
•Produits chimiques utilisés pour des objets inanimés
–Germicides
•Produits chimiques qui peuvent être appliqués sur des
choses animées (vivantes) ou inanimées
–Antiseptiques
•Produits chimiques utilisés sur des tissus vivants
4
Facteurs qui Influencent l’Efficacité
•Charge microbienne
–Nombre de microbes
•Environnement
–Présence de matières organiques
– Concentration de l’agent
–Température
–pH
• Durée d’exposition
5
Facteurs qui Influencent l’Efficacité
•Caractéristiques microbiennes
–Biofilms
–Paroi cellulaire
–Résistances
–Spores
6

6/28/2016
3
Ordre de Sensibilité
Virus lipophiliques
(Avec bi-couche lipidique, Virus enveloppé)
Bactéries Gram positives (cellules végétatives)
Bactéries Gram négative
Fungi
Virus hydrophiles (non enveloppé, virus nu)
Mycobactéries (Mycobacterium tuberculosis)
Spores bactériennes
7
Plus sensible
Plus résistant
Désinfectants et Antiseptiques
•Caractéristiques idéales
– Spectre d’action large
–Puissant
•Faible quantité requise pour une efficacité élevée
–Faible niveau de toxicité chez les humains
–Non corrosif
–Stable
–Hydrophile et hydrophobe
–Tension de surface faible
–Sans odeur ou avec une odeur agréable
8
Modes d’Action des Agents Chimiques
• Dénaturation des protéines et de l’ADN
• Mutagénèse de l’ADN
• Modification des protéines ou de l’ADN
•Interférence avec la membrane plasmique
•Oxydation de groupements fonctionnels
9

6/28/2016
4
Évaluation de l’Efficacité d’un
Désinfectant
•Test de suspension quantitatif
–Des comptes viables sont faits sur un microbe
tests exposé à un agent chimique
–Le nombre de survivants (B) et compté puis
compare au compte original de l’inoculum (A)
•Effet Microbicide (EM) = Log (A) - Log (B)
• EM = 1 → Mortalité de 90% du nombre initial
• EM = 2 → Mortalité de 99%
– L’exigence généralement acceptée est:
• EM ≥ 5 →99.999% des microbes sont tués 10
Profil de Mortalité
•La mort est exponentielle
– N’est donc pas possible d’atteindre zéro
•Normes établies:
–PTM et DTM: < 1 cellule
–Stérilité en laboratoire: 10-6 cellules ou spores
–Stérilité alimentaire: 10-12 cellules ou spores
11
0
20000
40000
60000
80000
100000
120000
140000
0 5 10 15 20
Nombre de cellules
Temps (Min.)
Profil Arithmétique
1
10
100
1000
10000
100000
1000000
0 5 10 15 20
Nombre de cellules
Temps (Min.)
Profil Logarithmique
Paramèetres de Mortalité
•Temps de réduction décimale (D)
– Temps requis pour obtenir une réduction d’un log
ou un facteur d’inactivation de 10
–Formule: Log (N/N0) =-t/D
•T: durée de temps
•N: nombre de cellules qui ont survécu
•No: nombre de cellules initiales
–No/N: Facteur d’inactivation
12
1
10
100
1000
10000
100000
1000000
0 5 10 15 20
Nombre de cellules
Temps (Min.)
Profil Logarithmique

6/28/2016
5
Calculs de la Mortalité
•Constante de mortalité (k)
–Taux de mortalité
•Pente négative
–Formule: -kt = ln No/N
•T: durée de temps
•N: nombre de cellules qui ont survécu
•No: nombre de cellules initiales
–No/N: Facteur d’inactivation
13
1
10
100
1000
10000
100000
1000000
0 5 10 15 20
Nombre de cellules
Temps (Min.)
Profil Logarithmique
Exemple
•Un traitement à 100oC pour 1h permet de
réduire une population bactérienne de 108 à
102 cellules
– Quel est le facteur d’inactivation accompli
–Quel est le taux de mortalité?
–Combien de temps serait requis pour réduire la
population à 102
14
15
Déterminer D à partir d’un Graphique
1
10
100
1000
10000
100000
1000000
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
Nombre de cellules
Temps (Min.)
Tracé logarithmique